2D テクノロジー搭載 ACQUITY UPLC M-Class システム

包括的 2D の影響の拡張

従来の包括的 2D-LC では、イオン交換（IEX）分離の後に逆相（RP）分離を行います。どの IEX 手法でも塩を含むバッファーを使用します。そのため、そのため、バックグラウンドでイオン化が起きたり、塩が質量分析計（MS）に入って付着したりするおそれがあります。IEX 分離はぺプチドの電荷のみに基づくため、IEX 次元のクロマトグラフィー分離能が低く、ぺプチドが複数のフラクションに現れて、データの解釈が困難になることがよくあります。

2D テクノロジー搭載 ACQUITY UPLC M-Class システムの改良された 2D 法では、一次元目で pH 10 の RP、二次元目で pH 2 の RP を使用することにより、従来の IEX 手法よりもはるかに優れた結果を得ることができます。

確実な同定でクラス最高レベルの再現性を実現

2D テクノロジー搭載 ACQUITY UPLC M-Class システムの 2D-LC 分離の機能として、2D-LC に基づくタンパク質の再現性のある漸進的な同定など、確実な同定をより多く行うことができます。これにより、タンパク質の同定、定量、シーケンスカバー率が向上します。 

両次元で高分離能を実現

IEX を最初の分離次元として使用すると、分離が悪くなり、フラクション間にブリードが生じることがよくあります。最初の段階の分離能が高ければ、最終段階で得られる情報の質が向上します。2D テクノロジー搭載 ACQUITY UPLC M-Class システムでは、pH 10 での逆相分離のサポートに続くより低い pH での 2 µm 以下の粒子での分離により、有用で直交する分離が得られ、質の高いデータを得ることができます。

分離能の向上によりタンパク質の同定数が向上

以下に示す分離結果は、複雑なプロテオミクスサンプルの包括的な 2D-LC の分離能を示す、大腸菌のトリプシン消化の分析例です。ACQUITY UPLC M-Class システムを一次元で使用し、0.5 µg をオンカラムでロードすることにより、2,874 のぺプチドから 365 のタンパク質が分離・同定されました。2D-LC システムに 2.5 µg を追加することにより、5 ステップ分離で 7,661、10 ステップ分離で 9,415 のペプチドが同定され、結果としてタンパク質カバー率が高まって、結果の信頼性が高まりました。

2D-LC および ACQUITY UPLC M-Class システムにより、2 倍もの数のタンパク質をより確実に同定し、より多くのペプチドを回収し、より高いタンパク質カバー率を達成して、結果の信頼性が高めることができます。