Leitfaden zu SPE

SPE-Methodenentwicklung im Überblick

Die folgende Tabelle fasst die vorangegangene Diskussion über die SPE-Modi zusammen:

Zusammenfassung der Nützlichkeit und Praxis der wichtigsten LC-Modi für die Festphasenextraktion [SPE]

	Reversed-Phase	Normalphase	Ionenaustausch
Analyt	Mäßige bis geringe Polarität	Niedrige bis hohe Polarität/neutral	Geladen oder ionisierbar
Trennmechanismus	Trennung aufgrund der Hydrophobizität	Trennung aufgrund der Polarität	Trennung aufgrund der Ladung
Probenmatrix	Wässrig	Nicht polares organisches Lösungsmittel	Wässrig/Niedrige Ionenstärke
Konditionieren/Äquilibrieren des SPE-Sorbens	1. Konditionieren mit polarem organischem Lösungsmittel 2. Wasser	Unpolar organisch	Puffer mit niedriger Ionenstärke
Vorläufiger Spülschritt	Wässrig/Puffer	Unpolar organisch	Puffer mit niedriger Ionenstärke
Elutionsschritte	Erhöhen des polaren organischen Anteils	Erhöhen der eluotropen Stärke des organischen Lösungsmittelgemisches	Stärkere Puffer – Ionenstärke oder pH-Wert zur Neutralisierung der Ladung

			AX [Anionenaustausch]	CX [Kationenaustausch]
Funktionsweise des Sorbens	C₁₈, tC₁₈, C₈, tC₂, CN, NH₂, HLB, RDX, Rxn RP	Silika, Aluminiumoxid, Florisil, Diol, CN, NH₂	Accell Plus QMA, NH_2, SAX, MAX, WAX	Accell Plus CM, SCX, MCX, WCX, Rxn CX
Oberflächenpolarität des Sorbens	Niedrig bis Mittel	Hoch bis Mittel	Hoch	Hoch
Typischer Bereich der Lösungsmittelpolarität	Hoch bis Mittel	Niedrig bis Mittel	Hoch	Hoch
Typisches Lösungsmittel für die Probenbeladung	Wasser, Puffer geringer Stärke	Hexan, Chloroform, Methylenchlorid	Wasser, Puffer geringer Stärke	Wasser, Puffer geringer Stärke
Typisches Elutionsmittel	CH₃OH/Wasser, CH₃CN/Wasser	Ethylacetat, Aceton, CH₃CN	Puffer, Salze mit hoher Ionenstärke, erhöhen den pH-Wert	Puffer, Salze mit hoher Ionenstärke, senken den pH-Wert
Reihenfolge der Probenelution	Die meisten polaren Probenkomponenten zuerst	Am wenigsten polare Probenkomponenten zuerst	Am schwächsten ionisierte Probenkomponente zuerst	Am schwächsten ionisierte Probenkomponente zuerst
Wechsel des Lösungsmittels der mobilen Phase zur Elution von Verbindungen erforderlich	Polarität des Lösungsmittels verringern	Polarität des Lösungsmittels erhöhen	Ionenstärke oder pH-Wert erhöhen	Ionenstärke erhöhen oder pH-Wert senken

Dies war eine kurze Einführung in die Probenanreicherung und -aufreinigung mittels Festphasenextraktion [SPE]. Mit SPE beginnt man am besten, indem man sich zuerst darüber informiert, was andere mit Analyten und/oder Matrices gemacht haben, die denjenigen ähnlich sind, die Sie interessieren. In der Ressourcenbibliothek auf waters.com finden Sie mehr als 7700 Hinweise zur Verwendung der SPE. Füllen Sie die Lücke mit einem Teil des Namens einer Verbindung oder Matrix im folgenden Suchbegriff aus:
„Sep-Pak“ ODER „Oasis“ UND ______*

HINWEIS: Um Rechtschreibfehler zu vermeiden, verwenden Sie am besten ein Sternchen [*] mit einem Stammnamen. Wenn Sie dieselbe Suchzeichenfolge verwenden, können auf Google Scholar noch mehr Referenzen [> 60.000] gefunden werden.

Weiterführende Literatur:

J.C. Arsenault und P.D. McDonald, Beginners Guide to Liquid Chromatography, Waters [2007].

P.D. McDonald und E.S.P. Bouvier, A Sample Preparation Primer and Guide to Solid-Phase Extraction Methods Development, Waters [2001].

Waters, Purity by SPE [2008].

U.D. Neue, P.D. McDonald, Topics in Solid-Phase Extraction. Part 1. Ion Suppression in LC-MS Analysis: A Review. Strategies for its elimination by well-designed, multidimensional solid-phase extraction [SPE] protocols and methods for its quantitative assessment [2005].