Waters與Trajan聯手合作,透過HDX-MS系統將高度人工處理的分析流程,轉變為整合式自動化系統,其使用奈米級至微米級的高壓UPLC分離、樣品處理機器人技術,以及高解析度離子遷移質譜分析,深入研究蛋白質結構,包括:
Waters在市面上推出的完整HDX-MS研究系統採用了ACQUITY UPLC M-Class/HDX聯用技術,搭配Waters質譜儀(例如SELECT SERIES Cyclic IMS)、Trajan機器人以及HDX特定應用軟體DynamX使用。
氫氘交換(HDX) MS適用於許多應用,可以瞭解小分子治療藥物如何與蛋白質標靶結合,還能執行表位定位。透過這項技術,用溶液中的氘取代生物分子主鏈中的醯胺氫,可讓MS量測出這些變化。
生物分子主鏈上的醯胺氫與溶液中的氘交換速率不同,部分取決於構形。MS可以量測出這些變化,進而推斷出不同位點的活性程度。這些位點經識別後可對映到一級結構,更容易顯像出來,並顯示出有關蛋白質結構的資訊。相對折疊和動力學的現象可以根據不同位點的不同吸收速率來測定。
有了UPLC-MSE,實驗室可以產生面面俱到的數據集,將所有胜肽量測出來,不會因胜肽訊號強度而有所偏頗。這是HDX研究中相當重要的功能,在低強度胜肽中也許能找出關鍵資訊。
HDX-MS能提供蛋白質不同構形或蛋白質內部位點的相對氘吸收量,為生物分子動力學開闢了新契機。近期發展頗多,使HDX-MS成為更容易使用的工具,方便研究生物治療藥物高階結構(HOS)動力學。產業和法規走向趨於明確,著重構形及生物分子之間的關係,讓HDX這項工具在生物治療藥物分析領域中快速受到廣泛採用。
生物仿製藥表徵分析
DynamX HDX數據分析軟體旨在系統性地以預設標準選擇譜圖,並量測氘化形式的質量變化。搭配使用UPLC,訊號峰更鮮明、分離效果更好,再加上MSE偵測的面面俱到特性,可大大簡化軟體自動化作業。
Enzymate BEH胃蛋白酶管柱能快速有效地在線上進行蛋白質酶解,樣品前處理時間更短,而且可以再現。
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