RapiZyme Trypsin, 질량분석(MS) 등급
빠르고, 깨끗하고, 완전한 단백질 분해를 제공합니다.
바이오의약품 펩타이드 매핑 또는 상향식 단백질체학 분석에서 단백질 분해는 긴 분해 시간과 복잡한 성능 트레이드오프가 어려움으로 작용합니다. 높은 재현성, 낮은 아티팩트, 완전한 서열 커버리지를 유지하는 동시에 속도와 완전한 분해의 균형을 맞추는 것 또한 지속적으로 해결해야 할 과제입니다. 또한 데이터 분석 중 다양한 비-트립신 피크(누락된 절단, 자가분해 피크, 비특이적 절단 및 불일치 피크)가 있는 복잡한 맵으로 인해 종종 생산성이 저하됩니다. 이러한 다수의 작고 예상치 못한 피크는 시간이 많이 걸리는 확인 작업을 필요로 하기 때문에 중요한 작업의 속도를 떨어트립니다.
RapiZyme Trypsin, 질량 분석(MS) 등급은 매우 높은 자가분해 저항성, 높은 순도, 개선된 활성화를 통해 빠른 속도와 확실한 분해 작업을 가능하게 합니다. 시중에 나와있는 고급 트립신에서도 문제를 일으키는 자가분해를 사실상 제거함으로써, RapiZyme Trypsin을 비교적 높은 농도로 사용하여 고온을 이용하거나 불완전한 분해를 수용할 필요 없이 분해 작업을 보다 빠르게 처리할 수 있습니다. 결과적으로 샘플 처리 시간, 실험실 운영을 개선하고, 무엇보다 가장 중요한 점으로, 중요한 의사 결정을 확신을 가지고 신속하게 내릴 수 있습니다.
사양
개요
- 자가분해 저항성이 있는 높은 효소:단백질(E:P) 비율을 사용하여 고온에 의존하지 않고 30분 내에 분해 작업을 효율적으로 완료
- 보다 명료한 바탕선을 통해 데이터를 보다 생산적인 분석 지원
- 높은 서열 커버리지로 확실한 특성화와 식별 가능
- 화학적으로 최적화된 재조합 발현 돼지 서열 트립신으로 재현성과 예측 가능성 달성
- LC-MS 호환 부형제로 동결건조하여 안정성, 바이알 회수율, 재용해 시 활성을 개선하여 일관된 성능 제공
- 다양한 워크플로 향상 프로토콜에서 견고성 및 유연성 제공
권장 용도: 바이오의약품 펩타이드 매핑 또는 상향식 단백질체학 분석에서 단백질 분해를 개선합니다.
RapiZyme의 작동 기전
RapiZyme Trypsin은 화학적으로 최적화된 재조합 트립신입니다. 이는 동물 유래가 아니기 때문에 키모트립신 오염이 없으며, L-(토실아마이드-2-페닐) 에틸클로로메틸케톤(TPCK) 억제제로 처리할 필요가 없고, 따라서 비특이적 분해 관련 문제가 해소됩니다.
빠른 분해
광범위하고 균일한 메틸화는 RapiZyme Trypsin에 매우 높은 자가분해 저항성을 제공합니다. 이를 통해 높은 E:P 비율(예: 1:5)로 RapiZyme Trypsin을 사용하여 고온에 의존하지 않고 단 30분 만에 완벽한 분해 작업을 수행할 수 있습니다. 사례 연구로 Remicade®를 사용했을 때 RapiZyme Trypsin은 <0.1%의 자가분해 피크와 <1%의 누락된 절단(총 TIC 반응의 %로 측정) 성능을 나타냅니다. 업계를 선도하는 경쟁 트립신은 동일한 조건에서 6-7%의 자가분해 피크와 4-5%의 누락된 절단을 제공합니다.
분명한 바탕선
맵에서 가장 작은 변경 사항을 인식하여 중요한 의사 결정이 내려집니다. 규제 기관은 모든 피크의 식별을 요구합니다. 불일치 피크, 아티팩트 피크, 자가분해 피크 및 누락된 절단 피크는 모두 시간 소모적이고 불필요한 노이즈입니다. 여기에 추가적인 과학적 검토와 분석이 필요하므로, 트립신 분해 자체의 가상 모델에 비트립신 피크 또는 자가분해 피크를 포함시키면 소프트웨어 처리 시간이 천정부지로 늘어납니다.
RapiZyme Trypsin을 사용하면 노이즈 및 아티팩트 피크가 없는 깔끔한 바탕선으로 빠르고 확신 있게 분석을 진행할 수 있습니다. 모든 분해는 30분 내에 처리됩니다.
재현성과 순도 – 사용 중인 트립신은 어떻습니까?
균일하게 메틸화된 재조합(동물 유래 아님) 트립신인 RapiZyme Trypsin은 키모트립신 오염이 없습니다. 또한 LC-MS 호환 부형제로 동결건조되어 재용해가 쉽고 예측 가능하며 바이알로부터의 회수율이 향상됩니다.
그 결과 배치 간, 분해 간 처리에서 모두 탁월한 재현성을 얻을 수 있습니다.
유연한 사용
RapiZyme Trypsin은 트립신(용액 또는 고정화 상태)을 사용하여 할 수 있을 것으로 예상되는 것 또는 그 이상을 할 수 있습니다. RapiZyme Trypsin을 사용하여 다음을 할 수 있습니다.
- 탈염을 제거하고 MAM, PTM 모니터링, 바이오공정 및 단백질체학 응용 분야의 일관성을 향상시킵니다. RapiZyme Trypsin은 적당한 양의 구아니딘 HCl로 높은 활성을 유지합니다
- 구아니딘 HCl을 0.5~0.7M으로 희석하고 1:5 효소:단백질 비율(pH 7.5)로 2시간 내에 분해합니다
- 분해 효율성을 저하시키지 않고 밤새 분해 작업을 우선으로 하는 경우 모든 응용 분야에 대한 아티팩트를 제어합니다
- 실온과 pH 6.5에서 1:100 효소:단백질 비율로 밤새 분해합니다
- 기존의 1:20 효소:단백질 비율 분해를 1-3시간으로 가속하여 추가적인 유연성을 확보합니다
- 열적으로 안정적인 RapiZyme을 사용하여 단백질을 보다 간편하고 쉽게 분해할 수 있도록 고정화된 효소를 가열하고 제거합니다
- 1:10 효소:단백질 비율로 70°C에서 1시간 동안 분해합니다