Guia para iniciantes em SPE

Resumo do desenvolvimento de métodos de SPE

Resumo do desenvolvimento de métodos de SPE

A tabela a seguir resume a discussão anterior sobre os modos de SPE:

Resumo da utilidade e prática dos principais modos de LC para extração em fase sólida (SPE, Solid-Phase Extraction)

Fase reversa

Fase normal

Troca iônica

Analito

Polaridade moderada a baixa

Polaridade baixa a alta/neutra

Carregado ou ionizável

Mecanismo de separação

Separação baseada na hidrofobicidade

Separação baseada na polaridade

Separação baseada na carga

Matriz de amostra

Aquoso

Solvente orgânico não polar

Aquoso/Força iônica baixa

Condicionar/Equilibrar sorvente de SPE

1. Solvatar com orgânico polar

2. Água

Orgânico não polar

Tampão de baixa força iônica

Etapa de lavagem preliminar

Aquoso/tampão

Orgânico não polar

Tampão de baixa força iônica

Etapas de eluição

Aumentar o conteúdo orgânico polar

Aumentar a força eluotrópica da mistura de solventes orgânicos

Tampões mais fortes — força iônica ou pH para neutralizar a carga

AX

(Troca de ânions)

CX

(Troca de cátions)

Funcionalidade do sorvente

C18, tC18, C8, tC2, CN, NH2, HLB, RDX, Rxn RP 

Sílica, Alumina, Florisil, Diol, CN, NH2

Accell Plus QMA, NH2, SAX, MAX, WAX

Accell Plus CM, SCX, MCX, WCX, Rxn CX 

Polaridade da superfície do sorvente

Baixa para média

Alta para média

Alta

Alta

Intervalo típico de polaridade de solvente

Alta para média

Baixa para média

Alta

Alta

Solvente de carregamento de amostra típico

Água, tampão de baixa força

Hexano, clorofórmio, cloreto de metileno

Água, tampão de baixa força

Água, tampão de baixa força

Solvente de eluição típico

CH3OH/água, CH3CN/água

Acetato de etila, acetona, CH3CN

Tampões, sais com alta força iônica, aumentar o pH

Tampões, sais com alta força iônica, diminuir o pH

Ordem de eluição da amostra

A maioria dos componentes polares da amostra primeiro

Componentes menos polares da amostra primeiro

O componente da amostra mais fracamente ionizado primeiro

O componente da amostra mais fracamente ionizado primeiro

Alteração de solvente de fase móvel necessária para eluir compostos

Diminuir a polaridade do solvente

Aumentar a polaridade do solvente

Aumentar a força iônica ou aumentar o pH

Aumentar a força iônica ou diminuir o pH

Esta foi uma breve introdução ao enriquecimento e purificação de amostras utilizando a extração em fase sólida (SPE, Solid-Phase Extraction). A melhor maneira de começar a utilizar a SPE é aprender primeiro o que outras pessoas fizeram com analitos e/ou matrizes semelhantes àquelas de seu interesse. Você encontrará mais de 7700 referências à utilização de SPE na Resource Library (Biblioteca de recursos) no site waters.com. Preencha o espaço em branco com um composto parcial ou nome de matriz na seguinte frase de pesquisa:
“Sep-Pak” OU “Oasis” E ______*

OBSERVAÇÃO: Em vez de arriscar cometer um erro de ortografia, acrescente um asterisco (*) com um nome raiz para obter melhores resultados. Utilizando essa mesma sequência de pesquisa, ainda mais referências (mais de 60000) podem ser encontradas no Google Scholar.

Leitura adicional:

J.C. Arsenault and P.D. McDonald, Beginners Guide to Liquid Chromatography (Guia para iniciantes em cromatografia líquida), Waters (2007).

P.D. McDonald and E.S.P. Bouvier, A Sample Preparation Primer and Guide to Solid-Phase Extraction Methods Development (Um primer e guia de preparo de amostras para desenvolvimento de métodos de extração em fase sólida), Waters (2001).

Waters, Purity by SPE (Pureza por SPE) (2008).

U.D. Neue, P.D. McDonald, Topics in Solid-Phase Extraction (Tópicos em extração em fase sólida). Parte 1. Ion Suppression in LC-MS Analysis: A Review. Strategies for its elimination by well-designed, multidimensional solid-phase extraction [SPE] protocols and methods for its quantitative assessment (Supressão de íons na análise por LC-MS: uma revisão. Estratégias para sua eliminação por meio de protocolos e métodos multidimensionais de extração em fase sólida [SPE, Solid-Phase Extraction] bem projetados para sua avaliação quantitativa) (2005).

Neste primer

Guia para iniciantes em SPE

SPE – Enriquecimento e purificação de amostras utilizando extração em fase sólida

Objetivos e benefícios da SPE

Desenvolvimento de métodos de SPE

Resumo do desenvolvimento de métodos de SPE

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