Le tableau suivant résume ce qui a été dit précédemment sur les modes de SPE :
Phase inverse |
Phase normale |
Échange d’ions |
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Analyte |
Polarité moyenne à faible |
Polarité faible à élevée/neutre |
Chargé ou ionisable |
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Mécanisme de séparation |
Séparation basée sur l’hydrophobie |
Séparation basée sur la polarité |
Séparation basée sur la charge |
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Matrice des échantillons |
Aqueuse |
Solvant organique apolaire |
Aqueuse/force ionique faible |
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Conditionnement/équilibrage du sorbant SPE |
1. Solvatation avec solvant organique polaire 2. Eau |
Organique apolaire |
Tampon de force ionique faible |
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Étape de lavage préliminaire |
Aqueux/tampon |
Organique apolaire |
Tampon de force ionique faible |
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Étapes d’élution |
Augmentation de la teneur en matières organiques polaires |
Augmentation de la force éluotropique du mélange de solvants organiques |
Tampons plus forts – force ionique ou pH pour neutraliser la charge |
AX (Échange d’anions) |
CX (Échange de cations) |
|||
Fonctionnalité du sorbant |
C18, tC18, C8, tC2, CN, NH2, HLB, RDX, Rxn RP |
Silice, Alumine, Florisil, Diol, CN, NH2 |
Accell Plus QMA, NH2, SAX, MAX, WAX |
Accell Plus CM, SCX, MCX, WCX, Rxn CX |
Polarité de la surface du sorbant |
Faible à moyenne |
Élevée à moyenne |
Élevée |
Élevée |
Plage de polarité typique des solvants |
Élevée à moyenne |
Faible à moyenne |
Élevée |
Élevée |
Solvant typique de chargement des échantillons |
Eau, tampon à force faible |
Hexane, chloroforme, dichlorométhane |
Eau, tampon à force faible |
Eau, tampon à force faible |
Solvant d’élution typique |
CH3OH/eau, CH3CN/eau |
Acétate d’éthyle, acétone, CH3CN |
Tampons, sels de force ionique élevée, augmentation du pH |
Tampons, sels de force ionique élevée, diminution du pH |
Ordre d’élution de l’échantillon |
Les composés les plus polaires de l’échantillon en premier |
Les composés les moins polaires de l’échantillon en premier |
Les composés de l’échantillon les plus faiblement ionisés en premier |
Les composés de l’échantillon les plus faiblement ionisés en premier |
Changement de solvant de la phase mobile nécessaire pour éluer les composés |
Diminution de la polarité du solvant |
Augmentation de la polarité du solvant |
Augmentation de la force ionique ou du pH |
Augmentation de la force ionique ou diminution du pH |
Il s’agit d’une brève introduction à l’enrichissement et à la purification d’échantillons par extraction en phase solide (SPE). La meilleure façon de commencer à utiliser la méthode SPE consiste à apprendre ce que d’autres ont réalisé avec des analytes et/ou des matrices similaires aux vôtres. Vous trouverez plus de 7 700 références sur l’utilisation de la SPE dans la bibliothèque de ressources sur waters.com. Complétez l’espace avec une partie du nom d’un composé ou d’une matrice dans la phrase de recherche suivante :
« Sep-Pak » OU « Oasis » ET ______*
REMARQUE : Plutôt que de risquer une faute d’orthographe, utilisez un astérisque (*) avec un nom racine pour de meilleurs résultats. En utilisant cette même chaîne de recherche, vous pourrez trouver d’autres références (plus de 60 000) sur Google Scholar.
J.C. Arsenault et P.D. McDonald, Beginners Guide to Liquid Chromatography (Manuel d’initiation à la chromatographie en phase liquide), Waters (2007).
P.D. McDonald et E.S.P. Bouvier, A Sample Preparation Primer and Guide to Solid-Phase Extraction Methods Development (Guide technique de préparation des échantillons et manuel sur le développement de méthodes d’extraction en phase solide), Waters (2001).
Waters, Purity by SPE (Pureté grâce à la SPE) (2008).
U.D. Neue, P.D. McDonald, Topics in Solid-Phase Extraction. Part 1. Ion Suppression in LC-MS Analysis: A Review. Strategies for its elimination by well-designed, multidimensional solid-phase extraction (SPE) protocols and methods for its quantitative assessment (2005).
SPE – Enrichissement et purification des échantillons par extraction en phase solide
Objectifs et avantages de la SPE
Résumé du développement de méthodes SPE