采用2D技术的ACQUITY UPLC M-Class系统
利用2D分离扩展分析动态范围
直到最近,人们都认为2D-LC技术费时且操作麻烦。采用2D技术的ACQUITY UPLC M-Class系统采用直观易用的菜单导向式进行方法设置、标准化的色谱柱配置以及智能阀切换,有效简化了2D-LC分离过程。
采用2D技术的ACQUITY UPLC M-Class系统拓宽了亚2 μm颗粒的使用范围,可实现高峰容量的肽分离。这一创新的系统有效利用了二维(2D) UPLC,通过使用双反相(RP)方法提高复杂蛋白质组学分析样品的色谱分离度。
规格
操作压力上限 |
15,000 psi |
pH范围 |
2~10 |
操作流速范围 |
200 nL/min~100 µL/min,不分流 |
样品流路 |
非铁 |
进样体积 |
0.1 µL~100.0 µL |
样品室 |
4~40 °C |
泵选件 |
二元系统 |
色谱柱追踪 |
无 |
色谱柱容量 |
单根色谱柱,内径(ID)为75 µm至4.6 mm;柱长可达250 mm |
最大样品容量 |
最多21个样品板(配备样品组织管理器) |
检测器选项 |
PDA检测器 TUV检测器 质谱仪 |
外部控制 |
MassLynx软件 |
物理规格 (µBSM, µSM-FL, TVM) |
宽度:34.3 cm(13.5英寸) 高度:69.7 cm(27.4英寸) 深度:71.2 cm(28.0英寸) |
概述
- 利用肽类多样的离子结构和疏水性结构在两个维度都实现高分离度
- 更出色的蛋白质鉴定、定量分析能力和序列覆盖率
- 更好的分离效果、提供方法生成向导和更强大的数据算法
推荐用途:以更出色的色谱分离度分离复杂的蛋白质组学样品。
功能标题
扩大全二维色谱的影响
常规全二维液相色谱使用的是离子交换(IEX)和反相(RP)色谱。IEX方法都需要使用含盐的缓冲剂,而如果缓冲剂进入质谱仪(MS),可能会引起电离背景和污染问题。由于IEX分离仅基于肽类的电荷,IEX维度常常导致较差的色谱分离度,这时肽类会以多种馏分的形式出现,使数据解析变得非常困难。
采用2D技术的ACQUITY UPLC M-Class系统提供了一种经过改进的2D方法,通过在第一维度使用pH为10的RP,然后在第二维度使用pH为2的RP,得到了远远好于传统IEX方法的结果。
出众的重现性确保准确的鉴定结果
借助采用2D技术的ACQUITY UPLC M-Class系统,您的实验室可以在2D-LC分离度功能的支持下实现更多的准确鉴定,包括基于2D-LC的可重现的增量式蛋白质鉴定。由此得到更出色的蛋白质鉴定、定量分析能力和序列覆盖率。
在两个维度双双实现高分离度
使用IEX作为第一分离维度通常会导致分离度较差和馏分间的流失。在第一步使用高分离度技术支持,可确保在最后一步为您的实验室提供更丰富的信息。借助采用2D技术的ACQUITY UPLC M-Class系统,利用pH 10下的反相载体以及之后在较低pH下的亚2 μm分离,您可以获得有用的正交分离,得到高质量数据。
更高的分离度意味着更出色的蛋白质鉴定结果
在此分离中,通过分析大肠杆菌(E. coli.)的胰蛋白酶酶解物证实了全二维液相色谱分离复杂蛋白质组学样品的能力。通过在一个维度中使用ACQUITY UPLC M-Class系统,在色谱柱上进样0.5 µg样品进行分离,从而在2874种肽中鉴定出365种蛋白质。添加2.5 μg样品至2D-LC系统,分别通过5步和10步分离鉴定出7661种和9415种肽,得到更可靠的检测结果和更高的蛋白质覆盖率。
借助2D-LC和ACQUITY UPLC M-Class系统,实验室可以更准确地鉴定两倍之多的蛋白质,回收更多的肽,并实现更可靠的检测结果和更高的蛋白质覆盖率。