採用2D技術的ACQUITY UPLC M-Class系統
運用2D分離處理延伸分析的動態範圍
2D-LC原本給人既耗時又困難的印象,直到不久前才出現變化。採用2D技術的ACQUITY UPLC M-Class系統透過高度直覺性的功能導向式方法設定、標準化的分離化學品,以及自動化的閥門切換,精簡了2D-LC分離過程。
採用2D技術的ACQUITY UPLC M-Class系統擴大使用sub-2-µm顆粒,用於胜肽分離能達到相當高的峰容量。這套創新系統充分運用二維(2D) UPLC,以雙逆相(RP)方法提高複雜蛋白體學樣品的層析解析度。
規格
最大運作壓力 |
15,000 psi |
pH範圍 |
2~10 |
運作流速範圍 |
200 nL/min至100 μL/min,不分流 |
樣品流路 |
非鐵 |
注射量 |
0.1 µL到100.0 µL |
樣品箱 |
4–40 ˚C |
幫浦選件 |
雙幫浦 |
管柱追蹤 |
無 |
管柱容量 |
單管柱,內徑(ID) 75 µm到4.6 mm;長度不超過250 mm |
最大樣品容量 |
不超過21個孔盤(使用直立式樣品管理器) |
偵測器選擇 |
PDA偵測器 TUV偵測器 質譜儀 |
外部控制 |
MassLynx軟體 |
實體規格 (µBSM、µSM-FL、TVM) |
寬度:34.3公分(13.5吋) 高度:69.7公分(27.4吋) 深度:71.2公分(28.0吋) |
概述
- 透過充分運用胜肽的多種離子疏水性結構,在兩個維度中均達到高解析度
- 改進蛋白質鑑定、定量和序列範圍
- 改善分離處理成效、方法生成精靈,以及更完善的數據演算法
建議用途:提升複雜蛋白體學樣品的層析解析度。
特色標題
擴大通用2D的作用
傳統通用型2D-LC會先使用離子交換(IEX)再使用逆相(RP)。所有IEX方法皆需使用含鹽緩衝液,這類緩衝液若進入質譜儀(MS),可能會造成游離干擾和積垢問題。IEX分離處理單純以胜肽電荷為準,因此,使用IEX的層析解析度通常不好,胜肽會出現相當多的碎片,增加數據解析的難度。
採用2D技術的ACQUITY UPLC M-Class系統採用的2D方法經過改良,在RP的第一維採用pH 10,在RP的第二維採用pH 2,成效遠優於傳統IEX方法。
安全鑑定發揮一流的再現性
採用2D技術的ACQUITY UPLC M-Class系統能發揮良好的2D-LC解析度,因此能讓實驗室進行更多安全的鑑定工作,包括可再現的和遞增的2D-LC蛋白質鑑定。這樣就能改進蛋白質鑑定、定量和序列範圍。
兩個維度均能發揮高解析度
第一維分離處理使用IEX往往會造成解析度不佳和碎片之間流失等問題。第一步就發揮高解析能力可以讓實驗室在最後一個步驟掌握更完整的資訊。採用2D技術的ACQUITY UPLC M-Class系統先進行pH 10的逆相分離處理,再進行更低pH的sub-2-µm分離處理,能幫助您進行實用的正交分離,產出高品質數據。
提高解析度就能提高蛋白質鑑定能力
在這項分離處理中,通用2D-LC用於複雜蛋白體學樣品的解析度從大腸桿菌的胰蛋白酶分解物就能一覽無遺。其中一維使用ACQUITY UPLC M-Class系統,在管柱中裝入0.5 µg樣品,從2874種胜肽中解析和鑑定365種蛋白質。在2D-LC系統中加入2.5 µg樣品,分別運用5步和10步分離處理流程鑑定7661種和9415種胜肽,增加蛋白質範圍,並讓結果發揮更高的可信度。
2D-LC和ACQUITY UPLC M-Class系統能幫助實驗室在更安全的前提下鑑定兩倍多的蛋白質,回收更多胜肽,還能擴大蛋白質範圍並提高結果可信度。