下表總結前述的各種SPE模式:
逆相層析 |
正相 |
離子交換 |
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分析物 |
中等極性到低極性 |
低極性到高極性/中性 |
帶電荷或可離子化 |
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分離機制 |
基於疏水性的分離 |
基於極性的分離 |
基於電荷的分離 |
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樣品基質 |
水溶液 |
非極性有機溶劑 |
水溶液/低離子強度 |
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調節/平衡SPE吸附劑 |
1. 用極性有機溶劑得到的溶劑化物 2. 水 |
非極性有機溶劑 |
低離子強度緩衝液 |
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初步洗滌步驟 |
水溶液/緩衝液 |
非極性有機溶劑 |
低離子強度緩衝液 |
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洗脫步驟 |
增加極性有機溶劑的含量 |
增加有機溶劑混合物的洗脫強度 |
更強的緩衝液 - 透過調節離子強度或pH值而中和電荷 |
AX [陰離子交換] |
CX [陽離子交換] |
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吸附劑官能基 |
C18、tC18、C8、tC2、CN、NH2、HLB、RDX、Rxn RP |
二氧化矽、氧化鋁、矽酸鎂、二元醇、CN、NH2 |
Accell Plus QMA、NH2、SAX、MAX、WAX |
Accell Plus CM、SCX、MCX、WCX、Rxn CX |
吸附劑表面極性 |
低至中等 |
高至中等 |
高 |
高 |
一般溶劑極性範圍 |
高至中等 |
低至中等 |
高 |
高 |
一般進樣溶劑 |
水,低強度緩衝液 |
己烷、氯仿、二氯甲烷 |
水,低強度緩衝液 |
水,低強度緩衝液 |
一般洗脫溶劑 |
CH3OH/水、CH3CN/水 |
乙酸乙酯、丙酮、CH3CN |
緩衝液、高離子強度的鹽,提高pH值 |
緩衝液、高離子強度的鹽,降低pH值 |
樣品洗脫順序 |
極性最強的樣品成分最先洗脫 |
極性最弱的樣品成分最先洗脫 |
游離程度最弱的樣品成分最先洗脫 |
游離程度最弱的樣品成分最先洗脫 |
為洗脫化合物所需的移動相溶劑變化 |
減弱溶劑極性 |
增強溶劑極性 |
增加離子強度或提高pH值 |
增加離子強度或降低pH值 |
這是對使用固相萃取[SPE]進行樣品富集與純化的簡單介紹。要開始使用SPE,您需要先處理相關分析物和/或基質,最好是先學習其他人是如何處理類似樣品的。waters.com的資源庫提供超過7,700條有關SPE使用方式的參考資料。請在下列搜尋字詞的空白處填入部分化合物或基質名稱:
“Sep-Pak” OR “Oasis” AND ______*
註:使用星號[*]加上根名稱可以避免拼寫錯誤,有助於找到最佳匹配的結果。同樣使用這個搜尋字串可以在Google Scholar找到更多參考資料[超過60,000條]。
J.C. Arsenault and P.D. McDonald, Beginners Guide to Liquid Chromatography, Waters [2007].
P.D. McDonald and E.S.P. Bouvier, A Sample Preparation Primer and Guide to Solid-Phase Extraction Methods Development, Waters [2001].
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U.D. Neue, P.D. McDonald, Topics in Solid-Phase Extraction.Part 1.Ion Suppression in LC-MS Analysis: A Review.Strategies for its elimination by well-designed, multidimensional solid-phase extraction [SPE] protocols and methods for its quantitative assessment [2005].