SPE – Probenanreicherung und Aufreinigung mithilfe der Festphasenextraktion
Drei Gründe für die Verwendung der Festphasenextraktion (SPE)
1. Sie müssen spezifische Interferenzen aus Ihrer Probe entfernen, damit sie keine Probleme bei der Detektion und Quantifizierung der nachzuweisenden Analyten verursachen. In dem hier gezeigten Beispiel konnten durch ein unzureichendes Probenvorbereitungsprotokoll Interferenzen nicht beseitigt werden, was an der verbleibenden Gelbfärbung des Extrakts und den vielen Peaks zu erkennen ist, die sich mit den nachzuweisenden Analyten im Chromatogramm überschneiden.
2. Sie müssen die Konzentration des nachzuweisenden Analyten in der ursprünglichen Probe erhöhen, damit er von Ihrem Analyseverfahren leichter nachgewiesen und genauer quantifiziert werden kann. Ein großes Probenvolumen kann auf eine SPE-Säule geladen werden, wenn der nachzuweisende Analyt stark zurückgehalten wird. Dann kann der Analyt in einem sehr kleinen Volumen eluiert werden, wodurch seine Konzentration im Probenaliquot des gewählten Analysegeräts erhöht wird.
3. Sie müssen Interferenzen in Ihrer Probe entfernen, die unsichtbar sind, aber das Signal für den nachzuweisenden Analyten unterdrücken, wie es durch Massenspektrometrie erfasst wird. In dem hier gezeigten Beispiel gelang es bei der Proteinfällung nicht, die Phospholipide aus einem Plasmaextrakt zu entfernen, was eine starke Ionenunterdrückung zur Folge hatte. Ein optimiertes Mixed-Mode-SPE-Protokoll liefert den saubersten Extrakt und minimiert die Ionenunterdrückung.
In diesem Leitfaden
SPE – Probenanreicherung und Aufreinigung mithilfe der Festphasenextraktion