전자 전달 해리(ETD)
번역 후 변형(PTM) 및 하향식(Top-down) 바이오 분자 시퀀싱 분석
신뢰성, 유연성 및 사용 편의성을 향상시키기 위해 특별히 개발된 전자 전달 해리(ETD) 기능 업그레이드는 전기분무 이온화에 독점적으로 사용되며, 펩타이드 및 단백질의 시퀀싱과 구조 분석을 위한 강력한 플랫폼을 제공합니다.
충돌 유도 분해(CID)를 보완하는 ETD는 펩타이드 및 단백질의 불안정한 번역 후 변형(PTM) 부위에 대한 부위 특이적 결정에 특히 유용한 것으로 입증되었습니다. ETD는 라디칼을 통한 조각화 기술로써, 이를 통해 펩타이드 N-Cα 결합을 절단하여 c 및 z● 펩타이드 생성 이온(CID를 사용하는 b 및 y” 이온 참조)을 제공하여 인산화 부위의 정확한 위치 파악이 가능합니다. 펩타이드/단백질은 도너(donor) 화학 음이온에서 양전하를 띄는 양이온으로의 전자 전달에 의해 해리되며, 이는 본질적으로 전자 포집 분해(ECD)와 유사한 조각화 과정을 초래합니다.
전자 전달 해리(ETD)
개요
- 고성능 - 고분리능, 정확한 질량(Exact mass) 데이터 및 높은 반응 효율성으로 뛰어난 품질의 시퀀스 데이터를 생성합니다.
- 유연성 - 다양하고 높은 효율의 시약을 사용하고 고급 기초 연구를 위해 ETD와 함께 이온 이동성 분광법(IMS)을 채택합니다. 기존의 것과 nanoFlow 전기분무 이온 소스 모두에 사용하기 적합합니다.
- 사용 및 유지관리 용이 - ETD 글로우 방전 소스의 용이성을 통해 ETD 시약을 쉽고 안정적으로 주입하고 MS에 빠르게 보충합니다.
ETD 소스 작동
ESI 소스에는 빠르고 효율적인 중압 글로우 방전 시약 음이온 소스가 통합되어 있습니다. ETD 실험 중 양이온과 음이온이 순차적으로 생성됩니다. 이온 소스 극성 및 Quadrupole 세트 질량은 다중 하전된 Precursor 양이온과 단일 하전된 시약 라디칼 음이온(일반적으로 1,4-디시아노벤젠[m/z 128]에서)을 Trap T-Wave 이온 가이드에 전달하도록 전환되며, 이 과정에서 서로 상호작용하여 ETD Product 이온을 형성합니다.
글로우 방전 소스에서 형성된 시약 음이온은 이 기기의 Triwave Trap T-Wave 이온 가이드에 포집되어 분석물질 이온과 함께 빠른 전자 전달 반응을 진행합니다. ETD로 다중 하전된 펩타이드 이온을 조각화하여 주로 c-조각 및 z-조각 이온을 제공합니다.
시약 음이온의 형성과 트래핑 및 샘플 이온의 형성과 반응은 별개 과정입니다. ETD 모드에서 작동하는 경우, 기기는 음이온으로 Trap T-Wave 이온 가이드를 효과적으로 다시 채우는 글로우 방전 모드와 샘플을 이온화하여 ETD 시약 음이온과 반응하는 ESI 모드 간에 번갈아 사용됩니다.
수집 중에 Trap T-Wave 이온 가이드는 ETD 전용으로 사용되지만 Transfer T-Wave 이온 가이드는 CID에 사용 가능한 상태로 남아 있습니다. 따라서 동일한 실험에서 ETD 및 CID 데이터 모두를 수집할 수 있습니다.
기기 호환성
전자 전달 해리(ETD) 기능 업그레이드를 적용 가능한 기기:
- (MALDI) SYNAPT G2 MS, (MALDI) SYNAPT G2 HDMS
- (MALDI) SYNAPT G2-S MS, (MALDI) SYNAPT G2-S HDMS
- (MALDI) SYNAPT G2-Si MS, (MALDI) SYNAPT G2-Si HDMS
SYNAPT G2-Si를 제외하고 각 SYNAPT 기기 유형에 대해 두 가지 다른 업그레이드 제품을 사용할 수 있습니다. 이는 'ETD 지원'이 되지 않는 기기를 수용하기 위한 것입니다. ETD 지원 기기는 시리얼 번호의 접두사로 식별할 수 있습니다. 모든 SYNAPT G2-Si 기기는 'ETD 지원'이 됩니다.
초기 SYNAPT G2 시리즈 MALDI 기기는 교체용 ETD 호환 MALDI 소스 어댑터 플레이트가 필요할 수 있습니다.
장비 및 설치
전자 전달 해리(ETD) 기능 필드 업그레이드의 구성:
- ETD 글로우 방전 이온 소스 및 방전 핀
- 시약 샘플 홀더 뚜껑, 기체 취급 하드웨어 및 밸브
- 교체용 소스 PCB 어셈블리, Trap 및 Transfer T-Wave 전원 공급 장치, ETD 배선 장비 및 추가 소프트웨어 (초기 SYNAPT G2 기기)
- 교체용 소스 이송 PCB 어셈블리 및 추가 소프트웨어(초기 SYNAPT G2-S 기기)
- 작동 설명서 및 테스트 화학물질.
Waters 현장 서비스 엔지니어의 설치, 성능 검사 및 사용자 교육이 필요합니다.
