ACQUITY UPLC M-Class System mit 2D-Technologie
Erweitern Sie den dynamischen Bereich Ihrer Analyse mit 2D-Trennungen
Bis vor kurzem wurde die 2D-LC als eine zeitaufwendige und schwierig einzusetzende Technik angesehen. Mit dem ACQUITY UPLC M-Class-System mit 2D-Technologie gelingen 2D-LC-Trennungen jetzt mit einer extrem intuitiven, menügesteuerten Methodenetablierung, standardisierten Trennchemiearten und einer intelligenten Ventilsteuerung.
Das ACQUITY UPLC M-Class System mit 2D-Technologie erweitert den Einsatz von Sub-2-Mikron-Partikeln, um Trennungen von Peptiden mit hoher Peakkapazität zu erreichen. Dieses innovative System verwendet effektiv zweidimensionale (2D) UPLC für eine bessere chromatographische Auflösung von komplexen proteomischen Proben durch Verwendung eines dualen Umkehrphasen-Ansatzes (RP).
ACQUITY UPLC M-Class System mit 2D-Technologie
Technische Daten
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Maximaler Betriebsdruck |
1034 bar (15.000 psi) |
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pH-Bereich |
2 bis 10 |
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Bereich der Flussrate für den Betrieb |
200 nL/min bis 100 μL/min ohne Flussaufteilung |
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Flussweg der Probe |
Nicht eisenhaltig |
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Injektionsvolumen |
0,1 bis 100,0 µL |
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Probenraum |
4 – 40 ˚C |
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Pumpenoptionen |
Binär |
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Nachverfolgen des Säulengebrauchs |
Keine |
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Säulenkapazität |
Einzelsäule, 75 µm bis 4,6 mm Innendurchmesser (ID); bis zu 250 mm lang |
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Maximale Probenkapazität |
Bis zu 21 Platten (mit Sample Organizer) |
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Detektoroptionen |
PDA-Detektor TUV-Detektor Massenspektrometer |
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Externe Steuerung |
MassLynx Software |
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Abmessungen und Gewicht (µBSM, µSM-FL, TVM) |
Breite: 34,3 cm (13,5 Zoll) Höhe: 69,7 cm (27,4 Zoll) Tiefe: 71,2 cm (28,0 Zoll) |
Überblick
- Hohe Auflösung in beiden Dimensionen durch Nutzung der breiten ionischen und hydrophoben Struktur der Peptide
- Bessere Identifizierung, Quantifizierung und Sequenzabdeckung von Proteinen
- Verbesserte Trennung, verbesserte Assistenten zur Methodenerstellung und verbesserte Datenalgorithmen
Empfohlene Verwendung: Für eine bessere chromatographische Auflösung von komplexen proteomischen Proben.
Features Header
Erweiterung der Wirkung von umfassendem 2D
Bei der konventionellen, umfassenden 2D-LC wird ein Ionenaustausch (IEX) mit anschließender Umkehrphase (RP) verwendet. Bei jedem IEX-Ansatz werden salzhaltige Puffer verwendet, die einen Ionisierungshintergrund und Verschmutzungsprobleme verursachen können, wenn sie in ein Massenspektrometer (MS) gelangen. Da IEX-Trennungen ausschließlich auf der Ladung des Peptids basieren, führt die IEX-Dimension häufig zu einer schlechten chromatographischen Auflösung, wobei die Peptide in mehreren Fraktionen erscheinen, was die Dateninterpretation erschwert.
Der verbesserte 2D-Ansatz des ACQUITY UPLC M-Class Systems mit 2D-Technologie verwendet die RP bei pH 10 in der ersten Dimension, gefolgt von der RP bei pH 2 in der zweiten Dimension – für Ergebnisse, die die Ergebnisse herkömmlicher IEX-Methoden weit übertreffen.
Sichere Identifizierungen für beste Reproduzierbarkeit
Dank der 2D-LC-Auflösung des ACQUITY UPLC M-Class Systems mit 2D-Technologie kann Ihr Labor eine höhere Anzahl sicherer Identifizierungen verzeichnen, einschließlich reproduzierbarer und inkrementeller Identifizierungen von Proteinen auf der Basis von 2D-LC. Dies führt zu einer besseren Proteinidentifizierung, Quantifizierung und Sequenzabdeckung.
Hohe Auflösung in beiden Dimensionen
Die Verwendung von IEX als erste Trenndimension führt häufig zu einer schlechten Auflösung und einem Bluten zwischen den Fraktionen. Wenn Sie im ersten Schritt einen hochauflösenden Träger verwenden, erhält Ihr Labor im letzten Schritt bessere Informationen. Mit dem Umkehrphasenträger bei pH 10, gefolgt von einer Sub-2-Mikron-Trennung bei niedrigerem pH-Wert mit dem ACQUITY UPLC M-Class System mit 2D-Technologie, können Sie nützliche, orthogonale Trennungen erhalten, die hochwertige Daten liefern.
Eine höhere Auflösung bedeutet bessere Proteinidentifizierungen
Bei dieser Trennung wird die Leistungsfähigkeit der umfassenden 2D-LC für die Auflösung komplexer proteomischer Proben anhand dieses tryptischen Verdaus von E. coli demonstriert. Unter Verwendung des ACQUITY UPLC M-Class Systems in einer Dimension wurden 0,5 µg auf die Säule geladen, um 365 Proteine aus 2874 Peptiden aufzulösen und zu identifizieren. Die Identifizierung von 7661 bzw. 9415 Peptiden aus den 5-stufigen bzw. 10-stufigen Trennungen wurde durch die Zugabe von 2,5 µg zum 2D-LC-System erreicht, was zu einer größeren Proteinabdeckung mit hoher Zuverlässigkeit der Ergebnisse führte.
Mit 2D-LC und dem ACQUITY UPLC M-Class System können Labore doppelt so viele Proteine sicherer identifizieren, mehr Peptide zurückgewinnen und eine größere Proteinabdeckung bei hoher Zuverlässigkeit der Ergebnisse erzielen.
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