Trypsine RapiZyme de qualité MS
Digestion rapide, propre et complète des protéines
Les digestions de protéines pour la protéomique ascendante ou l’établissement de cartes peptidiques en biopharmacie sont entravées par des temps de digestion longs et des compromis complexes en matière de performances. L’équilibre entre la vitesse et l’exhaustivité de la digestion, tout en maintenant une reproductibilité élevée, de faibles artéfacts et une couverture de séquence complète, représente également un défi constant. Qui plus est, la productivité au cours de l’analyse des données est souvent perturbée par des cartes désordonnées avec différents pics non tryptiques (clivages manqués, pics d’autolyse, clivages non spécifiques et pics sans correspondance). Ces nombreux petits pics inattendus impliquent une identification chronophage, ce qui ralentit votre travail essentiel.
La trypsine RapiZyme de qualité MS (spectrométrie de masse) permet une vitesse et une propreté de digestion sans compromis grâce à sa résistance extrême à l’autolyse, sa pureté élevée et son activité plus efficace. Comme elle élimine pratiquement l’autolyse qui affecte même la trypsine la plus avancée du marché, la trypsine RapiZyme peut être utilisée à des concentrations relativement élevées pour accélérer les digestions sans avoir recours à des températures élevées ni compromettre l’achèvement de la digestion. Ainsi, elle améliore le temps de traitement des échantillons, les opérations de laboratoire et, plus important encore, elle permet de prendre des décisions critiques rapidement et toute confiance.
Trypsine RapiZyme de qualité MS
Spécifications
Présentation
- Réalisez des digestions efficaces en 30 minutes sans recourir à des températures élevées en permettant l’utilisation de rapports enzyme:protéine (E:P) plus élevés qui résistent à l’autolyse.
- Analysez plus efficacement les données grâce à des lignes de base plus nettes.
- Bénéficiez d’une couverture de séquence élevée pour une caractérisation et une identification fiables.
- Obtenez la reproductibilité et la prévisibilité permises par la trypsine de séquence porcine exprimée par recombinaison chimiquement optimisée.
- Améliorez la stabilité, le rendement des flacons et l’activité lors de la reconstitution pour disposer de performances constantes en lyophilisant avec un excipient compatible LC/MS.
- Bénéficiez d’un produit robuste et flexible pour une utilisation dans de nombreux protocoles améliorant les workflows.
Utilisation recommandée : pour obtenir une meilleure digestion des protéines pour la protéomique ascendante et l’établissement de cartes peptidiques en biopharmacie.
Fonctionnement de la RapiZyme
La trypsine RapiZyme est une trypsine recombinante chimiquement optimisée. Comme elle n’est pas d’origine animale, elle ne contient pas de chymotrypsine contaminante, ne nécessite aucun traitement par des inhibiteurs de L-(tosylamido-2-phényl)éthyle chlorométhylcétone (TPCK) et ne pose donc aucun problème lié à la digestion non spécifique.
Digestions rapides
Une méthylation étendue et homogène confère à la trypsine RapiZyme une résistance extrêmement élevée à l’autolyse. Cela permet d’utiliser la trypsine RapiZyme pour des rapports E:P élevés (par exemple, 1:5) afin d’achever des digestions en 30 minutes seulement, sans avoir recours à des températures plus élevées. En utilisant Remicade® comme étude de cas, la trypsine RapiZyme délivre moins de 0,1 % de pics d’autolyse et moins de 1 % de clivages manqués (mesurés sous forme de % de la réponse totale du TIC). Une trypsine concurrente phare produit 6 à 7 % de pics d’autolyse et 4 à 5 % de clivages manqués dans les mêmes conditions.
Des lignes de base propres
Les décisions critiques sont prises en toute connaissance des plus petits changements sur une carte. Les autorités de réglementation exigent l’identification de chaque pic. Les pics sans correspondance, les pics d’artéfacts, les pics d’autolyse et les pics de clivage manqués sont tous des bruits chronophages et inutiles. Ils nécessitent un examen et une analyse scientifiques supplémentaires, ce qui augmente considérablement les temps de traitement des logiciels lorsque des pics non tryptiques ou des pics d’autolyse issus d’un modèle in silico de digestion trypsique sont inclus.
La trypsine RapiZyme vous permet de procéder rapidement et en toute confiance avec des lignes de base sans bruit ni pics d’artéfact, le tout avec une digestion en 30 minutes.
Reproductibilité et pureté : que contient votre trypsine ?
La trypsine RapiZyme est une trypsine méthylée homogènement et recombinante (non dérivée d’un animal), exempte de chymotrypsine contaminante. De plus, elle est lyophilisée avec un excipient compatible LC/MS pour rendre sa reconstitution facile et prévisible, mais aussi améliorer son rendement depuis le flacon.
Il en résulte une reproductibilité exceptionnelle d’un lot à l’autre et d’une digestion à l’autre.
Utilisation flexible
La trypsine RapiZyme répond à toutes les attentes que vous pouvez avoir par rapport à une trypsine (en solution ou immobilisée), et bien plus encore. La trypsine RapiZyme vous permet de remplir les objectifs suivants :
- Éliminer le dessalement et améliorer la cohérence pour les applications de MAM, de suivi PTM, de biotraitement et de protéomique. La trypsine RapiZyme maintient une activité élevée avec de faibles quantités de chlorure de guanidinium.
- Diluer le chlorure de guanidinium à 0,5–0,7 M et obtenir une digestion en 2 heures avec un rapport enzyme:protéine à 1:5 (pH 7,5).
- Contrôler les artéfacts pour toute application privilégiant les digestions d’une nuit, sans compromettre l’efficacité de la digestion.
- Digestion d’une nuit avec un rapport enzyme:protéine à 1:100 à température ambiante et pour un pH de 6,5.
- Accélérer les digestions traditionnelles avec un rapport enzyme:protéine à 1:20 de 1 à 3 heures pour plus de flexibilité.
- Chauffer et éliminer le besoin d’enzymes immobilisées pour des protéines plus simples ou plus faciles à digérer, grâce à la RapiZyme thermiquement stable.
- Digestion avec un rapport enzyme:protéine à 1:10 pendant 1 heure à 70 °C.
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