Bioconjugados

Bioconjugados

Caracterice de forma exhaustiva las estructuras complejas y heterogéneas de los bioconjugados (incluidos los conjugados anticuerpo-fármaco) con las soluciones de preparación de muestras, columnas, UPLC, QTof MS, DLS, MALS e informáticas de Waters adecuadas para los objetivos. Waters se compromete a respaldar el desarrollo de terapias seguras y eficaces para el cáncer y otras enfermedades al ayudarle a generar perfiles de ADC exactos para caracterizar y monitorizar atributos de calidad críticos.

Caracterice de forma exhaustiva las estructuras complejas y heterogéneas de los bioconjugados (incluidos los conjugados anticuerpo-fármaco) con las soluciones de preparación de muestras, columnas, UPLC, QTof MS, DLS, MALS e informáticas de Waters adecuadas para los objetivos. Waters se compromete a respaldar el desarrollo de terapias seguras y eficaces para el cáncer y otras enfermedades al ayudarle a generar perfiles de ADC exactos para caracterizar y monitorizar atributos de calidad críticos.

Develop robust and comparable processes by monitoring profiles of glycopeptides and released N-glycans
Develop robust and comparable processes by monitoring profiles of glycopeptides and released N-glycans

Descripción general

Los ADC son una clase de fármacos biofarmacéuticos que liberan agentes anticancerígenos directamente en las células cancerosas, un enfoque mucho más específico que la quimioterapia convencional. La optimización de los ADC requiere tecnologías analíticas para caracterizar exhaustivamente la molécula, incluidos sus atributos bioquímicos, como el ratio anticuerpo-fármaco (DAR) y los sitios de conjugación.

A medida que las organizaciones biofarmacéuticas continúan explorando el uso de ADC como una clase de terapias contra el cáncer, encuentran desafíos importantes al analizar sus estructuras complejas y heterogéneas. Sin embargo, un ADC bien caracterizado es fundamental para avanzar desde el descubrimiento hasta la comercialización, pasando por el desarrollo clínico.

Aborde con éxito los retos de caracterización con un conocimiento excepcional de las moléculas gracias a las soluciones de cromatografía líquida de ultrarrendimiento (UPLC), espectrometría de masas (MS) de alta resolución, químicas de columna e informáticas de Waters adecuadas para los objetivos. Confíe en Waters para simplificar el análisis de moléculas complejas y acelerar la caracterización de ADC y la monitorización de los atributos de calidad críticos.


Aplicaciones

El sistema MALS en tiempo real ultraDAWN™ monitoriza directamente los atributos del producto después de la purificación, lo que mejora el rendimiento y la flexibilidad. Conecta métodos de enriquecimiento y purificación posteriores, como IEX, FPLC o TFF, para medir el peso molecular, la concentración, el tamaño y las impurezas\impurezas en tiempo real, lo que agiliza el procesamiento y maximiza el rendimiento.

El sistema MALS en tiempo real ultraDAWN™ monitoriza directamente los atributos del producto después de la purificación, lo que mejora el rendimiento y la flexibilidad. Conecta métodos de enriquecimiento y purificación posteriores, como IEX, FPLC o TFF, para medir el peso molecular, la concentración, el tamaño y las impurezas\impurezas en tiempo real, lo que agiliza el procesamiento y maximiza el rendimiento.


Notas de aplicación

Notas de aplicación

La eficacia de los bioconjugados como los ADC depende en gran medida de la afinidad de unión y la estabilidad de la parte de la molécula del anticuerpo monoclonal (mAb). Las técnicas de dispersión de la luz y la calorimetría pueden delimitar los candidatos a anticuerpos, ya que están optimizadas para la cinética de unión y la estabilidad.

La eficacia de los bioconjugados como los ADC depende en gran medida de la afinidad de unión y la estabilidad de la parte de la molécula del anticuerpo monoclonal (mAb). Las técnicas de dispersión de la luz y la calorimetría pueden delimitar los candidatos a anticuerpos, ya que están optimizadas para la cinética de unión y la estabilidad.


Notas de aplicación

Notas de aplicación

Ya sea acoplado a espectrometría de masas, MALS o como una medición autónoma, separar las características estructurales de los ADC es fundamental para mejorar la comprensión durante el desarrollo y el lanzamiento del producto. Las soluciones químicas de Waters siguen proporcionando enfoques innovadores para ofrecer lo último en robustez y rendimiento cromatográfico.

Ya sea acoplado a espectrometría de masas, MALS o como una medición autónoma, separar las características estructurales de los ADC es fundamental para mejorar la comprensión durante el desarrollo y el lanzamiento del producto. Las soluciones químicas de Waters siguen proporcionando enfoques innovadores para ofrecer lo último en robustez y rendimiento cromatográfico.


Notas de aplicación

Notas de aplicación

Las técnicas de espectrometría de masas y dispersión de luz proporcionan información sobre varios atributos de calidad de los ADC, desde las primeras hasta las últimas etapas del proceso de desarrollo. Estos atributos incluyen la determinación del ratio óptimo de carga conjugada (por ejemplo, la cuantificación del ratio anticuerpo-fármaco), la asignación de puentes sulfuro, la caracterización de modificaciones postraduccionales y la identificación de isómeros posicionales conjugados. Waters ha desarrollado flujos de trabajo y aplicaciones para dar soporte a estos análisis críticos.

Las técnicas de espectrometría de masas y dispersión de luz proporcionan información sobre varios atributos de calidad de los ADC, desde las primeras hasta las últimas etapas del proceso de desarrollo. Estos atributos incluyen la determinación del ratio óptimo de carga conjugada (por ejemplo, la cuantificación del ratio anticuerpo-fármaco), la asignación de puentes sulfuro, la caracterización de modificaciones postraduccionales y la identificación de isómeros posicionales conjugados. Waters ha desarrollado flujos de trabajo y aplicaciones para dar soporte a estos análisis críticos.


Notas de aplicación

Notas de aplicación

Las proteínas terapéuticas conjugadas a menudo se enfrentan a problemas de estabilidad y agregación debido a modificaciones químicas y a la incorporación de fármacos hidrofóbicos. La DLS de alto rendimiento permite realizar estudios de estabilidad y screening rápidos, mientras que SEC-MALS ofrece una caracterización detallada en el desarrollo de formulación.

Las proteínas terapéuticas conjugadas a menudo se enfrentan a problemas de estabilidad y agregación debido a modificaciones químicas y a la incorporación de fármacos hidrofóbicos. La DLS de alto rendimiento permite realizar estudios de estabilidad y screening rápidos, mientras que SEC-MALS ofrece una caracterización detallada en el desarrollo de formulación.


Notas de aplicación

Notas de aplicación


Caso práctico: Cómo contribuye Waters al desarrollo de nuevas terapias

Para pasar rápidamente del desarrollo a la fase clínica un producto terapéutico basado en ADC, Igenica Biotherapeutics necesitaba instrumentación estándar del sector para analizar la complejidad y la variación dentro del ADC. Este caso práctico describe cómo las soluciones de Waters, incluida la solución integral para aplicaciones biofarmacéuticas con UNIFI de Waters, proporcionaron una mejor ventana de conocimiento de las moléculas que Igenica estaba desarrollando.

Para pasar rápidamente del desarrollo a la fase clínica un producto terapéutico basado en ADC, Igenica Biotherapeutics necesitaba instrumentación estándar del sector para analizar la complejidad y la variación dentro del ADC. Este caso práctico describe cómo las soluciones de Waters, incluida la solución integral para aplicaciones biofarmacéuticas con UNIFI de Waters, proporcionaron una mejor ventana de conocimiento de las moléculas que Igenica estaba desarrollando.


Primer plano del vial y la jeringa de vacunación

Soluciones


Con los sistemas de Waters, podrá caracterizar bioconjugados complejos en menos tiempo y con mayor confianza.

Con los sistemas de Waters, podrá caracterizar bioconjugados complejos en menos tiempo y con mayor confianza.

Diseñado específicamente para la monitorización biofarmacéutica rutinaria

Diseñado específicamente para la monitorización biofarmacéutica rutinaria

Obtenga una mayor sencillez, exactitud y reproducibilidad para la monitorización de atributos de los bioconjugados con el sistema LC-MS BioAccord.

  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Protein-Conjugate Ratio
  • Aggregation and Stability

Cobertura completa para una caracterización segura

Cobertura completa para una caracterización segura

Maximice la información de las muestras para los analitos, desde la caracterización detallada hasta la cuantificación exacta, con Xevo G3 QTof, que permite obtener resultados con total confianza en sus datos analíticos de bioconjugados.

  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Protein-Conjugate Ratio
  • Aggregation and Stability

La plataforma universal para la cromatografía líquida.

La plataforma universal para la cromatografía líquida.

Elimine la imprevisibilidad de las pérdidas de analitos debidas a las interacciones con metales con las soluciones MaxPeak Premier, una gama de LC, LC-MS y químicas de columna diseñadas para obtener límites máximos de detección para compuestos difíciles, sin tareas que requieren mucho tiempo, como la pasivación del sistema.

  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Protein-Conjugate Ratio
  • Aggregation and Stability

El sistema de menor dispersión para la máxima capacidad de pico

El sistema de menor dispersión para la máxima capacidad de pico

Resuelva los desafíos complejos de separación de anticuerpo-fármaco (ADC) UPLC/UHPLC con los sistemas ACQUITY UPLC con tecnología 2D LC, una familia de sistemas y columnas que ofrecen la menor dispersión para obtener la máxima capacidad de picos.

  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Protein-Conjugate Ratio
  • Aggregation and Stability

Detector excepcionalmente versátil para cada fase del desarrollo

Detector excepcionalmente versátil para cada fase del desarrollo

El detector DAWN™ MALS ayuda en cada etapa del desarrollo. Acóplelo con Eclipse™ para medir la afinidad de unión durante el descubrimiento. Colóquelo después de cualquier LC y realice un análisis avanzado del ratio proteína-conjugado, las modificaciones postraduccionales y la agregación.

  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Protein-Conjugate Ratio
  • Aggregation and Stability

Medir el tamaño y el potencial zeta en un tampón nativo

Medir el tamaño y el potencial zeta en un tampón nativo

El instrumento DynaPro™ ZetaStar™ combina DLS, SLS y ELS en una plataforma. Diseñado para la biofarmacéutica, puede medir el potencial zeta en un tampón de formulación sin dilución.

  • Aggregation and Stability
  • Chromatography

Screening por tamaño y estabilidad de alto rendimiento

Screening por tamaño y estabilidad de alto rendimiento

Mida los datos de tamaño, polidispersidad y Tagg de cientos de muestras con tan solo 4 µL por pocillo. El lector de placas DLS DynaPro™ utiliza placas de pocillos estándar; intégrelo con cualquier sistema de manipulación de líquidos y aumente aún más la productividad.

  • Candidate Screening
  • Aggregation and Stability

Aumente el rendimiento y monitorice la calidad del producto con confianza

Aumente el rendimiento y monitorice la calidad del producto con confianza

ultraDAWN™ monitoriza directamente el título, el tamaño y las impurezas en tiempo real. Conecta los métodos de purificación y enriquecimiento posteriores, como IEX, FPLC o TFF.

  • Real-Time Process Monitoring

El software de Waters agiliza la adquisición, el procesamiento y la generación de informes de datos de los resultados del análisis de ADC.

El software de Waters agiliza la adquisición, el procesamiento y la generación de informes de datos de los resultados del análisis de ADC.

Acelere los análisis biofarmacéuticos

Acelere los análisis biofarmacéuticos

Acelere el proceso desde el análisis de muestras hasta la toma de decisiones utilizando waters_connect para productos biofarmacéuticos, con flujos de trabajo personalizados diseñados para aplicaciones biofarmacéuticas de LC-MS, masa intacta, mapeo de péptidos, Peptide MAM y análisis de N-glicanos liberados.

  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Protein-Conjugate Ratio
  • Aggregation and Stability

A medida que las organizaciones biofarmacéuticas exploran el uso de bioconjugados y ADC como una clase de terapia contra el cáncer, se encuentran importantes desafíos al analizar sus estructuras complejas y heterogéneas. Waters proporciona columnas y consumibles para estos desafíos analíticos únicos al facilitar la evaluación de muchos atributos críticos de calidad (CQA) importantes.

A medida que las organizaciones biofarmacéuticas exploran el uso de bioconjugados y ADC como una clase de terapia contra el cáncer, se encuentran importantes desafíos al analizar sus estructuras complejas y heterogéneas. Waters proporciona columnas y consumibles para estos desafíos analíticos únicos al facilitar la evaluación de muchos atributos críticos de calidad (CQA) importantes.

Cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) para la determinación de DAR

Cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) para la determinación de DAR

Logre análisis basados en LC de alta calidad y determine el DAR de ADC altamente hidrofóbicos y conjugados con cisteína utilizando las columnas de cromatografía de interacción hidrofóbica (HIC) Hi Res Protein-Pak de Waters para separaciones rápidas y eficientes.

  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Protein-Conjugate Ratio
  • Aggregation and Stability

Columnas de fase reversa para la determinación de DAR y la distribución de fármacos

Columnas de fase reversa para la determinación de DAR y la distribución de fármacos

Las columnas de fase reversa para bioconjugados y conjugados anticuerpo-fármaco con MaxPeak HPS, como las columnas ACQUITY y XBridge Premier Protein BEH C4, están diseñadas exclusivamente para minimizar las interacciones secundarias entre los ADC y el hardware de la columna, y son adecuadas para el análisis de ADC conjugados con lisina. A diferencia de los ADC conjugados con cisteína, los puentes disulfuro intracatenarios que mantienen los enlaces entre las cadenas pesada y ligera del mAb para los ADC conjugados con lisina están intactos. Por lo tanto, la cromatografía de fase reversa es adecuada para el análisis de ADC conjugados con lisina cuando la química del conector no es lábil a pH ácido. Además, Waters ofrece columnas de fase reversa con tecnología de partículas de núcleo sólido, como BioResolve RP mAb Polyphenyl para análisis de masa intacta y de subunidades para determinar la localización de fármacos enlazados a nivel de dominio.

  • Candidate Screening
  • Chromatography
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Logre una exactitud de agregación consistente con las columnas SEC

Logre una exactitud de agregación consistente con las columnas SEC

Elimine la necesidad de crear varias fases móviles de eluyente SEC con diferentes proteínas mediante el uso de un método de plataforma con solución salina tamponada con fosfato (es decir,, PBS) para obtener agregados, monómeros y fragmentos siempre exactos con columnas SEC de Waters. Además, para los bioconjugados que pueden ser hidrofóbicos y crear interacciones secundarias indeseadas, no es necesario añadir eluyente orgánico con las columnas MaxPeak Premier Protein SEC y sus partículas BEH con unión de PEO.

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Caracterice y monitorice las variantes de carga con la cromatografía de intercambio catiónico

Caracterice y monitorice las variantes de carga con la cromatografía de intercambio catiónico

Mida con exactitud los perfiles de variantes de carga de los ADC unidos a cisteína y a lisina con la columna BioResolve SCX mAb y los tampones concentrados de pH BioResolve CX para gradientes salinos o de pH con interacciones secundarias mínimas en la detección óptica. Para obtener información estructural con espectrometría de masas en intercambio iónico, nuestros tampones compatibles con MS, tampones concentrados de pH IonHance CX-MS, hacen realidad la IEX-MS en línea con tampones volátiles de alta pureza adecuados para espectrometría de masas.

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Mida la conjugación de oligonucleótidos con columnas de intercambio aniónico

Mida la conjugación de oligonucleótidos con columnas de intercambio aniónico

Los anticuerpos y oligonucleótidos conjugados (AOC) se utilizan habitualmente en el diagnóstico de proteínas y son un tratamiento prometedor para la terapia celular dirigida. La carga negativa neta de un AOC se expande con cada sitio de conjugación adicional, lo que da como resultado una mayor retención en una resina de intercambio aniónico. La columna GenPak FAX contiene un sorbente de intercambio aniónico débil que muestra una retención controlada y una selectividad única para las muestras de proteínas y oligonucleótidos. El trabajo de aplicación reciente demuestra que AEX se puede acoplar con MALS para generar información de peso molecular absoluto.

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Localice con precisión los glicanos dentro de una estructura de proteína con columnas de glicoproteínas

Localice con precisión los glicanos dentro de una estructura de proteína con columnas de glicoproteínas

La cromatografía de interacción hidrofílica (HILIC) se ha utilizado ampliamente para separar compuestos polares pequeños, pero su aplicación para biomoléculas grandes, distintas de los glicanos liberados, ha sido sorprendentemente limitada. Con las columnas de glicoproteínas de poro ancho de Waters, ahora es posible utilizar HILIC para obtener información previamente inalcanzable sobre proteínas intactas (con o sin glicosilación), fragmentos de proteínas y glicanos liberados complejos.

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Flujo de trabajo de digestión de proteínas rápido, automatizable y robusto

Flujo de trabajo de digestión de proteínas rápido, automatizable y robusto

Los kits de digestiones tripsínicas de proteínas PeptideWorks de Waters para flujos de trabajo manuales o automatizados proporcionan al laboratorio mapas de péptidos reproducibles de alta eficacia en menos de 2,5 horas (4 veces más rápido que el promedio de los métodos caseros). Logre digestiones de 30 minutos con un ratio enzima:péptido de 1:5, una reducción del 78 % en las escisiones omitidas y una reducción del 98 % en los picos de autólisis contaminados. PeptideWorks es ideal para la determinación del sitio de conjugación de fármacos, la caracterización estructural de las proteínas, la identificación de proteínas y la monitorización de la modificación de proteínas, incluidas las modificaciones postraduccionales.

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El análisis de glicanos ahora es más fácil y sensible

El análisis de glicanos ahora es más fácil y sensible

Vuelva a imaginar una forma optimizada, rápida y altamente sensible de perfilar los N-glicanos en ADC con el kit GlycoWorks. Consiga un rendimiento espectrométrico de masas y de fluorescencia sin precedentes para el análisis de N-glicanos liberados, a la vez que se maximiza la productividad con una solución que se puede automatizar en el robot de pipeteo Andrew+ de Waters. Con solo 3 sencillos pasos en tan solo 30 minutos, el kit GlycoWorks RapiFluor-MS N-Glycan reduce la complicada y larga preparación de muestras.

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Elimine la complejidad de la cuantificación de proteínas

Elimine la complejidad de la cuantificación de proteínas

Simplifique y acelere la digestión de proteínas con los kits de digestión ProteinWorks eXpress. Reactivos predosificados y trazables por lote y protocolos estandarizados para una cuantificación LC-MS exacta, precisa y sensible de proteínas, incluidos los ADC, en plasma y suero. Consiga un rendimiento y una flexibilidad inigualables para la digestión de proteínas reproducible con los kits optimizados para diversos flujos de trabajo, incluido el bioanálisis/metabolismo de fármacos y farmacocinética.

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Gane en eficacia y reduzca el tiempo de espera con las soluciones de automatización de laboratorio verificadas.

Gane en eficacia y reduzca el tiempo de espera con las soluciones de automatización de laboratorio verificadas.

Mejore la eficacia y el rendimiento de la preparación de muestras

Mejore la eficacia y el rendimiento de la preparación de muestras

Agilice la preparación de muestras para análisis cuantitativos de LC-MS con flujos de trabajo verificados que ayuden a minimizar la variabilidad, mejorar la trazabilidad y simplificar la transferencia de métodos.

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Está a solo un clic de conseguir el éxito

Está a solo un clic de conseguir el éxito

Optimice la productividad y el éxito de su laboratorio con Waters Global Services para mantener el máximo rendimiento del sistema, minimizar el tiempo de inactividad, abordar los desafíos de las aplicaciones y cumplir con los estrictos requisitos de cumplimiento normativo.

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Haga que la ciencia sea más accesible con Waters Capital

Haga que la ciencia sea más accesible con Waters Capital

Maximice los recursos y minimice el riesgo con las opciones de pago de Waters Capital, que incluyen la actualización de equipos obsoletos, la obtención de soporte personalizado y la combinación de servicios en un único pago mensual.

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Los datos hablan por sí solos

Los datos hablan por sí solos
Análisis de ADC conjugado con cisteína mediante HIC. La distribución de fármacos se determinó para tres muestras diferentes de ADC conjugado con cisteína con una carga de fármaco creciente.
Resultados de ADC DSC con ajuste gaussiano obtenidos en el sistema BioAccord para mAb nativo (arriba) y con DAR alto (abajo).
Análisis SEC rápido de trastuzumab emtansina (A) y bevacizumab (B) realizado en una columna XBridge Premier Protein SEC 250 Å 2,5 µm 4,6 x 150 mm. Fase móvil: 1x PBS, pH 7,4, flujo F = 0,7 mL/min, temperatura T = 25 °C, volumen inyectado 1 μL, detección: 280 nm (UV).
Comparación de mapeo de péptidos (cromatogramas UV) de trastuzumab conjugado y sin conjugar
Arriba: Digestión tripsínica de biosimilar de trastuzumab.
Abajo: Trastuzumab emtansina (Kadcyla), digestión tripsínica de conjugado de anticuerpo-fármaco.
En ambas digestiones tripsínicas se utilizó el kit de digestiones tripsínicas de proteínas PeptideWorks y de tripsina RapiZyme con inyección de 100 µL (~10 µg) en una columna XSelect Premier Peptide CSH C18, 2,5 µm, 2,1 x 150 mm. Picos adicionales observados en el cromatograma de Kadcyla (abajo) en comparación con trastuzumab no conjugado (arriba).

Seminarios web y recursos



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Confíe en Waters como solución única para las columnas cromatográficas de conjugado anticuerpo-fármaco (ADC), diseñadas para proporcionar un ratio exacto entre el fármaco y el anticuerpo para aplicaciones de descubrimiento, desarrollo y fabricación.

Más información sobre las soluciones de bioconjugados de Waters.

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