올리고뉴클레오타이드 및 핵산 표준물질

올리고뉴클레오타이드 특이적 유사체(Oligonucleotide Specific Analogs)

분석용 LC 기반 분석법은 합성 올리고뉴클레오타이드, mRNA, 벡터화된 도입 유전자(transgene)를 비롯한 유전자 치료제의 품질을 특성화 및 확인하기 위한 강력한 도구가 될 수 있습니다. 분석법의 적절한 구현을 위해서는 개발, 검증, 시스템 적합성 테스트를 거쳐야 합니다. 분석 물질과 화학적으로 유사한 고품질의 참조 물질을 갖추는 것은 큰 차이를 만들어 낼 수 있습니다.

저희가 제공하는 다양한 참조 표준물질 카탈로그에는 짧은 간섭 RNA(siRNA), 지질과 결합된 안티센스 올리고뉴클레오타이드(C16-ASO), ssDNA 20mer, ssDNA 길이 래더, 단일 가이드 RNA(sgRNA)가 포함되어 있습니다. 이러한 표준물질은 응용 분야별로 특화되어 분석법 개발, Intact 및 MS/MS 조각화(fragmentation), 시스템 적합성 테스트를 위해 즉시 주입 가능한 참조 물질로서 사용할 수 있습니다.

크로마토그래피 래더(Chromatographic Ladder)에 오르기

IPRP, HILIC, AEX 분석을 위해, 분리된 데이터를 15~35mer, 20~60mer, 20~100mer ssDNA 래더로 구분할 수 있습니다. 순도, 크기 변형, 실패 시퀀스(N/N-1) 뉴클레오타이드 변형, 백본 변형에 대한 분석 성능을 확인해 보세요. 펌프가 정확한 구배를 제공하는지 확인하고, 흡착 크로마토그래피 컬럼의 선택성을 확인하며, 크기를 기반으로 한 분리능을 보정합니다.

큰 핵산에 대한 SEC, AEX, RP의 활성화

핵산 치료제의 시퀀스 길이는 더 이상 짧아지지 않습니다. 더 큰 핵산 종을 다루기 위해 LC 분석법이 개선됨에 따라, 숙련도 및 시스템 적합성 테스트를 위해 새로운 표준물질이 필요합니다. dsDNA 50~1350bp 래더는 넓은 공극의 SEC 크로마토그래피를 통해 검증되었으며, 음이온 교환(AEX) 및 비변성 역상 크로마토그래피를 통해서도 쉽게 테스트할 수 있습니다. 17개의 이중 가닥 DNA(dsDNA) 성분은 크기 보정, 시스템 적합성, 분석법 문제 해결을 위한 기준점으로 사용할 수 있습니다.

추출 효율성의 확인

안티센스 올리고뉴클레오타이드(ASO)의 약물 대사 및 약동학(DMPK) 속성을 성공적으로 식별하기 위해서는, 강건성과 효율성을 충족하는 추출 절차를 수립해야 합니다. ASO에 결합된 지질은 다양한 조직을 표적으로 하여 전달성을 향상시키지만, 이러한 기능으로 인해 용해도에 제한이 생김은 물론 단백질에 대한 결합 수준이 극도로 높아져 생체 매트릭스로부터의 회수를 본질적으로 어렵게 하는 것이 입증된 바 있습니다. Waters가 제공하는 지질과 결합된 형태의 ASO LC-MS 표준물질은 C16 5' 부분과 결합되어 있으며, 2'-MOE 변형과 phosphorothioate 백본을 포함합니다. 변별력이 뛰어난 참조 물질로서 합성 올리고뉴클레오타이드 치료제의 회수율을 평가하는 데 사용할 수 있으며, OligoWorks SPE와 함께 제공되는 프로토콜과 같은 정량적 시료 전처리 절차의 개발을 향상시킬 수 있습니다.

이중 가닥 siRNA의 비변성 분석 확인

변성 및 비변성 조건 모두에서 siRNA를 분석함으로써 생성물과 관련된 불순물을 완전히 특성화할 수 있습니다. 변성 및 비변성 조건 모두에 IP-RP 및 HILIC 분석법을 쉽게 적용할 수 있으므로 짧은 간섭 RNA(siRNA)의 순도 측정 및 식별을 돕습니다. 약 40~50°C 이상에서, 대부분의 siRNA 이중 가닥은 개별적인 센스 및 안티센스 단일 가닥 성분으로 해리되기 시작합니다. 적합하게 개발된 비변성 LC 분석법을 사용하면 이중 가닥의 형성을 추적하고 불순물에 해당하는 과도한 비혼성화 단일 가닥 RNA(ssRNA)의 존재를 정량화할 수 있습니다. Waters의 siRNA LC-MS 표준물질은 이러한 분석법을 개발하고 Qualification을 수행하기 위해 손쉽게 사용할 수 있습니다.