Échange hydrogène-deutérium – Spectrométrie de masse

La spectrométrie de masse à échange hydrogène-deutérium (HDX) est utilisée dans de nombreuses applications, notamment pour comprendre la manière dont les petites molécules thérapeutiques se lient aux cibles protéiques et pour établir une cartographie des épitopes. Cette technologie consiste à remplacer l’hydrogène des amides du squelette d’une biomolécule par du deutérium contenu dans une solution, puis à mesurer ces changements par spectrométrie de masse.

La vitesse à laquelle l’hydrogène amide du squelette d’une biomolécule est remplacé par le deutérium en solution varie en fonction de la conformation de la biomolécule. La spectrométrie de masse permet de mesurer ces changements et d’en déduire le degré d’activité au niveau de plusieurs sites. Ces sites peuvent ensuite être identifiés et mis en correspondance avec la séquence primaire afin de faciliter la visualisation et obtenir des informations sur la structure de la protéine. La dynamique et le repliement relatif peuvent être déterminés à partir des taux d’absorption observés à différents endroits.

Grâce à l’UPLC/MS^E, votre laboratoire peut générer un jeu de données complet, en mesurant tous les peptides sans être biaisé par l’intensité du signal. Cette caractéristique est particulièrement importante pour les études HDX, où des peptides de faible intensité peuvent apporter des informations essentielles.

La technique HDX/MS ouvre de nouvelles perspectives sur la dynamique des biomolécules en fournissant des informations sur l’absorption relative du deutérium dans différentes conformations d’une protéine ou à différents endroits d’une protéine. De récentes avancées ont rendu cette technique plus accessible pour étudier la dynamique de la structure d’ordre supérieur des produits biothérapeutiques. Le secteur et la réglementation se tournent de plus en plus vers la conformation et les relations entre les biomolécules, faisant de l’HDX un outil essentiel rapidement adopté dans de nouveaux domaines de l’analyse biothérapeutique.