化合物保留和化合物载样量是帮助决定什么样的色谱柱最适合您的分离的两个重要因素。这里列出的特征和属性帮助我们根据您认为重要的方法影响因素,推荐最合适的色谱柱或色谱柱家族。根据分析物在色谱柱上的保留能力选择色谱柱;色谱柱选择最好可以适合于大多数分析的化合物分离。但是,某些方法要求对具有高载样量的色谱柱。
选择合适的色谱吸附剂可以用来保留一类化合物或化合物的混合物。大多数情况下,选择一支合适的色谱柱可以增加化合物保留的同时也会提高相近洗脱物质间的分离度。在此色谱柱选择工具选项中,我们可以通过了解化合物的性质以及保留原理来选择合适的色谱柱。
经常采用高达100%的含水流动相来保留高极性的化合物,诸如代谢产物或小分子的有机酸。当流动相中使用有机溶剂时,这些化合物经常死时间洗脱或者非常接近于进样标志物,这使准确定量困难或者不可能。这里列出的色谱柱适用于在这些条件下保留最大化。
HILIC (亲水相互作用色谱)是反相色谱诸如 Atlantis T3不能提供足够的化合物保留时(即使用100%含水的流动相也是如此)的一项常用技术。
色谱柱的推荐是基于采用标准反相流动相时,它为极性和非极性化合物提供最宽的保留能力
我的推荐是使用允许宽pH范围流动相使用的通用型的色谱柱。这种色谱柱可给予用户通过调节改性剂来影响化合物保留的能力。例如,碱性分析物的一般原则为:
-低pH流动相缩短碱性化合物的保留时间
-高pH流动相延长碱性化合物的保留时间。
保留非极性酸性化合物最适合使用的非C18特殊固定相;然而,重现性和色谱柱寿命是用户的两个最大的考察因素。一般而言,这些色谱柱采用低pH的流动相条件。
化合物载样能力是一种色谱吸附剂耐受分离度或峰形受损前的极端载样量的指示参数。高负载能力在杂质特征分析和天然产物分离领域很重要,因此受到制备和分离科学家的亲赖。
对于酸性分析物来说,可采用低pH流动相和为提高这些条件下的化学稳定性而设计的色谱柱,以便获得在高载样量条件下的最佳色谱性能。
对于碱性分析物,有两种方式来维持高载样量条件下的分离和峰形。为了获得碱性化合物的最高载样量,多数用户偏好于使用高pH流动相。高pH流动相可保证被分析物处于中性电荷状态,这样使反相保留最大化并减少与吸附剂基质的次级离子交换作用。当化合物在高pH下化学不稳时,通常采用离子对试剂和低流动相pH条件。
在某些情况下,您将需要色谱柱要根据其化学性质来改善色谱柱中的被分析物-固定相相互作用。这里列出的色谱柱属性是帮助色谱分离的最常优选的特性。
选择性是指色谱柱在不受其它成分干扰的情况下分离混合物中的化合物的程度。一般来说,大多数方法采用经典的C18固定相来开发。最新的固定相,如含有嵌合极性基团的固定相,在提供相似的保留能力的同时,还提供互补的选择性。
采用USP名称L1对表现出C18-类似选择性的色谱柱进行分类,并经常被称为“ODS”键合相。这些通用型的色谱柱被广泛用于解决反相分离中最常见的问题。
采用USP L1名称对这些色谱柱进行分类;但是,它们含有特制的配体键合或封端。这给予特殊的化合物种类优先选择性。这些色谱柱包括嵌合的极性(防护层)色谱柱和适于极性保留的色谱柱。
与常规反相C18色谱柱相比,这些色谱柱含有选择性明显不同的配体。这些色谱柱最适于方法开发,适用于分离关键峰对,或显著增强色谱干扰峰的分离。
未封端的固定相可提供不同于封端色谱柱的分离选择性,尽管有时色谱峰形和pH稳定性稍差。未封端的固定相暴露未键合的硅醇基团,该基团可能与分析物产生相互作用。这些色谱柱是有价值的方法开发工具。
色谱吸附剂的稳定性是指其在多种操作条件下抵抗来自流动相的化学攻击的能力。化学攻击包括键合相水解和颗粒溶解造成的键合相脱落,导致色谱柱寿命缩短,色谱峰变差以及分析物选择性的变化。
色谱柱可通过优化配体密度和键合来延长采用pH小于3的流动相条件下的色谱柱寿命。在这些酸性条件下,三键键合的配体和化学稳定基质颗粒的性能优于单键或二键键合的固定相。
当采用超过pH7的流动相时,色谱柱寿命性能经常很短。在pH超过8时,大多数硅胶柱开始快速溶解。高配体密度的杂化颗粒的色谱柱寿命最长,并且具有长期使用pH超过10的常规流动相的能力。
某些色谱柱的设计特点为适用于常规分析,如通用型的LC/MS色谱柱或专门用于生物分析。
Column efficiency or plate count measures peak dispersion. A highly efficient column will generate chromatograms with tall, sharp peaks and enhance resolution, speed and sensitivity. The following high performance columns utitilize solid-core technology, which provides an efficiency advantage when compared to similar columns of a fully porous nature.
最现代的与MS仪器兼容的LC色谱柱;正如我们所知,柱流失可损害MS性能。出于这种原因,下面色谱柱的选择是基于其在很宽泛的操作条件下机械和化学稳定性。
性能最佳和最理想的色谱柱,在宽泛的PH条件下,包括使用低离子强度的流动相(例如0.1%的甲酸)条件,保持碱性化合物的良好峰形。当分析物负载量增加时,这支色谱柱还将维持对称的峰形。
这些色谱柱适合用于采用反相条件生物分子分离和QC检验,特别是分离蛋白质和多肽。这些色谱柱具有较宽的孔体积,使其更适合于这些较大分子的分离。
HILIC(亲水作用色谱)是第二种常用分析模式,分析反相不能保留的化合物,如 Atlantis T3不能提供足够的化合物保留(即使使用100%水流动相)时。极性固定相,如裸露的硅胶使用极性溶剂作流动相如乙腈,来获得极性分析物的分离。当固定相的极性增加(杂化颗粒与硅胶颗粒相比)和流动相的极性降低(甲醇与乙腈相比)时,发现保留变强。
“色谱柱选择工具”可以根据您需要考虑的应用需求或者您正在寻找的色谱柱特性而向您推荐最适合的色谱柱。点击相应的选项卡并在左手侧的表格上移动您的鼠标,即在屏幕中央显示相应的应用或色谱柱特性
.
与其它商业可用的反相色谱柱相比,XSelect CSH HPLC 色谱柱为您提供了宽泛的选择性(不同的分离能力)。 XSelect CSH色谱柱无论颗粒大小还是色谱柱类型均可以进行不同的色谱平台间方法的无缝转换(UPLC-HPLC-Prep),而无需折中碱性化合物的峰形和载量。
XSelect CSH C18色谱柱可被用作与其它C18吸附剂选择性相似的通用型的色谱柱。表面带电杂化颗粒(CSH)技术帮助你解决碱性化合物峰形不称性和载样差、柱流失和流动相再平衡慢等与色谱柱相关的问题
设计用于保持选择性最大差异。XSelect CSH 氟苯基色谱柱为您提供最大的方法开发自由度,特别是当您使用低pH流动相时。 未封端的吸附剂增加酸性化合物的保留。
XSelect CSH 苯基-己基色谱柱为您提供与传统的反相色谱柱不同的分离选择性,是方法开发的有用工具。三键键合的C6苯基-配体是一种稳定的,低流失的吸附剂,可通过pi-pi相互作用选择性地保留多环芳烃化合物。
The HSS C18填料是最稳定的通用型的高强度硅胶色谱柱,并且不受峰形问题的影响,保持了低pH下保持稳定性。峰形问题困扰常发生于依赖位阻保护作用(和封端技术不足)的较老固定相。HSS C18 HPLC色谱柱可升级并无缝转移到UPLC分离。
HSS C18 SB色谱柱用于含有碱性和非碱性化合物的复杂混合物的低pH条件下分离。HSS C18 SB色谱柱为您提供与最现代、高覆盖率,完全封端的C18固定相的不同的分离选择性。 HSS C18SB HPLC色谱柱可升级并无缝转移到UPLC分离。
用于HSS T3吸附剂的三键键合C18键合相与100%含水流动相兼容,并提供超低的MS柱流失,同时促进较高的极性化合物保留。HSS T3色谱柱完全可升级并无缝转移到UPLC分离。
The XSelect HSS CN键合相是一种超高效通用型的丙基氰基键合相,可在低pH值下为碱性化合物提供较好的峰形、延长的保留时间和极长的色谱柱寿命。The XSelect HSS CN色谱柱完全可升级并无缝转移到 ACQUITY UPLC分离。
The XSelect HSS PFP 是一种未封端的高强度硅胶HPLC色谱柱,用于需要与全封端的高覆盖C18固定相互补分离选择性的低pH 条件下分离,The The XSelect HSS PFP 色谱柱完全可升级并无缝转移到 ACQUITY UPLC分离。
沃特世是现代HPLC色谱柱的领导者。采用行业中领先技术,我们的HPLC相关产品缩减了您分析过程中每份样品的时间和成本-同时提高了实验室数据的质量。作为世界上主要色谱柱生产商之一,我们控制色谱柱的批间重现性,以及生产某些最具创新性的化学产品的能力首屈一指。
XBridge HPLC 色谱柱被设计具备HPLC方法开发中的最大灵活性。您可以在使用全范围的流动相pH的同时,在最短时间内获得最稳定的分离方法,并具有较高的可信度。行业领先的生产和产品质量为您最需要的色谱分离提供最值得信赖的色谱柱。
作为HPLC方法开发应用最广泛的填料,XBridge BEH C18 吸附剂可被用于全范围流动相pH(1-12)。三键键合的C18配体为您的HPLC分离提供了通用型的色谱柱,并给予您最宽的可用pH范围、优越的低pH稳定性,以及超低的柱流失。
对肽分离专用的XBridge BEH300 C18 肽分离技术(PST)色谱柱进行了优化并进行肽分离的QC 检验。宽孔径(300Å)三键键合的BEH颗粒为您提供了最宽的可用pH范围、优越的低pH稳定性,以及超低的柱流失,从而对蛋白质组学、蛋白质鉴定和肽合成样品进行分析。
对肽分离专用的XBridge BEH130 C18 肽分离技术(PST)色谱柱进行了优化并进行肽分离 QC 检验。小孔径(130Å)三键键合的BEH颗粒为您提供了最宽的可用pH范围、优越的低pH稳定性,以及超低的柱流失,从而对蛋白质组学、蛋白质鉴定和肽合成样品进行分析。
对沃特世蛋白质分离技术 (PrST)色谱柱进行了优化并进行蛋白分离QC检验,从而根据尺寸、疏水性和等电点来分离蛋白质。如果您将传统的固定相与C18固定相进行比较,C4配体的保留时间较短,得到最低的蛋白质交叉污染、增加蛋白质回收率并改善峰容量。
沃特世寡核苷酸分离技术 (OST) 色谱柱被用于基于离子对和反相液相色谱技术的寡核苷酸的分离。 采用沃特世MassPrep OST 标准品对每个色谱柱进行了QC检验,从而保证您最需要的寡核苷酸分析的可重复性能。
XBridge BEH Shield RP18色谱柱是XBridge BEH C18和C8固定相的补充,是HPLC方法开发必要的和强有力的工具。与直链烷基柱相比,键合相配体中嵌入的氨基甲酸酯基团提供了互补的选择性,特别是对于酚性化合物来说,更是如此。
XBridge BEH苯基色谱柱为 C18固定相提供了互补的选择性,特别是对多环芳烃化合物来说,更是如此。 这种化学最稳定的苯基吸附剂色谱柱已经上市,为您提供了超低柱流失,长的柱寿命和优秀的峰形。
XBridge BEH HILIC 色谱柱含有未键合的BEH基体,被设计用于保留和分离强极性的化合物。我们对这些独特的色谱柱进行了优化,以得到 HPLC HILIC条件下的高效,可重现的分离。由于比硅胶 HILIC固定相更耐用,BEH 颗粒的化学稳定性使色谱柱寿命延长。
XBridge BEH Amide柱保留强极性的化合物,包括糖和碳水化合物。 XBridge Amide色谱柱为您提供在pH2到12间的化学稳定的,可以分离极性更为宽泛的化合物。
TBA
Achieve faster separations and improve sample throughput without sacrificing HPLC/UHPLC separation performance. CORTECS HPLC Columns offer the unique advantage of operating at lower back pressure and higher flow rates without sacrificing efficiency or resolution. Compared to a fully porous particle, the CORTECS particle provides unique characteristics and innovative charged surface modifications that are suitable for wide variety of applications.
The C18 ligand is the most popular choice in method development because of its stability and ability to retain a variety of analytes. CORTECS C18 is a traditional C18 solid-core bonded phase which exhibits high efficiency with a balanced retention of acids, bases and neutrals at low- and mid-range pH. It provides superb resolution and retention for complex mixtures.
CORTECS C18+ is a general purpose, high efficiency, solid-core, reversed-phase column which features a positively charged surface modification. Charged-surface technology utilizes a controlled, low-level surface charge for enhanced selectivity and exceptional peak shape for basic compounds when using acidic, low-ionic strength mobile phases such as formic acid.
CORTECS HILIC Columns are designed specifically for the retention of very polar compounds using HILIC methods of separation. CORTECS HILIC Columns features an unbonded CORTECS solid-core silica particle that offers high efficiency under low pH conditions.
.
HPLC色谱柱的Atlantis家族提供了极性化合物保留的领先性能,同时保持定量生物分析试验的多样性、重现性和准确度。选择Atlantis反相和HILIC 色谱柱来改善中极性到高极性分析物和代谢产物的色谱保留。
Atlantis T3色谱柱 是通用的硅胶反相C18色谱柱,提供极性和疏水分子的平衡保留。当您进行极性和非极性化合物的分离时,它应该是您的首选。
Atlantis HILIC硅胶柱与高比例的有机流动相(>80%乙腈)结合使用,从而提供由于极性太大不能被反相色谱所保留的被分析物的保留。HILIC分离机制提供了与传统的反相方法的互补的分离模式。
Sunfire 色谱柱建立了硅胶色谱柱的行业标杆,因为其高的分离能力和可靠性常被选用满足分析和制备分析方法的需求。对通用型的使用,SunFire色谱柱表现出高效、优异的峰形和无敌的批间重现性。
SunFire C18色谱柱被用于中低pH条件下的通用型方法的开发。 C18配体保留性能高,特别是对于碱性化合物来说,更是如此。它特别适合于纯化和杂质特征分析。
.
与其它商业可用的反相色谱柱相比,XSelect CSH HPLC 色谱柱为您提供了宽泛的选择性(不同的分离能力)。 XSelect CSH色谱柱无论颗粒大小还是色谱柱类型均可以进行不同的色谱平台间方法的无缝转换(UPLC-HPLC-Prep),而无需折中碱性化合物的峰形和载量。
XSelect CSH C18色谱柱可被用作与其它C18吸附剂选择性相似的通用型的色谱柱。表面带电杂化颗粒(CSH)技术帮助你解决碱性化合物峰形不称性和载样差、柱流失和流动相再平衡慢等与色谱柱相关的问题
设计用于保持选择性最大差异。XSelect CSH 氟苯基色谱柱为您提供最大的方法开发自由度,特别是当您使用低pH流动相时。 未封端的吸附剂增加酸性化合物的保留。
XSelect CSH 苯基-己基色谱柱为您提供与传统的反相色谱柱不同的分离选择性,是方法开发的有用工具。三键键合的C6苯基-配体是一种稳定的,低流失的吸附剂,可通过pi-pi相互作用选择性地保留多环芳烃化合物。
The HSS C18填料是最稳定的通用型的高强度硅胶色谱柱,并且不受峰形问题的影响,保持了低pH下保持稳定性。峰形问题困扰常发生于依赖位阻保护作用(和封端技术不足)的较老固定相。HSS C18 HPLC色谱柱可升级并无缝转移到UPLC分离。
HSS C18 SB色谱柱用于含有碱性和非碱性化合物的复杂混合物的低pH条件下分离。HSS C18 SB色谱柱为您提供与最现代、高覆盖率,完全封端的C18固定相的不同的分离选择性。 HSS C18SB HPLC色谱柱可升级并无缝转移到UPLC分离。
用于HSS T3吸附剂的三键键合C18键合相与100%含水流动相兼容,并提供超低的MS柱流失,同时促进较高的极性化合物保留。HSS T3色谱柱完全可升级并无缝转移到UPLC分离。
The XSelect HSS CN键合相是一种超高效通用型的丙基氰基键合相,可在低pH值下为碱性化合物提供较好的峰形、延长的保留时间和极长的色谱柱寿命。The XSelect HSS CN色谱柱完全可升级并无缝转移到 ACQUITY UPLC分离。
The XSelect HSS PFP 是一种未封端的高强度硅胶HPLC色谱柱,用于需要与全封端的高覆盖C18固定相互补分离选择性的低pH 条件下分离,The The XSelect HSS PFP 色谱柱完全可升级并无缝转移到 ACQUITY UPLC分离。
沃特世是现代HPLC色谱柱的领导者。采用行业中领先技术,我们的HPLC相关产品缩减了您分析过程中每份样品的时间和成本-同时提高了实验室数据的质量。作为世界上主要色谱柱生产商之一,我们控制色谱柱的批间重现性,以及生产某些最具创新性的化学产品的能力首屈一指。
XBridge HPLC 色谱柱被设计具备HPLC方法开发中的最大灵活性。您可以在使用全范围的流动相pH的同时,在最短时间内获得最稳定的分离方法,并具有较高的可信度。行业领先的生产和产品质量为您最需要的色谱分离提供最值得信赖的色谱柱。
作为HPLC方法开发应用最广泛的填料,XBridge BEH C18 吸附剂可被用于全范围流动相pH(1-12)。三键键合的C18配体为您的HPLC分离提供了通用型的色谱柱,并给予您最宽的可用pH范围、优越的低pH稳定性,以及超低的柱流失。
对肽分离专用的XBridge BEH300 C18 肽分离技术(PST)色谱柱进行了优化并进行肽分离的QC 检验。宽孔径(300Å)三键键合的BEH颗粒为您提供了最宽的可用pH范围、优越的低pH稳定性,以及超低的柱流失,从而对蛋白质组学、蛋白质鉴定和肽合成样品进行分析。
对肽分离专用的XBridge BEH130 C18 肽分离技术(PST)色谱柱进行了优化并进行肽分离 QC 检验。小孔径(130Å)三键键合的BEH颗粒为您提供了最宽的可用pH范围、优越的低pH稳定性,以及超低的柱流失,从而对蛋白质组学、蛋白质鉴定和肽合成样品进行分析。
对沃特世蛋白质分离技术 (PrST)色谱柱进行了优化并进行蛋白分离QC检验,从而根据尺寸、疏水性和等电点来分离蛋白质。如果您将传统的固定相与C18固定相进行比较,C4配体的保留时间较短,得到最低的蛋白质交叉污染、增加蛋白质回收率并改善峰容量。
沃特世寡核苷酸分离技术 (OST) 色谱柱被用于基于离子对和反相液相色谱技术的寡核苷酸的分离。 采用沃特世MassPrep OST 标准品对每个色谱柱进行了QC检验,从而保证您最需要的寡核苷酸分析的可重复性能。
XBridge BEH Shield RP18色谱柱是XBridge BEH C18和C8固定相的补充,是HPLC方法开发必要的和强有力的工具。与直链烷基柱相比,键合相配体中嵌入的氨基甲酸酯基团提供了互补的选择性,特别是对于酚性化合物来说,更是如此。
XBridge BEH苯基色谱柱为 C18固定相提供了互补的选择性,特别是对多环芳烃化合物来说,更是如此。 这种化学最稳定的苯基吸附剂色谱柱已经上市,为您提供了超低柱流失,长的柱寿命和优秀的峰形。
XBridge BEH HILIC 色谱柱含有未键合的BEH基体,被设计用于保留和分离强极性的化合物。我们对这些独特的色谱柱进行了优化,以得到 HPLC HILIC条件下的高效,可重现的分离。由于比硅胶 HILIC固定相更耐用,BEH 颗粒的化学稳定性使色谱柱寿命延长。
XBridge BEH Amide柱保留强极性的化合物,包括糖和碳水化合物。 XBridge Amide色谱柱为您提供在pH2到12间的化学稳定的,可以分离极性更为宽泛的化合物。
TBA
Achieve faster separations and improve sample throughput without sacrificing HPLC/UHPLC separation performance. CORTECS HPLC Columns offer the unique advantage of operating at lower back pressure and higher flow rates without sacrificing efficiency or resolution. Compared to a fully porous particle, the CORTECS particle provides unique characteristics and innovative charged surface modifications that are suitable for wide variety of applications.
The C18 ligand is the most popular choice in method development because of its stability and ability to retain a variety of analytes. CORTECS C18 is a traditional C18 solid-core bonded phase which exhibits high efficiency with a balanced retention of acids, bases and neutrals at low- and mid-range pH. It provides superb resolution and retention for complex mixtures.
CORTECS C18+ is a general purpose, high efficiency, solid-core, reversed-phase column which features a positively charged surface modification. Charged-surface technology utilizes a controlled, low-level surface charge for enhanced selectivity and exceptional peak shape for basic compounds when using acidic, low-ionic strength mobile phases such as formic acid.
CORTECS HILIC Columns are designed specifically for the retention of very polar compounds using HILIC methods of separation. CORTECS HILIC Columns features an unbonded CORTECS solid-core silica particle that offers high efficiency under low pH conditions.
.
HPLC色谱柱的Atlantis家族提供了极性化合物保留的领先性能,同时保持定量生物分析试验的多样性、重现性和准确度。选择Atlantis反相和HILIC 色谱柱来改善中极性到高极性分析物和代谢产物的色谱保留。
Atlantis T3色谱柱 是通用的硅胶反相C18色谱柱,提供极性和疏水分子的平衡保留。当您进行极性和非极性化合物的分离时,它应该是您的首选。
Atlantis HILIC硅胶柱与高比例的有机流动相(>80%乙腈)结合使用,从而提供由于极性太大不能被反相色谱所保留的被分析物的保留。HILIC分离机制提供了与传统的反相方法的互补的分离模式。
Sunfire 色谱柱建立了硅胶色谱柱的行业标杆,因为其高的分离能力和可靠性常被选用满足分析和制备分析方法的需求。对通用型的使用,SunFire色谱柱表现出高效、优异的峰形和无敌的批间重现性。
SunFire C18色谱柱被用于中低pH条件下的通用型方法的开发。 C18配体保留性能高,特别是对于碱性化合物来说,更是如此。它特别适合于纯化和杂质特征分析。
“色谱柱选择工具”可以根据您需要考虑的应用需求或者您正在寻找的色谱柱特性而向您推荐最适合的色谱柱。点击相应的选项卡并在左手侧的表格上移动您的鼠标,即在屏幕中央显示相应的应用或色谱柱特性
化合物保留和化合物载样量是帮助决定什么样的色谱柱最适合您的分离的两个重要因素。这里列出的特征和属性帮助我们根据您认为重要的方法影响因素,推荐最合适的色谱柱或色谱柱家族。根据分析物在色谱柱上的保留能力选择色谱柱;色谱柱选择最好可以适合于大多数分析的化合物分离。但是,某些方法要求对具有高载样量的色谱柱。
选择合适的色谱吸附剂可以用来保留一类化合物或化合物的混合物。大多数情况下,选择一支合适的色谱柱可以增加化合物保留的同时也会提高相近洗脱物质间的分离度。在此色谱柱选择工具选项中,我们可以通过了解化合物的性质以及保留原理来选择合适的色谱柱。
经常采用高达100%的含水流动相来保留高极性的化合物,诸如代谢产物或小分子的有机酸。当流动相中使用有机溶剂时,这些化合物经常死时间洗脱或者非常接近于进样标志物,这使准确定量困难或者不可能。这里列出的色谱柱适用于在这些条件下保留最大化。
HILIC (亲水相互作用色谱)是反相色谱诸如 Atlantis T3不能提供足够的化合物保留时(即使用100%含水的流动相也是如此)的一项常用技术。
色谱柱的推荐是基于采用标准反相流动相时,它为极性和非极性化合物提供最宽的保留能力
我的推荐是使用允许宽pH范围流动相使用的通用型的色谱柱。这种色谱柱可给予用户通过调节改性剂来影响化合物保留的能力。例如,碱性分析物的一般原则为:
-低pH流动相缩短碱性化合物的保留时间
-高pH流动相延长碱性化合物的保留时间。
保留非极性酸性化合物最适合使用的非C18特殊固定相;然而,重现性和色谱柱寿命是用户的两个最大的考察因素。一般而言,这些色谱柱采用低pH的流动相条件。
化合物载样能力是一种色谱吸附剂耐受分离度或峰形受损前的极端载样量的指示参数。高负载能力在杂质特征分析和天然产物分离领域很重要,因此受到制备和分离科学家的亲赖。
对于酸性分析物来说,可采用低pH流动相和为提高这些条件下的化学稳定性而设计的色谱柱,以便获得在高载样量条件下的最佳色谱性能。
对于碱性分析物,有两种方式来维持高载样量条件下的分离和峰形。为了获得碱性化合物的最高载样量,多数用户偏好于使用高pH流动相。高pH流动相可保证被分析物处于中性电荷状态,这样使反相保留最大化并减少与吸附剂基质的次级离子交换作用。当化合物在高pH下化学不稳时,通常采用离子对试剂和低流动相pH条件。
在某些情况下,您将需要色谱柱要根据其化学性质来改善色谱柱中的被分析物-固定相相互作用。这里列出的色谱柱属性是帮助色谱分离的最常优选的特性。
选择性是指色谱柱在不受其它成分干扰的情况下分离混合物中的化合物的程度。一般来说,大多数方法采用经典的C18固定相来开发。最新的固定相,如含有嵌合极性基团的固定相,在提供相似的保留能力的同时,还提供互补的选择性。
采用USP名称L1对表现出C18-类似选择性的色谱柱进行分类,并经常被称为“ODS”键合相。这些通用型的色谱柱被广泛用于解决反相分离中最常见的问题。
采用USP L1名称对这些色谱柱进行分类;但是,它们含有特制的配体键合或封端。这给予特殊的化合物种类优先选择性。这些色谱柱包括嵌合的极性(防护层)色谱柱和适于极性保留的色谱柱。
与常规反相C18色谱柱相比,这些色谱柱含有选择性明显不同的配体。这些色谱柱最适于方法开发,适用于分离关键峰对,或显著增强色谱干扰峰的分离。
未封端的固定相可提供不同于封端色谱柱的分离选择性,尽管有时色谱峰形和pH稳定性稍差。未封端的固定相暴露未键合的硅醇基团,该基团可能与分析物产生相互作用。这些色谱柱是有价值的方法开发工具。
色谱吸附剂的稳定性是指其在多种操作条件下抵抗来自流动相的化学攻击的能力。化学攻击包括键合相水解和颗粒溶解造成的键合相脱落,导致色谱柱寿命缩短,色谱峰变差以及分析物选择性的变化。
色谱柱可通过优化配体密度和键合来延长采用pH小于3的流动相条件下的色谱柱寿命。在这些酸性条件下,三键键合的配体和化学稳定基质颗粒的性能优于单键或二键键合的固定相。
当采用超过pH7的流动相时,色谱柱寿命性能经常很短。在pH超过8时,大多数硅胶柱开始快速溶解。高配体密度的杂化颗粒的色谱柱寿命最长,并且具有长期使用pH超过10的常规流动相的能力。
某些色谱柱的设计特点为适用于常规分析,如通用型的LC/MS色谱柱或专门用于生物分析。
Column efficiency or plate count measures peak dispersion. A highly efficient column will generate chromatograms with tall, sharp peaks and enhance resolution, speed and sensitivity. The following high performance columns utitilize solid-core technology, which provides an efficiency advantage when compared to similar columns of a fully porous nature.
最现代的与MS仪器兼容的LC色谱柱;正如我们所知,柱流失可损害MS性能。出于这种原因,下面色谱柱的选择是基于其在很宽泛的操作条件下机械和化学稳定性。
性能最佳和最理想的色谱柱,在宽泛的PH条件下,包括使用低离子强度的流动相(例如0.1%的甲酸)条件,保持碱性化合物的良好峰形。当分析物负载量增加时,这支色谱柱还将维持对称的峰形。
这些色谱柱适合用于采用反相条件生物分子分离和QC检验,特别是分离蛋白质和多肽。这些色谱柱具有较宽的孔体积,使其更适合于这些较大分子的分离。
HILIC(亲水作用色谱)是第二种常用分析模式,分析反相不能保留的化合物,如 Atlantis T3不能提供足够的化合物保留(即使使用100%水流动相)时。极性固定相,如裸露的硅胶使用极性溶剂作流动相如乙腈,来获得极性分析物的分离。当固定相的极性增加(杂化颗粒与硅胶颗粒相比)和流动相的极性降低(甲醇与乙腈相比)时,发现保留变强。