電子轉移解離(ETD)
分析轉譯後修飾和自上而下的生物分子定序
電子轉移解離(ETD)功能升級專為最大限度提高可信度、靈活性和易用性而開發，專門用於電噴灑游離，為胜肽和蛋白質的定序和結構分析提供了一個強大的平台。
ETD和碰撞誘發解離(CID)互補，已證明對胜肽和蛋白質的不穩定轉譯後修飾(PTM)位點之位點特異性測定特別有用。ETD是一種自由基驅動的碎裂技術，會裂解胜肽的N-Cα鍵，產生c和z●形式的胜肽產物離子（而CID產生b和y離子），因此能精確定位磷酸化反應的發生位點。予體試劑陰離子轉移電子到帶正電的陽離子，使胜肽/蛋白質發生解離，這和電子捕獲解離(ECD)的碎裂過程本質上相似。
電子轉移解離(ETD)
概述
- 高效能 — 高解析度、精確質量數據和高反應效率可生成最高品質的序列數據。
- 靈活性 — 使用一系列高效率試劑以及採用配備ETD的離子遷移分離(IMS)進行高級基礎研究。適用於傳統和nanoFlow電噴灑游離源。
- 易於使用和維護 — 透過簡單的ETD輝光放電游離源，可輕鬆、穩定地將ETD試劑引入MS並快速補充。
ETD游離源操作
ESI游離源配備一個快速高效率的中壓輝光放電試劑陰離子源。在ETD實驗過程中，依次產生陽離子和陰離子。切換游離源極性和四極桿的設定質量，將多電荷母離子陽離子和單電荷試劑自由基陰離子（通常來自對苯二甲腈[m/z 128]）依次輸送到捕獲區域的T-Wave離子導引中，兩種離子在此發生交互作用，形成ETD產物離子。
在輝光放電游離源中形成的試劑陰離子，會被捕集到儀器的Triwave捕獲區域T-Wave離子導引中，與分析物離子發生快速的電子轉移反應。ETD產生的多電荷胜肽離子主要是c和z碎片離子。
試劑陰離子的形成和捕獲，以及樣品離子的形成和反應，都是兩個獨立的過程。在ETD模式下運作時，儀器會在輝光放電模式和ESI模式之間交替切換，輝光放電模式可有效地用陰離子重新填充捕獲區域的T-Wave離子導引，而ESI模式則可將樣品離子化並使其與ETD試劑陰離子發生反應。
採集期間，捕獲區域的T-Wave離子導引只用於ETD，而傳輸區域的T-Wave離子導引仍可用於CID。因此可以在同一實驗中同時擷取ETD和CID數據。
儀器相容性
電子轉移解離(ETD)功能升級適用於以下儀器：
- (MALDI) SYNAPT G2 MS、(MALDI) SYNAPT G2 HDMS
- (MALDI) SYNAPT G2-S MS、(MALDI) SYNAPT G2-S HDMS
- (MALDI) SYNAPT G2-Si MS、(MALDI) SYNAPT G2-Si HDMS
除了SYNAPT G2-Si之外，每種類型的SYNAPT儀器都有兩種不同的升級產品。這是為了考慮到那些尚未「安裝ETD」的儀器。已安裝ETD的儀器可以藉由序列號前綴來識別。所有SYNAPT G2-Si儀器均已「安裝ETD」。
早期的SYNAPT G2系列MALDI儀器可能還需一個與ETD相容的MALDI游離源轉接板備品。
設備與安裝
電子轉移解離(ETD)功能現場升級包括以下內容：
- ETD輝光放電游離源和放電針。
- 試劑樣品架蓋、氣體處理硬體和閥。
- 備用的游離源pcb組件、捕獲和傳輸區域的T-Wave電源、ETD線束和附加軟體。（早期的SYNAPT G2儀器）
- 備用的游離源傳輸pcb組件和附加軟體（早期的SYNAPT G2-S儀器）
- 操作手冊和測試用化學品。
安裝、效能確認和操作訓練需由Waters現場服務工程師進行。
