Fonte SYNAPT G2 MS/HDMS MALDI
Caracterização garantida de massa exata de compostos
Os equipamentos da série SYNAPT G2 MS/HDMS™ instalados com um acessório de fonte de MALDI fornecem uma solução garantida para a caracterização de massa exata de compostos utilizando análises de MALDI-MS, MALDI-MS/MS e MALDI-MS/IMS/MS (série SYNAPT G2 HDMS).
Fonte SYNAPT G2 MS/HDMS MALDI
Visão geral
A identificação de compostos por Espectrometria de Massas pode ser limitada pela incompatibilidade de algumas moléculas com a ionização por electrospray. O equipamento de MS/HDMS da série SYNAPT pode superar essa limitação com a adição de uma oferta de fonte de MALDI de pressão intermediária (IP, Intermediate Pressure) intercambiável:
- Capacidade de ionização dupla
- Aumento significativo no número de compostos ionizados e analisados
- Compatível com formatos de placa de destino de 96/384 pontos
- Análise por MS e MS/MS com alta resolução, sensibilidade e exatidão de medição de massa
- Sistema de laser de estado sólido de 2,5 KHz para equipamentos de MALDI SYNAPT G2, G2-S e G2-Si
Além disso, a capacidade de separação por mobilidade iônica dos equipamentos da série SYNAPT HDMS permite que componentes anteriormente invisíveis para análises tradicionais por MALDI sejam revelados, possibilitando que espécies de interesse dentro de extratos biológicos complexos sejam separadas de compostos coeluentes isobáricos, íons da matriz de MALDI ou interferências de fundo.
Troca rápida
Todos os equipamentos contam com um sistema de engate motorizado exclusivo que permite a troca rápida e fácil entre os modos de operação API e MALDI. Os usuários trocam as fontes removendo primeiro a fonte de API e, em seguida, com um estágio motorizado, levantam a fonte de MALDI antes de prendê-la na posição. O processo completo para mudar de aquisição por API para aquisição por MALDI pode normalmente ser realizado em duas horas.
Os dados de massa exata obtidos por MALDI-MS/MS fornecidos pelos equipamentos de MS/HDMS da série SYNAPT proporcionam:
- Melhor identificação de proteínas e cobertura de sequência de proteínas
- Caracterização de proteínas e PTMs (Modificações pós-traducionais, Post-Translational Modifications) utilizando a tecnologia de massa exata por MALDI-MS e MS/MS
- Melhoria significativa do sequenciamento de novo comparado às técnicas de decaimento pós-fonte (PSD, Post-Source Decay)
- Análise sensível e exata de polímeros, glicanos, moléculas pequenas e oligonucleotídeos
- Identificação e criação de perfis de metabólitos
- Detecção de biomarcadores
- Imageamento molecular
Os equipamentos de MALDI da série SYNAPT G2 HDMS, com sua capacidade adicional de separação por mobilidade iônica, também oferecem a possibilidade de realizar experimentações inovadoras em novas áreas de pesquisa.
LC-MALDI
Proteínas específicas em misturas complexas que são ionizadas apenas por MALDI também podem ser acomodadas realizando primeiro separações por cromatografia líquida, seguidas por análises de MS.
Uma separação por LC off-line é realizada, e um dispositivo de localização robótico é utilizado para identificar as frações de LC de eluição diretamente em uma placa de destino de MALDI. Depois, isso é introduzido no equipamento para realização de análise por MALDI.
Esse procedimento é particularmente eficaz para identificação de proteínas utilizando perfil de massas de peptídeos, em que proteínas de baixa e alta abundância são misturadas.
Com outros métodos tradicionais, proteínas de baixa abundância não são detectadas devido a efeitos de supressão de íons, limitações de intervalo dinâmico de equipamentos e interferências de ruído químico.
As análises por LC-MALDI fornecem:
-
Separação cromatográfica preservada espacialmente na placa de destino de MALDI
-
Geração de dados de LC-MS e LC-MS/MS off-line de alta sensibilidade e livres de interferência por MALDI
-
Mapeamento de massa de peptídeos de proteínas de baixa abundância em misturas contendo proteínas de alta abundância
Imageamento por MALDI MS
O acessório da fonte de MALDI oferece a possibilidade de realizar imageamento por MALDI MS nos Sistemas de MALDI da série SYNAPT™ G2 MS/HDMS™. Isso pode ser ampliado ainda mais para incluir novos estudos de mobilidade iônica com imageamento por MALDI e MS para os equipamentos da série SYNAPT G2 HDMS.
O imageamento por MALDI tem o potencial de permitir que proteínas dobradas incorretamente em amostras de tecido sejam detectadas e, assim, melhorar a compreensão de várias doenças humanas.
As fontes de MALDI de MS e HDMS da série G2 SYNAPT incluem, como padrão, uma unidade de suporte para placas de microscópio que permite a introdução direta de placas de microscópio convencionais.
Além disso, um sistema de laser de estado sólido com alta taxa de repetição de 2,5 KHz vem como padrão nos equipamentos de MALDI das séries SYNAPT G2, SYNAPT G2-S e SYNAPT G2-Si, oferecendo tempos de ablação reduzidos para experimentos de imageamento por MALDI. O tamanho médio do ponto de laser foi reduzido para 60 µm no projeto atual da fonte de MALDI.
Compatibilidade com equipamentos
A instalação da fonte de MALDI é recomendada apenas para os seguintes equipamentos quando já instalados com pelo menos um analisador quadrupolo com uma faixa de massa de 8000 amu. No entanto, existem algumas aplicações de MALDI de moléculas pequenas em que um analisador quadrupolo de 4000 amu é satisfatório. A fonte de MALDI também pode ser incluída nos equipamentos de MS/HDMS da série SYNAPT G2 já instalados com o analisador quadrupolo com uma faixa de massa de 32000 amu.
- SYNAPT G2 MS e SYNAPT G2 HDMS (laser de 2,5 KHz)
- SYNAPT G2-S MS e SYNAPT G2-S HDMS (laser de 2,5 KHz)
- SYNAPT G2-Si MS e SYNAPT G2-Si HDMS (laser de 2,5 KHz)
A conversão on-site de analisadores quadrupolo de 4000 amu para a faixa de massa de 8000 amu também está disponível para todos os equipamentos da série SYNAPT.
Equipamento e instalação
A unidade da fonte de MALDI inclui um sistema de laser ND:YAG de estado sólido de 2,5 KHz com entrada de amostras de eixo duplo, proporcionando movimento de acesso totalmente aleatório em cada poço de amostra. O laser de alta taxa de repetição oferece maior rendimento de amostras, juntamente com excelente resolução espacial e produtividade aprimorada para experimentos de imageamento por MALDI.
Quando configurados para operação de API, a fonte de MALDI e o sistema de vácuo são totalmente retraídos para a parte frontal do novo compartimento do equipamento.
Para a operação de MALDI, a nova fonte é levantada de sua posição retraída utilizando uma coluna motorizada integrada, antes de ser presa ao alojamento de transferência existente por meio de um sistema de fixação sem ferramentas.
A fonte é compatível com todas as placas para amostras da Waters e aceita a opção de incorporar poços de amostra de massa de bloqueio para proporcionar maior exatidão na medição de massa. A fonte também é compatível com lâminas de microscópio de vidro e placas de destino da Applied Biosystems tradicionais por meio da utilização de um adaptador de placa.
A atenuação do laser controlável pelo usuário está incluída juntamente com a óptica de visualização de alta ampliação que exibe uma imagem em tempo real do poço de amostra na tela do PC do equipamento para fins de aquisição.
A unidade completa da fonte de MALDI exige que a instalação seja feita por um engenheiro de serviço de campo da Waters.
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