ホスファチジン酸（PA）は最も単純な膜リン脂質クラスであり、リン脂質代謝およびグリセロ脂質代謝の中間代謝物としての重要な機能を果たします。PA は、その中間的機能により、生体膜中の存在量は少いですが、細胞内の生化学的および生理学的プロセスにおける極めて重要なシグナル伝達分子です1-2。 リゾホスファチジン酸（LPA）は、哺乳類の生殖器系での調節機能がある生合成プリカーサーです。ホスファチジルセリン（PS）は、細胞膜の重要な成分で、全リン脂質の 5 ～ 10% を占め、アポトーシス、脂質合成、輸送の調整で重要な役割を果たします。リゾホスファチジルセリン（LPS）は、炎症プロセスで重要な役割を果たすシグナル伝達リン脂質です1-2。PA と PS は 2 つの負電荷を持つ酸性脂質で、PA の場合はどちらの電荷もリン酸基にあり、PS の場合は、1 つの負電荷はリン酸基に、もう 1 つの負電荷はカルボキシル基にあります3。
最近 50 年間、ステンレススチールは構造材として高速液体クロマトグラフィー (HPLC) 装置およびカラムに最も一般的に使用されてきました。ただし、ステンレススチール製ハードウェアは、非特異的な吸着と結合により、一部の分析種のピーク形状と回収に悪影響を与える場合があります。これらの影響を示す脂質のクラスには、一般にリン酸基やカルボキシル基などの官能基が含まれており、それらが鉄やその他の遷移金属のイオンとキレート複合体を形成する場合があります。さまざまな生体組織の包括的な脂質分析は、構造、付いている官能基、極性、解離、イオン化挙動の異なる個々の脂質クラスが非常に複雑であるため、困難な作業となっています3。 リン酸化脂質およびカルボン酸型脂質（グリセロリン酸、グリセロホスホセリン、グリセロホスホイノシトール、グリセロホスホイノシトール １ リン酸、グリセロホスホイノシトール 2 リン酸、グリセロホスホイノシトール 3 リン酸、グリセロホスホグリセロール、リン酸化スフィンゴ脂質（セラミド-1-リン酸、スフィンゴイド塩基 1-リン酸など））は金属に吸着しやすく、クロマトグラフィーシステムの流路内に存在するステンレススチール表面に容易に吸着されます。このプロセスにより、ピーク形状の不良、回収率の低下、感度の低下につながることがあります。
リン酸化脂質と金属表面との相互作用を軽減する代替のアプローチは、移動相またはサンプルへのキレート剤の添加です。クエン酸、アセチルアセトン、メチルホスホン酸、メドロン酸などの揮発性キレート剤が LC-MS 分析に使用されています。ただし、キレート剤を使用すると、クロマトグラフィーの選択性と MS の感度に悪影響を及ぼす可能性があります。これらの課題に対処するため、UPLC 装置やカラムの金属基板への有機/無機ハイブリッドバリア表面の適用を詳しく検討しました。エチレン架橋シロキサンポリマーに基づくハイブリッド表面テクノロジーが、逆相（RP）および親水性相互作用クロマトグラフィー（HILIC）に適していることが分かりました。このアプリケーションノートの主な目的は、リン酸基とカルボキシル基を持つ脂質について、ハイブリッド表面テクノロジー（HST）を取り入れた ACQUITY Premier システムおよび ACQUITY Premier CSH C18 カラムのクロマトグラフィー性能を評価し、標準的なステンレススチール表面の ACQUITY UPLC I-Class および CSH C18 と比較することです。
