Solutions pour acides nucléiques

Solutions pour acides nucléiques

Grâce aux outils et techniques de Waters garantissant robustesse, conformité réglementaire et facilité de mise en œuvre, bénéficiez d’un éventail complet de mesures pour analyser la pureté, l’identité, le potentiel et l’innocuité des acides nucléiques à longue chaîne.

Grâce aux outils et techniques de Waters garantissant robustesse, conformité réglementaire et facilité de mise en œuvre, bénéficiez d’un éventail complet de mesures pour analyser la pureté, l’identité, le potentiel et l’innocuité des acides nucléiques à longue chaîne.

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Présentation

Les longs acides nucléiques / séquences transgéniques en thérapie cellulaire et thérapie génique présentent une longueur comprise entre 1 000 et plus de 10 000 nucléotides. La confirmation de leur identité et de leur pureté est essentielle pour garantir l’innocuité et l’efficacité de ces nouvelles modalités. Associés à la détection optique et/ou à la spectrométrie de masse, les systèmes et colonnes de chromatographie de Waters offrent de puissantes fonctions pour confirmer les propriétés physicochimiques de ces acides nucléiques et du médicament une fois ceux-ci encapsidés dans des nanoparticules lipidiques (NPL), des vecteurs viraux (p. ex. de type VAA) ou des pseudo-particules virales (PPV) servant à l’administration de cellules.


Applications

Afin de garantir la stabilité, l’efficacité et l’innocuité des thérapies cellulaires et géniques, il est essentiel de mesurer l’intégrité, l’hétérogénéité et la pureté des charges utiles d’acides nucléiques sous la forme d’ARNm, d’ADNsb ou d’ADNdb. La chromatographie combinée à la diffusion de lumière et/ou à la spectrométrie de masse est une technique puissante pour mesurer ces attributs de qualité critiques.

Afin de garantir la stabilité, l’efficacité et l’innocuité des thérapies cellulaires et géniques, il est essentiel de mesurer l’intégrité, l’hétérogénéité et la pureté des charges utiles d’acides nucléiques sous la forme d’ARNm, d’ADNsb ou d’ADNdb. La chromatographie combinée à la diffusion de lumière et/ou à la spectrométrie de masse est une technique puissante pour mesurer ces attributs de qualité critiques.


Notes d’application

Notes d’application

La concentration d’un produit thérapeutique à base d’acides nucléiques doit être déterminée avec exactitude pour pouvoir garantir le bon dosage et des résultats thérapeutiques constants sur les différents lots du médicament. Les séparations par chromatographie en phase inverse et par échange d’anions sont un moyen efficace d’y parvenir.

La concentration d’un produit thérapeutique à base d’acides nucléiques doit être déterminée avec exactitude pour pouvoir garantir le bon dosage et des résultats thérapeutiques constants sur les différents lots du médicament. Les séparations par chromatographie en phase inverse et par échange d’anions sont un moyen efficace d’y parvenir.


Notes d’application

Notes d’application

L’analyse de la coiffe en 5’, l’analyse de la queue poly-A en 3’ et la cartographie des oligonucléotides pour la confirmation de séquence et de modification sont essentielles pour vérifier l’intégrité, l’efficacité de la traduction et la stabilité de l’ARNm. Ces caractéristiques sont directement liées aux performances cliniques et à l’innocuité. Les solutions analytiques de pointe de Waters intègrent l’utilisation d’enzymes de digestion fidèles et des workflows logiciels de routine pour améliorer l’analyse de l’ARN et garantir une évaluation fiable et complète de l’ARNm.

L’analyse de la coiffe en 5’, l’analyse de la queue poly-A en 3’ et la cartographie des oligonucléotides pour la confirmation de séquence et de modification sont essentielles pour vérifier l’intégrité, l’efficacité de la traduction et la stabilité de l’ARNm. Ces caractéristiques sont directement liées aux performances cliniques et à l’innocuité. Les solutions analytiques de pointe de Waters intègrent l’utilisation d’enzymes de digestion fidèles et des workflows logiciels de routine pour améliorer l’analyse de l’ARN et garantir une évaluation fiable et complète de l’ARNm.


Notes d’application

Notes d’application

Les plasmides exprimés par recombinaison sont des matières premières essentielles aux réactions de production de VAA et de transcription in vitro (TIV) utilisées pour fabriquer des ARNm. Avant de passer aux étapes des bioprocédés en aval, il est primordial de vérifier la structure isomérique (linéaire, circulaire, surenroulée) et la pureté de ces matières.

Les plasmides exprimés par recombinaison sont des matières premières essentielles aux réactions de production de VAA et de transcription in vitro (TIV) utilisées pour fabriquer des ARNm. Avant de passer aux étapes des bioprocédés en aval, il est primordial de vérifier la structure isomérique (linéaire, circulaire, surenroulée) et la pureté de ces matières.


Notes d’application

Notes d’application


Webinaire à la demande : analyse par LC/MS des attributs CQA de produits thérapeutiques à base d’ARN

Dans ce webinaire, nous présentons des workflows analytiques pour l’analyse des attributs CQA d’ARN avec des données acquises sur notre plateforme waters_connect conforme aux exigences réglementaires. Les applications présentées comprennent la caractérisation aussi bien de molécules d’ARNsg (identité et fidélité structurelle) que de molécules d’ARNm (identité, fidélité structurelle, structure coiffe en 5’, queue poly-A en 3’).

Dans ce webinaire, nous présentons des workflows analytiques pour l’analyse des attributs CQA d’ARN avec des données acquises sur notre plateforme waters_connect conforme aux exigences réglementaires. Les applications présentées comprennent la caractérisation aussi bien de molécules d’ARNsg (identité et fidélité structurelle) que de molécules d’ARNm (identité, fidélité structurelle, structure coiffe en 5’, queue poly-A en 3’).


Arrière-plan du concept e-learning

Solutions


Les systèmes LC et LC/MS de Waters offrent des performances de séparation et une sensibilité de pointe pour l’analyse des acides nucléiques.

Adsorption ultra-faible pour une sensibilité et une reproductibilité maximales

Adsorption ultra-faible pour une sensibilité et une reproductibilité maximales

Les colonnes et les systèmes MaxPeak Premier éliminent le caractère imprévisible des pertes d’analytes en raison d’interactions métalliques, qui peuvent être particulièrement accentuées sur des acides nucléiques à charge négative.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Suivi efficace des attributs des produits à base d’ARN tout au long du développement et de la fabrication

Suivi efficace des attributs des produits à base d’ARN tout au long du développement et de la fabrication

Réalisez des analyses biopharmaceutiques par LC/MS de routine dans chaque laboratoire avec le système LC/MS BioAccord de Waters, qui allie la fiabilité des données en masse exacte et le logiciel waters_connect pour analyser des données et créer des rapports conformément aux exigences réglementaires.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Sequence and Modification Confirmation

Couverture haute résolution complète pour une caractérisation et un suivi fiables de l’ARN

Couverture haute résolution complète pour une caractérisation et un suivi fiables de l’ARN

Accélérez la caractérisation des acides nucléiques avec le système de paillasse haute performance HRMS Xevo G3 Q-Tof et transposez ces connaissances en tests de suivi efficaces, offrant des résultats qualitatifs et quantitatif exacts avec le partage des données sur les réseaux waters_connect.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Sequence and Modification Confirmation

Obtenez des informations sur la stabilité de vos acides nucléiques

Obtenez des informations sur la stabilité de vos acides nucléiques

Mesurez simultanément la taille, la masse moléculaire, la distribution et la morphologie en associant le détecteur flexible DAWN de Wyatt à des systèmes LC de Waters, dont le système Arc Premier, applicables aux acides nucléiques, aux NPL et aux protéines conjuguées.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Logiciel d’applications utilisable en réseau et conforme aux exigences réglementaires pour simplifier l’acquisition des données LC/MS, leur traitement et la création des rapports.

Workflows informatiques spécialement conçus pour l’analyse de l’ARN

Workflows informatiques spécialement conçus pour l’analyse de l’ARN

Accélérez le passage de l’analyse des échantillons à la prise de décision grâce aux applications MAP Sequence, CONFIRM Sequence et INTACT Mass conformes aux exigences réglementaires, afin de bénéficier d’une compréhension globale des produits à base d’acides nucléiques.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Sequence and Modification Confirmation

Colonnes et étalons analytiques offrant des performances de pointe en LC et LC/MS pour les acides nucléiques

Colonnes RPLC pour une résolution, une reproductibilité et une stabilité exceptionnelles

Colonnes RPLC pour une résolution, une reproductibilité et une stabilité exceptionnelles

Bénéficiez d’une résolution, d’une sensibilité et d’une stabilité exceptionnelles en phase inverse avec appariement d’ions (IP-RP) grâce aux colonnes RPLC MaxPeak Premier Oligonucleotide BEH C18 de Waters. La qualité de ces colonnes a été contrôlée avec des étalons d’oligonucléotides MassPREP de Waters afin de garantir une reproductibilité inter-échantillons permettant des séparations très rapides qui répondent aux exigences de haute cadence des laboratoires.

  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation

Colonnes SEC à larges ports inertes à rendement élevé

Colonnes SEC à larges ports inertes à rendement élevé

Grâce aux colonnes GTxResolve SEC 450 Å et 1 000 Å de Waters, garantissez la séparation intacte des acides nucléiques à longue chaîne, ce qui inclut les ARNm et le médicament. Elles vous permettent de séparer les molécules selon leur taille et leur forme en vue d’assurer l’intégrité et la pureté de l’ARNm et de garantir l’innocuité et l’efficacité des médicaments.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Sélectivités orthogonales et chromatographie sans appariement d’ions

Sélectivités orthogonales et chromatographie sans appariement d’ions

Bénéficiez de la sélectivité orthogonale et des options de LC sans appariement d’ions grâce aux colonnes GTx pour thérapies géniques de Waters. Parmi celles-ci figurent des colonnes à échange anionique faible ou fort et des colonnes BEH HILIC à liaison amide qui offrent une multitude de nouvelles méthodes.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Exécutez avec confiance des tests d’aptitude du système et de performances de référence

Exécutez avec confiance des tests d’aptitude du système et de performances de référence

Éliminez le besoin de préparer des mélanges complexes grâce aux étalons d’oligonucléotides et d’acides nucléiques préemballés et certifiés de Waters, qui offrent une facilité d’utilisation et une tranquillité d’esprit lorsque vous exécutez d’importants tests par séparation ou en résolvez les problèmes.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Digestion de l’ARN avec des spécificités de clivage uniques

Digestion de l’ARN avec des spécificités de clivage uniques

Bénéficiez d’une couverture de séquences 3 fois supérieure et des produits de digestion d’ARN plus long avec des masses uniques pour l’analyse LC/MS. Les RNases RapiZyme présentent des propriétés de clivage complémentaires et des produits de digestion qui se chevauchent, ce qui permet des identifications plus fiables.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

 La réussite à portée de clic

 La réussite à portée de clic

Optimisez la productivité et le succès de votre laboratoire avec Waters Global Services, pour maintenir une performance optimale des systèmes, minimiser les temps d’immobilisation, prendre en charge les applications les plus complexes et répondre aux strictes exigences de conformité.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Rendez la science plus accessible grâce à Waters Capital

Rendez la science plus accessible grâce à Waters Capital

Maximisez les ressources et minimisez les risques grâce aux options de paiement proposées par Waters Capital, notamment la mise à niveau des équipements vieillissants, une assistance personnalisée et le regroupement de l’ensemble de vos services en un seul forfait mensuel.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Les données parlent d’elles-mêmes

Les données parlent d’elles-mêmes
Séparation d’un étalon d’oligonucléotides d’ARN de synthèse oligo(A) de 100 nt (chromatogramme noir), d’ARNm de l’EPO digéré par la RNase T1 (chromatogramme bleu) et d’ARNm de la Fluc-bêta digéré par la RNase T1 (chromatogramme rouge) par LC IP-RP à l’aide d’une colonne ACQUITY Premier Oligonucleotide BEH 300 Å 1,7 µm. Le pic le plus abondant au sein de la série de pics concernant la queue poly(A) d’ARNm de l’EPO correspond à une espèce de 124 nt de long. Le pic le plus abondant au sein du groupe de pics concernant la queue poly(A) d’ARNm de la Fluc-bêta correspond à une espèce de 128 nt de long.
Effet de la température sur le profil chromatographique (sélectivité) et la contamination croisée. Colonne : colonne Gen-Pak FAX 100 x 4,6 mm, 2,5 µm, phase mobile A : TRIS 25 mM, pH= 7,6, phase mobile B : TRIS 25 mM, pH 7,6 + 2 M de NaBr, F=0,6 mL/min, gradient : 12-35 % de B en 15 min (gradient en pente douce), tampon de solvant modulateur : phase mobile B. Injection d’encadrement : 1 µL de pré-tampon de modulateur + 2 µL d’échantillon + 1 µL de post-tampon de modulateur. Température : ambiante (à gauche), 35 °C (au milieu) et 45 °C (à droite).
(A) Les produits de digestion aux positions 623 à 631 (ACAUCCUCGp) et 551 à 559 (UCACCAUCGp) sont prédits et attribués au même pic de temps de rétention dans le courant ionique total selon Gaye et al. Il est impossible de déterminer la bonne attribution avec des informations de masse intacte. (B) Les données MSE d’une même injection peuvent être utilisées pour élucider la séquence correcte pour cette attribution. Grâce à l’application waters_connect CONFIRM Sequence, les ions fragments à haute énergie sont prédits pour chaque séquence et mis en correspondance avec les groupes d’isotopes des données brutes intégrées via un algorithme spécialement conçu. Le logiciel présente les ions fragments confirmés sur une carte de points, ce qui permet d’évaluer rapidement la couverture des séquences.
Effet du pH et de la température sur la séparation des isoformes plasmidiques du ΦX174.

Webinaires et ressources


  • Brochure

Suivi en routine des attributs de l’ARN : identification des décisions pour une qualité de produits constante

Suivi en routine des attributs de l’ARN : identification des décisions pour une qualité de produits constante
  • eBook

eBook : Caractérisation des consommables d’ARNm NPL

eBook : Caractérisation des consommables d’ARNm NPL
  • Poster

Caractérisation d’un ARNm intact à l’aide d’une spectrométrie de masse par temps de vol en phase inverse avec appariement d’ions, d’une chromatographie d’exclusion stérique par diffusion de lumière multi-angle et d’une spectrométrie de masse à détection de charge

Caractérisation d’un ARNm intact à l’aide d’une spectrométrie de masse par temps de vol en phase inverse avec appariement d’ions, d’une chromatographie d’exclusion stérique par diffusion de lumière multi-angle et d’une spectrométrie de masse à détection de charge
  • Séminaire en ligne

LC/MS pour produits thérapeutiques à base d’ARN permettant de garantir la qualité du produit et la constance du procédé

LC/MS pour produits thérapeutiques à base d’ARN permettant de garantir la qualité du produit et la constance du procédé
  • Séminaire en ligne

Accédez à des informations CQA exceptionnelles pour l’ARNm, les NPL et les vecteurs viraux grâce aux techniques SEC et MALS recourant aux nouvelles colonnes avec particules à pores ultra-larges de 1 000 Å

Accédez à des informations CQA exceptionnelles pour l’ARNm, les NPL et les vecteurs viraux grâce aux techniques SEC et MALS recourant aux nouvelles colonnes avec particules à pores ultra-larges de 1 000 Å
  • Séminaire en ligne

Nouvelles informations sur l’échange d’anions et l’exclusion stérique des acides nucléiques

Nouvelles informations sur l’échange d’anions et l’exclusion stérique des acides nucléiques
  • Infographie

Workflows de suivi des attributs pour les thérapies à base d’acides nucléiques

Workflows de suivi des attributs pour les thérapies à base d’acides nucléiques


Découvrez-en davantage sur les solutions pour acides nucléiques.

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