合相色谱初学者指南

结语

合相色谱并不是为取代传统液相色谱或气相色谱而设计的。相反，它与其它分离技术互为补充。

得益于ACQUITY UPC2系统的技术改进，采用富含CO2的溶剂进行的分离最终变得稳定且可重现，并且和其它所有分离技术一样，成为了一项常规分离技术。

CC应用的洗脱机制与正相LC相同。不过，这种灵活的技术还可以使用某些传统反相色谱柱(如C18)，因此在分析亲脂性极强的化合物时具有类似反相LC保留特性。CC的选择性范围极广，具有明显优势。

RPLC和CC两种方法可分析的化合物占所有化合物的80%-85%。此外，CC还可分析目前我们使用正相LC分析的所有化合物。CC可分析手性化合物、立体异构体和非对映异构体。几乎所有可溶于有机溶剂的化合物都可以使用CC进行分析。不同于正相LC，CC兼容梯度方法、紫外(UV)检测器、光电二极管阵列(PDA)和蒸发光散射(ELS)检测器，而且兼容目前我们常用的全系列质谱仪。

CC以碳中性的CO2为主要流动相，无需使用制备正相LC流动相必需的有害溶剂。另外，由于流动相的主要成分是CO2，因此CC结果不会像正相LC一样因为固定相吸水而波动。

不仅如此，CC还能大幅简化实验操作，这是因为CO2可与各种溶剂混溶(从非极性的己烷/庚烷到极性的甲醇以及醇/水混合物)，还兼容无需任何样品制备步骤即可直接进样的多种样品稀释剂。

合相色谱可解决多种类型的分离难题，适合许多不同的应用。有关合相色谱和ACQUITY UPC2系统的更多信息，请访问www.waters.com/UPC2。

参考文献

1. E. Klesper, A. H. Corwin, D. A. Turner, High pressure gas chromatography above critical temperatures, J. Org.Chem.27 (1962) 700.

2. 数据摘自https://sites.google.com/site/chempendix/HPLC/solvent-polarity-index 网站资料：(a) D. Harris, Quantitative Chemical Analysis, 9th ed., 2015.，(b) E. Katz et al., Eds., Handbook of HPLC, Marcel Dekker, New York, 1998。

3. C. Graham , J. Pierrus and R.E.Raab, Measurement of the electric quadrupole moments of CO2, CO, and N2, Molecular Physics, 67, 1989, 4.

4. Stephen T. Lee, Tricia S. Reighard, Susan V. Olesik, Phase diagram studies of methanol-H2O-CO2 and acetonitrile-H2O-CO2 mixtures, Fluid Phase Equilibria 122 (1996) 223–41.

5. Compilation from The HPLC Solvent Guide, Wiley-Interscience, Paul C. Sadek and LC-GC,Vol. 13(3) p222, 1995.

6. C. West, E. Lesellier, A UNIFIed classification of stationary phases for packed column supercritical fluid chromatography, J. Chromatogr.A, 1191 (2008) 21–39.

7. E. W. Lemmon, M. Huber, M. O. McLinden, D. G. Friend, National Institute of Standards and Technology, Standard Reference Data Program, Gaithersburg 8.0.