质谱(MS)级RapiZyme胰蛋白酶
实现快速、杂质少且完全的蛋白质酶解
生物制药肽图分析或自下而上蛋白质组学中的蛋白质酶解存在两项不足:酶解时间长,性能权衡复杂。在保持高重现性、低干扰和完整序列覆盖率的同时平衡速度和酶解完整性也是一个持续的挑战。此外,各种非胰蛋白酶峰(漏切、自溶峰、非特异性裂解和不匹配峰)的图较为杂乱,通常会减缓数据分析过程中的工作效率。这些意外的小峰数量众多,鉴定起来非常耗时,由此拖慢了关键工作的速度。
质谱(MS)级RapiZyme胰蛋白酶具有异常高的抗自溶性、高纯度且活性更强,可实现优异的速度和低酶解干扰。RapiZyme胰蛋白酶几乎消除了困扰市场上热门胰蛋白酶的自溶现象,可以在相对较高的浓度下使用,实现更快速的酶解,而无需采用高温或牺牲酶解完整性。因此,能缩短样品周转时间、提高实验室运营效率,并且最重要的是,助力可靠并快速地制定决策。
规格
概述
- 通过使用更高的抗自溶性酶:蛋白质(E:P)比率,无需高温即可实现30分钟高效酶解
- 通过更稳定的基线进行更高效的数据分析
- 获得高序列覆盖率,实现可靠的表征和鉴定
- 作为一种经过化学优化的重组表达的猪序列胰蛋白酶,获得出色的重现性和可预测性
- 通过使用与LC-MS兼容的辅料冻干,提高复溶后的稳定性、样品瓶回收率和活性,获得一致的性能
- 稳定而灵活,适用于各种工作流程优化方案
推荐用途:在生物制药肽图分析或自下而上蛋白质组学中改善蛋白质酶解。
RapiZyme工作原理
RapiZyme胰蛋白酶是一种经过化学优化的重组胰蛋白酶。因为它并非来自动物,因此不含污染性胰凝乳蛋白酶,无需使用L-(甲苯磺酰氨基-2-苯基)乙基氯甲基酮(TPCK)抑制剂进行处理,因此不存在非特异性酶解相关的问题。
快速酶解
广泛而均一的甲基化赋予RapiZyme胰蛋白酶异常高的抗自溶性。这使得RapiZyme胰蛋白酶能够以高E:P比(例如,1:5)使用,只需30分钟即可完成充分酶解,而无需借助更高温度。使用Remicade®作为案例研究,RapiZyme胰蛋白酶提供<0.1%的自溶峰和<1%的漏切(以总TIC响应的百分比来衡量)。业内出色的胰蛋白酶竞品在相同条件下提供6%–7%的自溶峰和4%–5%的漏切。
稳定的基线
通过识别图中的细微变化来制定关键决策。监管机构要求对每个峰进行鉴定。不匹配的峰、伪影峰、自溶峰和漏切峰都是耗时且不必要的噪音。需要对它们进行额外的科学审查和分析,当包括非胰蛋白酶峰或来自胰蛋白酶酶解本身的计算机模型的自溶峰时,软件处理时间激增。
借助RapiZyme胰蛋白酶,您可以快速、可靠地使用不含噪音和伪影峰的优异基线。所有这些均可通过30分钟酶解实现。
重现性和纯度 – 您的胰蛋白酶有哪些成分?
RapiZyme胰蛋白酶为均匀甲基化的重组(非动物源性)胰蛋白酶,不含污染性胰凝乳蛋白酶。此外,还使用与LC-MS兼容的辅料将其冻干,使复溶变得容易且可预测,并提高从瓶中转移的回收率。
结果在批次间和酶解间均具有出色的重现性。
使用灵活
RapiZyme胰蛋白酶可以实现任何胰蛋白酶(在溶液中或固定化)的用途,并且性能远远优于常规胰蛋白酶。借助RapiZyme胰蛋白酶,可以做到:
- 无需脱盐并提高MAM、PTM监测、生物加工和蛋白质组学应用的一致性。RapiZyme胰蛋白酶借助适量的盐酸胍保持高活性
- 将盐酸胍稀释至0.5–0.7M,并以1:5的酶:蛋白质比(pH 7.5)在2小时内完成酶解
- 对于任何应用(首选过夜酶解)都能控制伪影,而不影响酶解效率
- 可在室温和pH 6.5条件下以1:100的酶:蛋白质比酶解过夜
- 将传统的1:20酶:蛋白质比的酶解时间缩短至1–3小时,提供更高的灵活性
- 使用热稳定的RapiZyme加热,消除对固定化酶的需求,从而更简单轻松地酶解蛋白质
- 在70 °C下以1:10的酶:蛋白质比酶解1小时