Source MALDI pour SYNAPT G2 MS/HDMS
Caractérisation optimale de la masse exacte
Les instruments SYNAPT G2 MS/HDMS™ équipés d’une source MALDI permettent de réaliser des caractérisations de masse exacte sans pareille par analyse MALDI/MS, MALDI-MS/MS et MALDI-MS/IMS/MS (SYNAPT G2 HDMS uniquement).
Source MALDI pour SYNAPT G2 MS/HDMS
Vue d’ensemble
L’identification des composés par spectrométrie de masse peut être limitée par l’incompatibilité de certaines molécules avec l’ionisation par électrospray. Pour vous affranchir de cette limite, vous pouvez équiper votre instrument SYNAPT MS/HDMS d’une source MALDI à pression intermédiaire interchangeable et bénéficier des avantages suivants :
- Double capacité d’ionisation
- Augmentation significative du nombre de composés ionisés et analysés
- Compatibilité avec les formats de plaques cibles 96/384 puits
- Analyses MS et MS/MS avec une résolution, une sensibilité et une exactitude de mesure de masse élevées
- Système laser à semi-conducteur de 2,5 kHz pour les instruments MALDI SYNAPT G2, G2-S et G2-Si
De plus, la capacité de séparation en mobilité ionique des instruments SYNAPT HDMS permet de révéler des composés jusque-là impossibles à détecter par analyse MALDI classique. Ainsi, vous pouvez séparer les espèces d’intérêt issues d’extraits biologiques complexes des isobares coélués, des ions de la matrice MALDI ou des interférences de fond.
Changement rapide
Tous les instruments sont équipés d’un système d’enclenchement motorisé unique qui permet de passer rapidement et facilement du mode API au mode MALDI. Pour changer de source, il suffit de retirer la source API, puis de relever la source MALDI à l’aide d’une plateforme motorisée avant de la fixer en place. Le processus complet pour passer d’une acquisition API à une acquisition MALDI peut généralement être réalisé en deux heures.
Les données MALDI-MS/MS en masse exacte fournies par les instruments SYNAPT MS/HDMS présentent les caractéristiques suivantes :
- Amélioration de l’identification des protéines et de la couverture des séquences de protéines
- Caractérisation des protéines et des modifications post-traductionnelles par MALDI/MS et MS/MS en masse exacte
- Amélioration significative du séquençage de novo par rapport aux techniques de décomposition post-source (PSD)
- Analyse sensible et précise des polymères, des glycanes, des petites molécules et des oligonucléotides
- Identification et profil des métabolites
- Recherche de biomarqueurs
- Imagerie moléculaire
Dotés d’une capacité supplémentaire de séparation en mobilité ionique, les instruments MALDI SYNAPT G2 HDMS offrent également la possibilité de réaliser des expérimentations innovantes dans de nouveaux domaines de recherche.
LC/MALDI
Il est également possible d’analyser des protéines spécifiques provenant de mélanges complexes et ionisables uniquement par MALDI en soumettant l’échantillon en amont à une chromatographie en phase liquide suivie d’une analyse par MS.
On réalise alors une séparation LC hors ligne, puis, à l’aide d’un dispositif robotisé, on dépose les fractions LC éluées directement sur une plaque cible MALDI. On introduit ensuite cette plaque dans l’instrument en vue de l’analyse par MALDI.
Cette procédure est particulièrement efficace pour l’identification des protéines par empreinte peptidique massique, où sont mélangées des protéines faiblement abondantes et fortement abondantes.
Avec d’autres méthodes traditionnelles, les protéines faiblement abondantes ne sont pas détectées en raison des effets de suppression ionique, des limites de gamme dynamique des instruments et du bruit chimique.
Les analyses LC MALDI permettent d’obtenir :
-
Une séparation chromatographique spatialement préservée sur la cible MALDI
-
Des données LC/MS et LC-MS/MS hors ligne, haute sensibilité et sans interférence générées par MALDI
-
Une carte peptidique massique des protéines faiblement abondantes dans des mélanges contenant des protéines fortement abondantes
Imagerie par MALDI/MS
La source MALDI permet de générer des données d’imagerie par MALDI/MS sur les systèmes MALDI SYNAPT™ G2 MS/HDMS™. Vous pouvez aller encore plus loin pour étudier la mobilité ionique par imagerie MS et MALDI sur les instruments SYNAPT G2 HDMS.
Avec l’imagerie MALDI, il est possible de détecter des protéines mal repliées dans des échantillons tissulaires et ainsi d’améliorer la compréhension de diverses maladies humaines.
Les sources des instruments MALDI G2 SYNAPT MS/HDMS incluent toutes de série un support pour plaque de microscope permettant l’introduction directe de plaques de microscope classiques.
De plus, les instruments MALDI SYNAPT G2, MALDI SYNAPT G2-S et MALDI SYNAPT G2-Si sont équipés de série d’un système laser à semi-conducteur à fréquence de récurrence élevée de 2,5 kHz, offrant des temps d’ablation réduits pour les expériences d’imagerie MALDI. La taille moyenne du point ciblé par le laser a été réduite à 60 µm dans le nouveau design de la source MALDI.
Compatibilité de l’instrument
L’installation de la source MALDI n’est recommandée que pour les instruments suivants lorsqu’ils sont déjà équipés d’un analyseur quadripolaire avec une plage de masse de 8 000 uma minimum. Cependant, pour certaines applications MALDI destinées aux petites molécules, un analyseur quadripolaire de 4 000 uma peut suffire. Il est également possible d’installer une source MALDI sur des instruments SYNAPT G2 MS/HDMS déjà équipés d’un analyseur quadripolaire ayant une plage de masses de 32 000 uma.
- SYNAPT G2 MS et SYNAPT G2 HDMS (laser 2,5 kHz)
- SYNAPT G2-S MS et SYNAPT G2-S HDMS (laser 2,5 kHz)
- SYNAPT G2-Si MS et SYNAPT G2-Si HDMS (laser 2,5 kHz)
La conversion sur site des analyseurs quadripolaires de 4 000 uma pour atteindre une plage de masse de 8 000 uma est également disponible pour tous les instruments de la série SYNAPT.
Matériel et installation
Le bloc de la source MALDI comprend un système laser Nd-YAG à semi-conducteur de 2,5 KHz avec entrée d’échantillon à double axe, permettant un accès libre à chaque puits d’échantillon. Le laser à haute fréquence de récurrence offre un débit d’échantillons accru, une excellente résolution spatiale et une productivité améliorée pour les expériences d’imagerie MALDI.
Lorsque l’instrument est configuré pour fonctionner en mode API, la source MALDI et le système de vide se rétractent entièrement à l’avant de la nouvelle enceinte de l’instrument.
En mode MALDI, la nouvelle source peut être déployée à l’aide d’une colonne motorisée intégrée, avant d’être fixée au boîtier de transfert existant grâce à un système de serrage sans outil.
La source est compatible avec toutes les plaques d’échantillons Waters et donne la possibilité d’intégrer des puits d’échantillons Lockmass pour une meilleure exactitude de la mesure de masse. La source est également compatible avec les lames de microscope en verre et les anciennes plaques cibles d’Applied Biosystems par le biais d’un adaptateur.
L’atténuation du laser contrôlable par l’utilisateur est incluse avec un système optique à fort grossissement, qui affiche une image en temps réel du puits d’échantillon sur l’écran de l’ordinateur de l’instrument à des fins d’acquisition.
L’ensemble de la source MALDI doit être installé par un ingénieur Service Clients de Waters.
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