Guía de iniciación a SPE

Resumen del desarrollo de métodos de SPE

Resumen del desarrollo de métodos de SPE

La siguiente tabla resume la descripción anterior de los modos de SPE:

Resumen de la utilidad y la práctica de los modos de LC principales para la extracción en fase sólida (SPE)

Fase reversa

Fase normal

Intercambio iónico

Analito

Polaridad de moderada a baja

Polaridad de baja a alta/neutro

Cargado o ionizable

Mecanismo de separación

Separación basada en la hidrofobicidad

Separación basada en la polaridad

Separación basada en la carga

Matriz de muestras

Acuosa

Eluyente orgánico no polar

Acuosa/Fuerza iónica baja

Acondicionar/equilibrar el sorbente de SPE

1. Solvatar con orgánico polar

2. Agua

Orgánico no polar

Solución tampón de baja fuerza iónica

Paso de lavado preliminar

Solución tampón/acuosa

Orgánico no polar

Solución tampón de baja fuerza iónica

Pasos de elución

Aumentar el contenido orgánico polar

Aumentar la fuerza eluotrópica de la mezcla de eluyentes orgánicos

Soluciones tampón más fuertes: Fuerza iónica o pH para neutralizar la carga

AX

(Intercambio de aniones)

CX

(Intercambio de cationes)

Funcionalidad de sorbente

C18, tC18, C8, tC2, CN, NH2, HLB, RDX, Rxn RP 

Sílice, alúmina, Florisil, diol, CN, NH2

Accell Plus QMA, NH2, SAX, MAX, WAX

Accell Plus CM, SCX, MCX, WCX, Rxn CX 

Polaridad de la superficie del sorbente

De baja a media

De alta a media

Alta

Alta

Intervalo típico de polaridad del eluyente

De alta a media

De baja a media

Alta

Alta

Eluyente de carga de muestras típico

Agua, solución tampón de fuerza baja

Hexano, cloroformo, diclorometano

Agua, solución tampón de fuerza baja

Agua, solución tampón de fuerza baja

Eluyente de elución típico

CH3OH/agua, CH3CN/agua

Acetato de etilo, acetona, CH3CN

Soluciones tampón, sales con alta fuerza iónica, aumento del pH

Soluciones tampón, sales con alta fuerza iónica, disminución del pH

Orden de elución de la muestra

Primero los componentes de la muestra más polares

Primero los componentes de la muestra menos polares

Primero el componente de la muestra más débilmente ionizado

Primero el componente de la muestra más débilmente ionizado

Cambio de eluyente de la fase móvil necesario para eluir compuestos

Disminuir la polaridad del eluyente

Aumentar la polaridad del eluyente

Aumentar la fuerza iónica o aumentar el pH

Aumentar la fuerza iónica o reducir el pH

Esta ha sido una breve introducción al enriquecimiento y purificación de muestras mediante extracción en fase sólida (SPE). La mejor manera de comenzar a utilizar la SPE es conocer en primera instancia lo que otros usuarios han hecho con analitos o matrices similares a los que le interesan. Encontrará más de 7700 referencias al uso de la SPE en la biblioteca de recursos de waters.com. Rellene el espacio en blanco con un nombre parcial del compuesto o la matriz en la siguiente frase de búsqueda:
“Sep-Pak” OR “Oasis” AND ______ *

NOTA: Para no arriesgarse a cometer un error ortográfico, utilizar un asterisco [*] con un nombre raíz para obtener mejores resultados. Con esta misma cadena de búsqueda, se pueden encontrar incluso más referencias (>60 000) en Google Académico.

Lectura adicional:

J.C. Arsenault and P.D. McDonald, Beginners Guide to Liquid Chromatography, Waters [2007].

P.D. McDonald and E.S.P. Bouvier, A Sample Preparation Primer and Guide to Solid-Phase Extraction Methods Development, Waters [2001].

Waters, Purity by SPE [2008].

U.D. Neue, P.D. McDonald, Topics in Solid-Phase Extraction. Parte 1. Ion Suppression in LC-MS Analysis: A Review. Strategies for its elimination by well-designed, multidimensional solid-phase extraction [SPE] protocols and methods for its quantitative assessment [2005].

En este manual

Guía de iniciación a SPE

SPE: Enriquecimiento y purificación de muestras mediante extracción en fase sólida

Objetivos y ventajas de la técnica SPE

Desarrollo de métodos de SPE

Resumen del desarrollo de métodos de SPE

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