オリゴヌクレオチドスタンダードおよび核酸スタンダード

オリゴヌクレオチド専用のアナログ

分析的 LC ベースの分析法は、合成オリゴヌクレオチド、mRNA、ベクターを用いたトランスジーンのいずれに対しても、遺伝子治療薬の特性解析および品質確認用の強力なツールになる可能性があります。分析法を適切に導入するためには、その分析法を開発し、適格性評価し、システム適合性を確認する必要があります。対象分析種と化学的に類似した質の高いレファレンス物質があることで、大きな違いが生まれる可能性があります。

当社のレファレンス標準試料の多様なカタログには、低分子干渉 RNA（siRNA）、脂質結合アンチセンスオリゴヌクレオチド（C16-ASO）、ssDNA 20 mer、ssDNA ラダー、シングルガイド RNA（sgRNA）が記載されています。これらのアプリケーション専用の標準試料は、分析法開発、インタクト分析および MS/MS フラグメンテーション分析、システム適合性試験用のすぐに注入できる状態のレファレンス物質を提供します。

クロマトグラフィーの性能を一段上に

IPRP、HILIC、AEX 分析用の 15 ～ 35 mer、20 ～ 60 mer、20 ～ 100 mer の ssDNA ラダーを使用して分離をブラケット化します。アッセイの性能を、純度、サイズバリアント、欠損配列（N/N-1）ヌクレオチド修飾、バックボーンバリアントについて確認します。ポンプがグラジエントを精密に送液していることを確認し、吸着クロマトグラフィーカラムの選択性を確認し、サイズ別の分離能力をキャリブレーションします。

高分子核酸への SEC、AEX、RP の活用

核酸医薬品はこれ以上短くなりません。より高分子の核酸分子種用に LC 分析法が改良されるにつれて、新たな技能およびシステム適合性標準試料の必要性も生じています。dsDNA 50 ～ 1350 bp ラダーは、ポアサイズの大きい SEC クロマトグラフィーに関して保証されており、陰イオン交換（AEX）や非変性逆相クロマトグラフィーでも容易にテストできます。17 種の二本鎖 DNA（dsDNA）成分を、サイズキャリブレーション、システム適合性試験、分析法のトラブルシューティングの基準点として使用することができます。

抽出効率の確認

アンチセンスオリゴヌクレオチド（ASO）の薬物代謝特性および薬物動態（DMPK）特性を見極めるには、頑健で効率的な抽出手順を確立する必要があります。ASO に脂質部分を結合することで、さまざまな組織へのターゲット送達が向上しますが、溶解度の問題およびタンパク質結合のレベルが非常に高いことから、この機能を生体マトリックスから回収することは、本質的に困難であることがわかっています。ウォーターズの脂質結合 ASO の LC-MS 用標準試料は、C16 の 5' 部分と結合しており、2'-MOE 修飾およびホスホロチオエート骨格が含まれています。これは差別化されたレファレンス物質であり、合成医薬品オリゴヌクレオチドの回収率評価に使用できて、OligoWorks SPE に付属のプロトコルなど、定量的サンプル前処理手順の開発をより確実に行うことができます。

二本鎖 siRNA の非変性分析の確認

変性条件と非変性条件の両方での siRNA の分析により、生成物の関連不純物の完全な特性解析が可能になります。IP-RP 分析法と HILIC 分析法はいずれも、変性条件と非変性条件の両方を簡単に適用でき、低分子干渉 RNA（siRNA）の純度測定およびアイデンティティー決定に役立ちます。ほとんどの siRNA 二重鎖は、約 40 ～ 50 ℃ を超えると、個々のセンス鎖およびアンチセンス鎖の一本鎖成分に解離し始めます。適切に開発された非変性 LC アッセイを使用すると、二本鎖形成を調べ、過剰な非ハイブリダイズ一本鎖 RNA（ssRNA）不純物を定量することが可能になります。Waters siRNA LC-MS 用スタンダードは、これらのアッセイの開発と適格性評価に準備不要で使用できます。