Fuente SYNAPT G2 MS/HDMS MALDI
Caracterización de compuestos por masa exacta inigualable
Los instrumentos de la serie SYNAPT G2 MS/HDMS™ instalados con un accesorio de fuente MALDI son una solución idónea para la caracterización de compuestos por masa exacta utilizando análisis MALDI-MS, MALDI-MS/MS y MALDI-MS/IMS/MS (serie SYNAPT G2 HDMS)
Fuente SYNAPT G2 MS/HDMS MALDI
Descripción general
La identificación de compuestos por espectrometría de masas puede estar limitada por la incompatibilidad de algunas moléculas con la ionización por electrospray. El instrumento MS/HDMS de la serie SYNAPT puede superar esta limitación al permitir acoplar una fuente MALDI de presión intermedia (IP) intercambiable que ofrece:
- Capacidad de ionización dual
- Aumento significativo del número de compuestos ionizados y analizados
- Compatibilidad con formatos de placas objetivo de 96/384 pocillos
- Análisis MS y MS/MS con alta resolución, sensibilidad y exactitud en la medición de masas
- Sistema láser de estado sólido de 2,5 KHz para instrumentos MALDI SYNAPT G2, G2-S y G2-Si
Además, la capacidad de separación por movilidad iónica de los instrumentos de la serie SYNAPT HDMS permite detectar componentes que eran invisibles en los análisis MALDI tradicionales y separar las especies de interés presentes en extractos biológicos complejos de los compuestos isobáricos coeluyentes, los iones de la matriz MALDI o las interferencias de fondo.
Cambio rápido
Todos los instrumentos cuentan con un sistema de acoplamiento motorizado único que permite el cambio rápido y fácil entre los modos de funcionamiento API y MALDI. Los usuarios intercambian fuentes quitando primero la fuente API y, a continuación, con una plataforma motorizada, levantan la fuente MALDI antes de fijarla en su posición. El proceso completo para cambiar de la adquisición de API a la adquisición de MALDI normalmente se puede lograr en dos horas.
Los datos de masa exacta de MALDI-MS/MS proporcionados por los instrumentos MS/HDMS de la serie SYNAPT proporcionan:
- Mejor identificación de proteínas y cobertura de secuencias de proteínas
- Caracterización de proteínas y PTM utilizando tecnología MALDI-MS y MS/MS de masa exacta
- Secuenciación de novo significativamente mejorada en comparación con las técnicas de decaimiento posterior a la fuente (PSD)
- Análisis sensible y exacto de polímeros, glicanos, moléculas pequeñas y oligonucleótidos
- Identificación y obtención de perfiles de metabolitos
- Descubrimiento de marcadores biológicos
- Imaging molecular
Los instrumentos de la serie MALDI SYNAPT G2 HDMS, con su capacidad adicional de separación por movilidad iónica, también ofrecen la posibilidad de realizar experimentos innovadores en nuevas áreas de investigación.
LC-MALDI
Las proteínas específicas de mezclas complejas que solo son ionizadas por MALDI también se pueden analizar realizando primero separaciones por cromatografía líquida y después análisis de MS.
Se lleva a cabo una separación por LC offline y se utiliza un dispositivo robótico para aplicar spots de las fracciones de LC que eluyen directamente sobre una placa objetivo MALDI. A continuación, se introduce la placa en el instrumento para el análisis MALDI.
Este procedimiento es particularmente eficaz para la identificación de proteínas mediante la obtención de huellas peptídicas de masas, donde se mezclan proteínas de baja abundancia y alta abundancia.
Con otros métodos tradicionales, las proteínas de baja abundancia no se detectan debido a los efectos de supresión de iones, las limitaciones del intervalo dinámico del instrumento y las interferencias de ruido químico.
Los análisis LC MALDI proporcionan:
-
Separación cromatográfica conservada espacialmente en la placa MALDI
-
Generación de datos LC-MS y LC-MS/MS offline de alta sensibilidad y sin interferencias por MALDI
-
Mapeo de masas de péptidos de proteínas de baja abundancia en mezclas que contienen proteínas de alta abundancia
MALDI MS Imaging
El accesorio de la fuente MALDI ofrece la posibilidad de realizar MALDI MS Imaging en sistemas MS/HDMS™ de la serie MALDI SYNAPT™ G2. Esto se puede ampliar para incluir nuevos estudios de movilidad iónica con MALDI y MS Imaging para los instrumentos de la serie SYNAPT G2 HDMS.
MALDI Imaging tiene el potencial de permitir la detección de proteínas mal plegadas en muestras de tejido y, por lo tanto, mejorar el conocimiento sobre diversas enfermedades humanas.
Las fuentes MS y HDMS de la serie MALDI G2 SYNAPT incluyen de serie un soporte para placas de microscopio que permite la introducción directa de placas de microscopio convencionales.
Además, los instrumentos de las series MALDI SYNAPT G2, MALDI SYNAPT G2-S y MALDI SYNAPT G2-Si están equipados de serie con un sistema láser de estado sólido de alta velocidad de repetición de 2,5 KHz, que ofrece tiempos de ablación reducidos para los experimentos de adquisición de MALDI Imaging. El tamaño medio de spot del láser se ha reducido a 60 µm en el diseño actual de la fuente MALDI.
Compatibilidad con instrumentos
La instalación de la fuente MALDI solo se recomienda para los siguientes instrumentos cuando ya están equipados con un analizador de cuadrupolo con un intervalo de masas de al menos 8000 uma. Sin embargo, hay algunas aplicaciones MALDI de moléculas pequeñas en las que un analizador de cuadrupolo de 4000 uma es satisfactorio. La fuente MALDI también se puede añadir a los instrumentos MS/HDMS de la serie SYNAPT G2 que ya están equipados con el analizador de cuadrupolos de rango de masas de 32 000 uma.
- SYNAPT G2 MS y SYNAPT G2 HDMS (láser de 2,5 KHz)
- SYNAPT G2-S MS y SYNAPT G2-S HDMS (láser de 2,5 KHz)
- SYNAPT G2-Si MS y SYNAPT G2-Si HDMS (láser de 2,5 KHz)
La conversión in situ de analizadores de cuadrupolo de 4000 uma a un intervalo de masas de 8000 uma también está disponible para todos los instrumentos de la serie SYNAPT.
Equipo e instalación
El conjunto de la fuente MALDI incluye un sistema de láser Nd:YAG de estado sólido de 2,5 KHz con introducción de muestras de doble eje, que proporciona un movimiento de acceso aleatorio completo a través de cada pocillo de muestra. El láser de alta velocidad de repetición ofrece un mayor rendimiento para el análisis de muestras junto con una excelente resolución espacial y una mayor productividad para los experimentos de MALDI Imaging.
Cuando se configura para el funcionamiento API, la fuente MALDI y el sistema de vacío se retraen por completo en la parte frontal de la nueva cubierta del instrumento.
Para el funcionamiento con MALDI, la nueva fuente se eleva desde su posición retraída utilizando una columna motorizada integrada, antes de fijarse al alojamiento de transferencia existente mediante un sistema de sujeción sin herramientas.
La fuente es compatible con todas las placas de muestras de Waters y admite la opción de incorporar pocillos de muestra de masa de referencia (lock mass) para mejorar la exactitud de la medición de masas. La fuente también es compatible con portaobjetos de vidrio para microscopio y placas objetivo de Applied Biosystems heredadas mediante el uso de un adaptador de placa.
La atenuación del láser controlable por el usuario se incluye junto con una óptica de visualización de gran aumento que muestra una imagen en tiempo real del pocillo de la muestra en la pantalla del PC del instrumento para fines de adquisición.
El conjunto completo de la fuente MALDI requiere que un ingeniero de servicio técnico de Waters lo instale.
Recursos
Documentos
Asistencia
Siguientes pasos
