Patrones de oligonucleótidos y ácidos nucleicos
Formulaciones de oligonucleótidos y ácidos nucleicos de alta pureza
Los enfoques analíticos para probar y caracterizar las terapias basadas en genes están en constante evolución. A medida que se someten a análisis cromatográfico ácidos nucleicos más grandes y complejos, cada vez es más importante tener un acceso rápido a materiales de referencia de alta calidad para la cualificación de métodos y la idoneidad del sistema.
Waters ahora ofrece la posibilidad de elegir el material de referencia más adecuado para la molécula. Nuestros patrones analíticos están compuestos por oligonucleótidos y ácidos nucleicos individuales y premezclados que proporcionan cobertura para un amplio rango de pesos moleculares y químicas. Estos patrones pueden ayudarle a evaluar rápidamente la idoneidad del método, el estado de la columna, la sensibilidad del detector y la validez de la instalación para los análisis SEC, IPRP, HILIC y AEX. La elaboración de patrones de calidad está en nuestro ADN.
Patrones de oligonucleótidos y ácidos nucleicos
Especificaciones
Descripción general
- Ajuste su modalidad con una gran variedad de patrones de oligonucleótidos y ácidos nucleicos purificados
- Moléculas con múltiples usos y compatibilidad con las separaciones IPRP, SEC, AEX e HILIC
- Material de referencia preparado y listo para diluir para una rápida evaluación comparativa y resolución de problemas
- Material de referencia de alta calidad, probado por lotes, diseñado para separaciones cromatográficas
Uso recomendado: estos patrones están concebidos para realizar pruebas de rendimiento e idoneidad de los sistemas LC y LC-MS.
Encabezado de características
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Patrón de oligonucleótidos MassPrep -
Patrón para LC-MS de ssDNA de 20 mer
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Secuencia de ssDNA de 10 a 60
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Secuencia de ssDNA de 20 a 100
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ASO conjugado con lípidos
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Patrón para LC-MS de siRNA
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Patrón para LC-MS de sgRNA
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Secuencia de dsDNA de 50 a 1350
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Secuencia de dsDNA de 50 a 1350
Análogos específicos de oligonucleótidos
Los métodos analíticos basados en LC pueden convertirse en herramientas eficaces para caracterizar y confirmar la calidad de la terapia génica, ya sean oligonucleótidos sintéticos, ARNm o transgenes vectorizados. Un método debe desarrollarse, cualificarse y, a continuación, comprobarse para determinar la idoneidad del sistema con el fin de poder implementarlo correctamente. Tener a mano materiales de referencia de calidad que sean químicamente similares a los analitos puede marcar una gran diferencia.
Nuestro catálogo diverso de patrones de referencia incluye ARN interferente pequeño (siRNA), oligonucleótido de antisentido conjugado con lípidos (C16-ASO), ssDNA de 20 mer, secuencias de longitud de ssDNA y ARN de guía única (sgRNA). Estos patrones específicos de la aplicación proporcionan referencias listas para inyectar para el desarrollo de métodos, la fragmentación intacta y por MS/MS y las pruebas de idoneidad del sistema.
Avanzar por la secuencia cromatográfica
Ajuste sus separaciones con secuencias de ssDNA de 15 a 35 mer, de 20 a 60 mer y de 20 a 100 mer para análisis IPRP, HILIC y AEX. Compruebe el rendimiento de los ensayos en cuanto a pureza, variantes de tamaño, modificaciones de nucleótidos de secuencias de error (N/N-1) y variantes de la cadena principal. Confirme que las bombas suministran gradientes precisos, compruebe la selectividad de la columna de cromatografía de adsorción y calibre el poder de resolución basada en tamaño de las separaciones.
Posibilite el uso de SEC, AEX y RP para ácidos nucleicos grandes
Los productos terapéuticos de ácidos nucleicos no se están acortando. A medida que mejoran los métodos de LC para especies de ácidos nucleicos aún más grandes, también surge la necesidad de nuevos estándares de competencia e idoneidad del sistema. La secuencia de dsDNA de 50 a 1350 pb se certifica con cromatografía SEC de poro grande; también se puede analizar fácilmente mediante cromatografía de intercambio aniónico (AEX) y cromatografía de fase reversa no desnaturalizante. Los 17 componentes del ADN bicatenario (dsDNA) se pueden utilizar como punto de referencia para la calibración del tamaño, la idoneidad del sistema y la resolución de problemas del método.
Compruebe la eficacia de la extracción
Para discernir correctamente las propiedades de metabolismo farmacológico y farmacocinética (DMPK) de los oligonucleótidos de antisentido (ASO), el analista debe establecer procedimientos de extracción robustos y eficientes. La conjugación de los ASO con fracciones lipídicas mejora la administración dirigida en diversos tejidos, pero se ha demostrado que esta funcionalidad es inherentemente difícil de recuperar de las matrices biológicas debido a las dificultades de solubilidad y a los niveles extremos de unión a proteína. El patrón de LC-MS para ASO conjugado con lípidos de Waters está conjugado con una fracción 5' de C16 e incluye modificaciones 2'-MOE y una cadena principal de fosforotioato. Es un material de referencia altamente selecto y se puede utilizar para evaluar la recuperación de oligonucleótidos terapéuticos sintéticos, con el fin de garantizar el desarrollo de procedimientos cuantitativos de preparación de muestras, como los protocolos proporcionados con SPE de OligoWorks.
Confirme el análisis no desnaturalizante de siRNA de doble hebra
El Análisis de siRNA tanto en condiciones desnaturalizantes como no desnaturalizantes permite la caracterización completa de las impurezas relacionadas con el producto. Tanto el método IP-RP como el HILIC se pueden aplicar fácilmente en condiciones tanto desnaturalizantes como no desnaturalizantes para facilitar las mediciones de pureza e identidad del ARN interferente pequeño (siRNA). Por encima de ~40-50 °C, la mayoría de las dos hebras de siRNA comenzarán a disociarse en sus constituyentes monocatenarios sentido y antisentido individuales. Con un ensayo de LC no desnaturalizante desarrollado adecuadamente, es posible evaluar la formación de doble hebra y cuantificar la presencia de impurezas excesivas de ARN monocatenario no hibridado (ssRNA). El patrón para LC-MS de siRNA de Waters se puede usar fácilmente para desarrollar y cualificar estos ensayos.
