多年来，分析化学家们早已非常擅长从不同特性的有机溶剂和反相色谱柱中筛选出最佳实验配置以获得预期的选择性。我们经常通过调整温度和梯度斜率来提高分离度。在很多情况下，我们会利用现代色谱柱的稳定性优势，在高、低pH的流动相中进行筛选。

方法开发中测试细微pH增量变化并不像常规工具那样常用。因为即使仅发生3/10pH单位的细微变化，也会极大地改变洗脱顺序。尽管pH调整确实对稳定方法的开发十分有价值，但是色谱工作者很少使用该方法。 

其中主要的挑战是准备不同pH流动相耗时耗力：你还在耗费周一的整个早晨配制分析实验所需的缓冲液吗？想想你要称重几次？量几次体积？使用几个溶剂瓶？还有，如何保证每次都能配成同样的缓冲液？

沃特世ACQUITY UPLC H-Class、H-Class Bio和ACQUITY Arc 系统都是性能卓越的四元超高效液相色谱系统，是开发和实现高分离度色谱分析的基础，其中方法重现性的一个重要因素是需要配制一致性的缓冲液。

这就是为何我们的每一款四元UPLC及ACQUITY Arc系统都采用了Auto•Blend Plus技术。

自动化流动相配制

沃特世Auto•Blend Plus™技术将极大地节省准备实验所需要的时间，该技术通过软件自动控制纯溶剂或浓溶液的比例来在线配制所需要的流动相。同时，该技术还能自动配制不同pH值和离子强度的流动相。它的软件可根据缓冲液系统的组成计算如何达到所需的pH。我们的技术是基于已确立的酸碱平衡原理，将混合弱酸溶液及其相应的盐或碱制备成所需pH的缓冲液。

Auto•Blend Plus可用于小分子和大分子分析的方法管理。

如需了解更多信息，请选择详细信息选项卡。

Auto•Blend Plus使用演示：

• 在Auto·Blend Plus方法中创建新缓冲体系
• 在Auto·Blend Plus方法中使用定义的缓冲体系
• 在Auto·Blend Plus方法中修改溶剂
• 在Auto·Blend Plus方法中创建新溶剂
• 在Auto·Blend Plus方法中校正缓冲体系的pH值

由于流动相混合和梯度是根据最佳的色谱保留和选择性来自动实现的，Auto●Blend Plus技术对常规分析、需要多种流动相成分的复杂分析、方法开发和系统清洗等非常有用。ACQUITY UPLC H-Class 和H-Class Bio系统都配有Auto•Blend Plus技术。

方法开发效率更高：

• 考察所有的色谱分离参数
• 测试中间条件
• 避免溶液配制错误

常规分析更便捷：

• 避免溶液配制错误
• 减少昂贵溶剂的使用和废液处理
• 多个方法快速便捷地进行切换

用AutoBlend Plus编辑方法：

1. 可使用预先设置的缓冲液系统，或者自定义适合待分析样品的配方来配制流动相
2. 直接在梯度表内设置pH值和盐浓度梯度
3. 以直线、凸曲线、凹曲线变化分别或同时对pH值梯度和盐浓度梯度进行编程。

AutoBlend Plus也可动态显示各路溶剂的比例，如下。

Auto•Blend Plus技术的原理

Auto●Blend Plus使用特有算法程序控制四元溶剂管理器，使输出指定pH值和盐浓度的缓冲溶液。

该功能源于在实际操作中通过混合酸和共轭碱储备液配制缓冲溶液的做法。在四元溶剂管理器中，四个溶剂瓶中的溶剂以比例进行动态混合，提供与手工制备缓冲溶液相同的混合效果。

图1所示为典型的系统设置。根据缓冲溶液系统的定义，软件会自动计算A、B、C、D四路溶剂瓶中各溶剂的比例，然后进行混合，计算该比例的依据是已知缓冲溶液的pKa值、或者通过实验得到的校正表。每次泵冲程时测算的混合比例，则能协助达成由分离方法决定的pH值和盐浓度。不管是在恒定pH值或者简单pH梯度的情况下，该系统和软件都被证实能提供精确的溶液pH值。

图1. Auto•Blend Plus技术原理。ACQUITY UPLC^®H-Class 系统的四个流动相溶剂瓶都被注满储备液，Auto•Blend Plus技术算法则被用来计算达成必要pH值和盐浓度所需的溶剂混合比例。