Os ADCs são uma classe de medicamentos biofármacos que fornecem agentes destruidores de câncer diretamente nas células cancerígenas, uma abordagem muito mais direcionada do que a quimioterapia convencional. A otimização de ADCs exige tecnologias analíticas para caracterizar de modo abrangente a molécula, incluindo os atributos bioquímicos dela, como a razão droga/anticorpo (DAR, Drug-to-Antibody Ratio) e os sítios de conjugação.
Como as organizações biofarmacêuticas continuam a explorar a utilização de ADCs como uma classe de tratamento contra o câncer, elas encontram desafios significativos na análise de suas estruturas complexas e heterogêneas. No entanto, um ADC bem caracterizado é fundamental para avançar da descoberta para o desenvolvimento clínico e a comercialização.
Enfrente com sucesso seus desafios de caracterização com insights excepcionais de suas moléculas a partir das soluções de cromatografia líquida de ultradesempenho (UPLC, Ultra-Performance Liquid Chromatography), espectrometria de massas de alta resolução (MS, Mass Spectrometry), recheios de coluna e soluções de análise de dados adequadas para a finalidade da Waters. Conte com a Waters para ajudar a simplificar a análise de moléculas complexas e acelerar a caracterização de ADC e o monitoramento de atributos essenciais de qualidade.
Estudos de caso: Como a Waters está apoiando o desenvolvimento de novas terapias
Acelere a jornada da análise da amostra até a tomada de decisão utilizando o waters_connect para biofármacos, com rotinas de trabalho personalizadas projetadas para aplicações de LC-MS de biofarmacêutica, massa intacta, mapeamento de peptídeos, MAM de peptídeos e análise de N-glicanos livres.
Realize análises de alta qualidade baseadas em LC e determine o DAR de ADCs altamente hidrofóbicos e conjugados com cisteína utilizando as colunas de HPLC de cromatografia de interação hidrofóbica (HIC, Hydrophobic Interaction Chromatography) Waters Protein-Pak Hi Res para separações rápidas e eficientes.
As Colunas de fase reversa para bioconjugados e conjugados droga-anticorpo com HPS MaxPeak, como as Colunas ACQUITY e XBridge Premier BEH C4 para proteínas, foram projetadas exclusivamente para minimizar as interações secundárias entre ADCs (conjugados droga-anticorpo) e o hardware da coluna, além de serem ideais para a análise de ADCs conjugados com lisina. Ao contrário dos ADCs conjugados com cisteína, as ligações de dissulfeto dentro da cadeia que mantêm as ligações entre as cadeias pesadas e leves do mAb para os ADCs conjugados com lisina são intactas. Portanto, a cromatografia de fase reversa é ideal para a análise de ADCs conjugados com lisina quando a química do ligante não é instável em pH ácido. Além disso, a Waters oferece colunas de fase reversa com tecnologia de partículas de núcleo sólido, como a coluna de polifenil BioResolve RP mAb para análises em nível intacto e de subunidades, para determinar a localização de fármacos ligados no nível de domínio.
Acabe com a necessidade de criar várias fases móveis de eluente de SEC com proteínas diferentes utilizando um método de plataforma com solução salina tamponada com fosfato (PBS, Phosphate Buffered Saline) para obter dados agregados, monômeros e fragmentados consistentemente exatos com as colunas de SEC da Waters. Além disso, para bioconjugados que podem ser hidrofóbicos criando interações secundárias indesejadas, não há necessidade de adicionar solvente orgânico com as Colunas de SEC MaxPeak Premier Protein e suas partículas BEH ligadas por PEO.
Meça com exatidão os perfis variantes de carga de ADCs ligados por cisteína e por lisina com a Coluna BioResolve SCX mAb e os concentrados de tampão de pH BioResolve CX para gradientes de sal ou pH com interações secundárias minimalistas na detecção óptica. Para insights estruturais com espectrometria de massas na troca iônica, nossos tampões compatíveis com MS, concentrados de tampão de pH IonHance CX-MS, tornam o IEX-MS on-line uma realidade com tampões voláteis e de alta pureza, adequados para espectrometria de massas.
Os conjugados de oligonucleotídeos de anticorpos (AOCs, Antibody Oligonucleotide Conjugates) são comumente utilizados no diagnóstico de proteínas e são uma opção terapêutica promissora para a terapia celular direcionada. A carga negativa líquida de um AOC se expande a cada sítio de conjugação adicional, resultando em um aumento da retenção em uma resina de troca aniônica. A Coluna GenPak FAX contém uma química de troca aniônica fraca que exibe capacidade de retenção controlada e uma seletividade única para amostras de proteína e oligonucleotídeos. Um trabalho recente de aplicação demonstra que o AEX pode ser utilizado em conjunto com o MALS para gerar informações de peso molecular absoluto.
A cromatografia de interação hidrofílica (HILIC, Hydrophillic Interaction Chromatography) tem sido amplamente utilizada para separar pequenos compostos polares, embora sua aplicação a grandes biomoléculas, exceto glicanos livres, tenha sido surpreendentemente pouco explorada. Com as Colunas de poros largos para glicoproteínas da Waters, agora é possível utilizar o modo HILIC para coletar informações antes inacessíveis de proteínas intactas (com ou sem glicosilação), fragmentos de proteínas e glicanos complexos livres.
Os Kits de digestão tríptica de proteínas PeptideWorks da Waters para rotinas de trabalho manuais ou automatizadas fornecem ao seu laboratório mapas de peptídeos reprodutíveis e de alta eficiência em menos de 2,5 horas, 4 vezes mais rápido do que a média dos métodos caseiros. Obtenha digestões de 30 minutos com uma razão enzima:peptídeo de 1:5, redução de 78% em clivagens perdidas e uma redução de 98% em picos de autólise contaminados. O PeptideWorks é ideal para determinação do sítio de conjugação de medicamentos, caracterização estrutural de proteínas, identificação de proteínas e monitoramento de modificações de proteínas, incluindo modificações pós-conversão.
Crie uma maneira otimizada, rápida e altamente sensível de definir o perfil de N-glicanos em ADCs com o Kit GlycoWorks. Obtenha um desempenho espectrométrico de massas e fluorescente sem precedentes para análise de N-glicanos livres, maximizando a produtividade com uma solução que é automatizável no Robô de pipetagem Waters Andrew+. Com apenas 3 etapas simples em somente 30 minutos, o Kit GlycoWorks RapiFluor-MS para N-glicanos reduz o preparo complexo e demorado de amostras.
Simplifique e acelere a digestão de proteínas com os Kits de digestão ProteinWorks eXpress. Reagentes rastreáveis em lote, pré-medidos e protocolos padrão para quantificação LC-MS exata, precisa e sensível de proteínas, incluindo ADCs, em plasma e soro. Obtenha desempenho e flexibilidade incomparáveis para uma digestão de proteínas reprodutível com kits otimizados para várias rotinas de trabalho, incluindo bioanálise de proteína/metabolismo de fármacos e farmacocinética.
Otimize o preparo de amostras para análises quantitativas por LC-MS com rotinas de trabalho verificadas que ajudam a minimizar a variabilidade, melhorar a rastreabilidade e simplificar a transferência de métodos.
Otimize a produtividade e o sucesso do seu laboratório com os Serviços Globais Waters para manter o desempenho máximo do sistema, minimizar o tempo de inatividade, enfrentar os desafios das aplicações e apoiar os rigorosos requisitos de conformidade.
Maximize recursos e minimize os riscos com as opções de pagamento da Waters Capital, incluindo atualização de equipamentos antigos, obtenção de suporte personalizado e agrupamento de serviços em um pagamento mensal.