분취용 액체 크로마토그래피 입문서

정제에 특화된 기기를 갖추기 위한 실질적인 방법으로 물리적 파라미터를 사용하는 것이 좋습니다. 자동화, 펌프, 검출기 플로우 셀, 주입기, 튜브, 컬럼 및 분획 분취기(Fraction Collector)도 정제 시스템을 준비할 때 고려해야 하는 대상입니다. 모듈식 시스템은 탁월한 유연성을 제공하며 처리량에 대한 요구가 증가함에 따라 적절히 조정할 수 있게 설계되었습니다.

자동화 수준은 대개 사용자의 워크플로우와 예산에 따라 결정됩니다. 일반적으로 스타트업과 대학 실험실에서는 처리량에 대한 요구가 크지 않아 수동 또는 반자동 시스템이 적합하고, 대규모 제약회사 또는 제조회사는 높은 처리량과 고도의 자동화 시스템이 요구되는 경우가 많습니다.

소프트웨어 및 시스템 제어

등용매 및 그래디언트 모드에서 binary, ternary 및 quaternary 시스템의 용매 조성과 펌프 유속을 제어하기 위해​소형 컴퓨터가 필요합니다. 컴퓨터 소프트웨어는 검출기 및 분획 분취기(Fraction Collector)에서 출력된 데이터를 기록하는 작업도 수행합니다. 고급 소프트웨어 패키지의 경우에는 분석법 개발을 시뮬레이션하고 데이터를 처리하는 기능도 이용할 수 있습니다.

펌프

용매 전달 시스템 또는 펌프는 크로마토그래피 분리의 핵심입니다. 크로마토그래피에 사용되는 펌프는 용매 압축률에 관계없이 파동이 없고 정확하며 재현성 있는 유량을 제공할 수 있어야 합니다. 정제 펌프는 소규모 정제의 경우 0.5mL/분, 대규모 정제의 경우 150mL/분 이상을 목표 유량으로 잡고 선택해야 합니다. 펌프는 고압(binary) 또는 저압(quanternary) 조건에서 용매를 혼합할 수 있습니다.

Binaryy 그래디언트 모듈은 혼합 챔버에서 두 가지 다른 용매를 혼합할 수 있습니다. 이 챔버 다음에는 댐퍼, 두 번째 믹서 및 퍼지 밸브가 위치하고 있습니다. 생성된 용매 조성은 두 용매 채널에 의해 전달되는 서로 다른 흐름에 의해 정의됩니다. 고압 혼합 펌프는 이동상에 용해된 가스에 덜 민감하며 일반적으로 용매를 탈기할 필요가 없습니다.

그 결과 펌프의 시스템 부피가 크게 줄고 분석 스케일과 분취 스케일 모두에서 정확하고 동등한 성능을 제공할 수 있습니다.

Quaternary 펌프는 최대 4가지 용매 그래디언트를 제공할 수 있으며 짧은 시간 동안 개방되는 밸브를 사용합니다. 이러한 밸브를 사용하면 낮은 압력에서 소량의 복수 용매를 적절한 비율로 혼합할 수 있습니다. 이러한 펌핑 방식을 이용하면 용해된 가스가 분리되어 기포를 형성하므로 나중에 유동 경로에서 압축, 주입, 분리, 검출 문제를 일으킬 수 있습니다. 따라서 이동상을 탈기시켜야 합니다. 이를 위해 인라인 탈기 장치, 헬륨 스파징(sparging) 또는 수동 진공 탈기 방식을 이용할 수 있습니다. 이러한 펌프는 지정된 유량 범위에서 매우 정확하고 정밀한 용매 비율을 제공합니다.