Sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología 2D
Amplíe el rango dinámico de sus análisis con las separaciones en 2D.
Hasta hace poco, la LC en 2D se consideraba una técnica lenta y difícil de realizar. El sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología 2D ha optimizado el proceso de separación por LC en 2D mediante una configuración de métodos controlada por menús sumamente intuitiva, químicas de separación normalizadas y un funcionamiento inteligente de las válvulas.
El sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología 2D amplía el uso de partículas de menos de 2 micras para lograr separaciones de alta capacidad de picos de péptidos. Este innovador sistema utiliza eficazmente UPLC bidimensional (2D) para una mejor resolución cromatográfica de muestras proteómicas complejas mediante un enfoque de doble fase reversa (RP).
Sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología 2D
Especificaciones
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Presión máxima de funcionamiento |
15 000 psi |
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Intervalo de pH |
De 2 a 10 |
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Intervalo de caudal de operación |
De 200 nL/min a 100 µL/min sin división de flujo |
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Trayectoria del flujo de la muestra |
No ferroso |
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Volumen de inyección |
De 0,1 µL a 100,0 µL |
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Compartimento de muestras |
4-40 °C |
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Opciones de bomba |
Binaria |
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Seguimiento de la columna |
Ninguno |
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Capacidad de columnas |
Columna única, de 75 µm a 4,6 mm de diámetro interno (d. i.); hasta 250 mm de longitud |
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Capacidad máxima de muestras |
Hasta 21 placas (con el organizador de muestras) |
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Opciones de detectores |
Detector PDA Detector TUV Espectrómetros de masas |
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Control externo |
Software MassLynx |
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Especificaciones físicas (µBSM, µSM-FL, TVM) |
Ancho: 34,3 cm (13,5 pulg.) Altura: 69,7 cm (27,4 pulg.) Profundidad: 71,2 cm (28,0 pulg.) |
Descripción general
- La alta resolución en ambas dimensiones se produce aprovechando el amplio rango de estructura iónica e hidrofóbica de los péptidos.
- Mejor identificaciones, cuantificación y cobertura de secuencia de las proteínas.
- Separación mejorada, asistentes de generación de métodos y algoritmos de datos optimizados.
Uso recomendado: Para una mejor resolución cromatográfica de muestras proteómicas complejas.
Encabezado de características
Ampliar el impacto del 2D integral
La LC en 2D integral convencional utiliza intercambio iónico (IEX) seguido de fase reversa (RP). Cualquier método de IEX utilizará soluciones tampón que contengan sales que pueden causar un fondo de ionización y problemas de ensuciamiento si entran en un espectrómetro de masas (MS). Dado que las separaciones IEX se basan únicamente en la carga del péptido, la dimensión IEX a menudo da como resultado una resolución cromatográfica deficiente con péptidos que aparecen en varias fracciones, lo que dificulta la interpretación de los datos.
El enfoque 2D mejorado del sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología 2D utiliza RP a pH 10 en la primera dimensión, seguido de RP a pH 2 en la segunda dimensión, para obtener resultados que superan con creces los de las metodologías IEX convencionales.
Identificaciones seguras para lograr la mejor reproducibilidad de su clase
En función de la resolución de la LC en 2D del sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología 2D, el laboratorio puede ver un mayor número de identificaciones seguras, incluidas las identificaciones tanto reproducibles como incrementales de proteínas basadas en la LC en 2D. Esto da como resultado una mejor identificación, cuantificación y cobertura de secuencia de las proteínas.
Alta resolución en ambas dimensiones
El uso de IEX como primera dimensión de separación a menudo da como resultado una resolución deficiente y sangrado entre las fracciones. El uso de un soporte de alta resolución en el primer paso proporciona al laboratorio una mejor información en el último paso. Con el soporte de fase reversa a pH 10 seguido de una separación por debajo de 2 micras a pH más bajo con el sistema ACQUITY UPLC M-Class con tecnología 2D, se pueden obtener separaciones ortogonales útiles que producen datos de alta calidad.
Una mayor resolución equivale a mejores identificaciones de proteínas
En esta separación, esta digestión tríptica de E. coli demuestra la potencia de la LC en 2D integral para la resolución de muestras proteómicas complejas. Utilizando el sistema ACQUITY UPLC M-Class en una dimensión, se cargaron 0,5 µg en la columna para resolver e identificar 365 proteínas a partir de 2874 péptidos. La identificación de los péptidos 7661 y 9415 a partir de las separaciones del paso 5 y paso 10, respectivamente, se obtuvo mediante la adición de 2,5 µg al sistema LC en 2D, lo que dio como resultado una mayor cobertura de proteínas con una alta confianza en los resultados.
Con la LC en 2D y el sistema ACQUITY UPLC M-Class, los laboratorios pueden identificar el doble de proteínas de forma más segura, recuperar más péptidos y lograr una mayor cobertura de proteínas con una alta confianza en los resultados.
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