튜빙
유체 경로에 적절한 튜브를 결정할 때 몇 가지 고려해야 할 사항이 있습니다. 첫째, 시스템 유동 경로에 있는 튜브의 무결성을 보장하려면 튜브 재질과 적용 분야에 대한 적합성을 고려하는 것이 가장 중요합니다. 튜브는 PEEK(polyether ether ketone) 고성능 엔지니어링 폴리머 또는 스테인리스 스틸로 만들어지며 샘플이 튜브 표면에 달라붙어 샘플이 손실되거나 회수율이 낮아지거나 carryover가 발생하지 않게 하려면 샘플 및 이동상과 화학적으로 호환되어야 합니다.
시스템 튜브도 유동 경로의 압력 및 작동 온도를 견딜 수 있어야 합니다. 다만 정제 크로마토그래피의 경우 유체 경로의 온도 제어가 종종 사용되지 않으므로 온도 제어는 중요하지 않을 수 있습니다.
압력 제한이 고려 요소일 때는 크로마토그래피 정제 시스템을 세 구역으로 분리할 수 있습니다. 즉, 용매 저장소와 펌프 사이의 “저압” 구역, 펌프와 컬럼 주입구 사이의 “고압” 구역, 그리고 컬럼의 배출구와 검출기 뒤 폐기물 저장소 또는 분획 분취기(Fraction Collector) 사이의 두 번째 “저압” 구역입니다. 각 구역의 튜브에는 고유한 압력 유지 요건이 적용됩니다. 중요한 요구사항이 적용되는 압력 구역에서 부적절한 튜브 재질을 선택하면 성능 저하와 크로마토그래피 문제뿐만 아니라 누출과 파열이 발생할 수도 있습니다.
튜브 내경과 튜브 길이의 두 가지 변수를 고려해야 합니다. 일반적으로, 내경이 작을수록 내부 속도가 빨라지고 샘플이 잘 분산되지 않아 샘플을 가능한 한 농축된 상태로 유지할 수 있습니다. 그러나 튜브 내경이 감소할수록 튜브에 의해 발생하는 압력이 크게 증가하여 검출기 플로우 셀 또는 기타 시스템 구성요소와 호환되지 않을 정도로 시스템 역압이 커질 수 있습니다. 내경이 서로 다른 튜브를 연결하면 접합부 또는 그 부근에서 무용 부피(dead volume)가 형성될 수 있습니다. 이 무용 부피는 유체 또는 이동상에 의해 적절하게 채워지지 않기 때문에 피크 모양 문제와 carryover를 유발할 수 있습니다.
튜브 길이를 고려할 때는 생성되는 유동 경로의 부피가 클수록 이동상에서 샘플이 희석되고 분리된 성분이 다시 합쳐질 가능성이 커진다는 점을 염두에 두어야 합니다. 튜브 길이는 시스템 압력, 지연 부피 및 엑스트라 컬럼 볼륨에도 영향을 줄 수 있습니다. 이러한 문제를 방지하기 위해 튜브 길이를 고려해야 합니다.
대규모 분취 정제 시스템은 일반적으로 높은 유속으로 작동합니다. 이러한 유속으로 인한 역압을 완화하여 고품질 크로마토그래피 결과를 보장하려면 적절한 직경의 튜브로 정제 시스템을 연결하는 것이 중요합니다. 0.05~130mL/분의 유속에 맞는 다양한 튜브 직경이 제공됩니다.
