要決定一台儀器能否用於純化,須考慮它的物理參數。在準備純化系統時,需要注意自動化、幫浦、偵測器流體槽、進樣器、管路、管柱和餾分收集器等設備。模組系統能發揮充分的靈活性,因應高通量需求增加的情形。
自動化程度通常取決於使用者的工作流程和預算。一般來說,新創公司和大學實驗室需要的通量低,傾向人工或半自動化系統,而大型製藥或製造公司則常會使用高通量、自動化的系統。
需要一台小型電腦,以便在等度和梯度模式下,控制二元、三元和四元系統中的幫浦流速和溶劑組成。電腦軟體也會記錄偵測器和餾分收集器的輸出內容。根據軟體套件的複雜程度,還可用於執行方法開發模擬和處理數據。
溶劑輸送系統或幫浦是層析分離的核心。無論溶劑的可壓縮性如何,用於層析分離的幫浦都必須提供無脈衝、精準無誤和可再現的流速。可根據目標流速選擇純化幫浦,例如0.5 mL/min用於小規模純化,150 mL/min或以上用於大規模純化。幫浦可以在高壓(二元)或低壓(四元)條件下混合溶劑。
二元梯度模組可以在混合槽中混合兩種不同的溶劑。混合槽後面有一個阻尼器、一個第二混合器和一個清除閥。混合溶劑的組成取決於兩個溶劑通道輸送的不同流量。高壓混合幫浦對移動相中溶解的氣體不太靈敏,一般不需要對溶劑進行脫氣。
所以幫浦的系統體積可以大大縮減,在分析和製備規模上提供精確等效的效能。
四元幫浦可提供多達4種不同溶劑的梯度,還能使用短時間打開的閥門。閥門的用途是在低壓下以正確的比例混合少量不同的溶劑。使用這種幫浦策略,溶解的氣體會分離而形成氣泡,讓後續流路的壓縮、注入、分離和偵測出現問題。因此,移動相必須除氣。可以使用線上除氣機、氦氣噴灑或手動真空除氣的方式來處理。這些幫浦可在其指定的流速範圍內提供非常精準無誤的溶劑比例。
上樣 |
管柱內徑 |
流體處理裝置 |
最大流速 |
µg–mg |
3.9–7.8 mm |
1525二元HPLC幫浦* |
10 mL/min |
µg–10s mg |
3.9-19 mm |
1525二元HPLC幫浦*和EF套組 |
22.5 mL/min |
mg–10s mg |
3.9-50 mm |
2535四元梯度模組 |
50 mL/min |
m–g |
4.6-50 mm |
2545二元梯度模組* |
150 mL/min |
m–g |
4.6-50 mm |
2545四元梯度模組 |
150 mL/min |
mg–10s g |
7.8-75 mm |
2555四元梯度模組 |
300 mL/min |