Tripsina RapiZyme de grau MS (Espectrometria de massas, Mass Spectrometry)
Obtenha uma digestão de proteínas rápida, limpa e completa
As digestões de proteínas para mapeamento de peptídeos biofarmacêuticos ou proteômica bottom-up são prejudicadas por longos tempos de digestão e complexas concessões de desempenho. Equilibrar a velocidade e a integridade da digestão enquanto mantém a alta reprodutibilidade, os artefatos baixos e a cobertura completa de sequência também é um desafio constante. Além disso, a produtividade durante a análise de dados é frequentemente prejudicada por mapas confusos com vários picos não trípticos (clivagens perdidas, picos de autólise, clivagens não específicas e picos não correspondentes). Esses numerosos picos pequenos e inesperados exigem uma identificação demorada, resultando no retardo de seu importante trabalho.
A Tripsina RapiZyme de grau MS (Espectrometria de massas, Mass Spectrometry) permite velocidade rígida e limpeza de digestão por meio de sua resistência à autólise excessivamente alta, alta pureza e atividade aprimorada. Ao praticamente eliminar a autólise que assola até mesmo a tripsina mais avançada disponível no mercado, a Tripsina RapiZyme pode ser utilizada em concentrações comparativamente altas para obter digestões mais rápidas sem recorrer a altas temperaturas ou sacrificar a completude da digestão. Consequentemente, isso melhora o tempo de análise de amostra, as operações do laboratório e, o mais importante, torna a tomada de decisões críticas mais segura e rápida.
Tripsina RapiZyme de grau MS (Espectrometria de massas, Mass Spectrometry)
Especificações
Visão geral
- Obtenha digestões eficientes em 30 minutos sem recorrer a altas temperaturas desbloqueando a utilização de relações de enzima:proteína (E:P) mais altas com resistência à autólise
- Realize análises de dados mais produtivas por meio de linhas de base mais limpas
- Obtenha uma alta cobertura de sequência para caracterização e identificação confiáveis
- Obtenha reprodutibilidade e previsibilidade como uma tripsina de sequência de suínos expressa de forma recombinante e quimicamente otimizada
- Melhore a estabilidade, a recuperação de vials e a atividade após a reconstituição para ter um desempenho consistente por meio da liofilização com um excipiente compatível com LC-MS
- Robusta e flexível para utilização em uma variedade de protocolos de aprimoramento de rotinas de trabalho
Utilização recomendada: Para obter melhores digestões de proteína para mapeamento de peptídeos biofarmacêuticos ou proteômica bottom-up.
Como a RapiZyme funciona
A RapiZyme é uma tripsina recombinante quimicamente otimizada. Como não é derivada de animais, ela é livre de quimotripsina contaminante, não requer tratamento com inibidores de L-(tosilamida-2-fenil)etil clorometil cetona (TPCK, Tosylamide-2-Phenylethyl-Chloromethyl Ketone) e, por isso, está livre de desafios associados à digestão não específica.
Digestões rápidas
A metilação extensa e homogênea confere à Tripsina RapiZyme uma resistência à autólise excessivamente alta. Isso permite a utilização da Tripsina RapiZyme em altas relações de E:P (por exemplo, 1:5) para conduzir digestões completas em apenas 30 minutos, sem recorrer a temperaturas mais altas. Utilizando o Remicade® como estudo de caso, a Tripsina RapiZyme fornece picos de autólise < 0,1% e clivagem perdida < 1% (medidos como % da resposta total de TIC). Uma tripsina de um concorrente líder do setor fornece picos de autólise de 6 a 7% e clivagem perdida de 4 a 5% nas mesmas condições.
Linhas de base limpas
Decisões críticas são tomadas por meio da identificação das menores alterações em um mapa. As agências reguladoras exigem a identificação de cada pico. Picos incomparáveis, picos de artefatos, picos de autólise e picos de clivagem perdida consomem tempo e são ruídos desnecessários. Eles exigem revisão e análise científicas adicionais, fazendo com que os tempos de processamento de software disparem quando picos não trípticos ou picos de autólise de um modelo in-silico da própria digestão de tripsina são incluídos.
Com a Tripsina RapiZyme, é possível prosseguir com rapidez e confiança com linhas de base perfeitas sem ruídos e picos de artefatos. Tudo com uma digestão de 30 minutos.
Reprodutibilidade e pureza — o que sua tripsina tem?
A RapiZyme, uma tripsina recombinante (não derivada de animais) metilada homogeneamente, está livre de quimotripsina contaminante. Além disso, ela é liofilizada com um excipiente compatível com LC-MS para tornar a reconstituição fácil e previsível e melhorar a recuperação do vial.
O resultado é uma reprodutibilidade excepcional, tanto entre lotes quanto entre digestões.
Flexibilidade para utilizar
A Tripsina RapiZyme pode fazer tudo o que você espera que qualquer tripsina (em solução ou imobilizada) faça e muito mais. Com a Tripsina RapiZyme, é possível:
- Eliminar dessalinização e melhorar a consistência para aplicações de MAM (Monitoramento de vários atributos, Multi Attribute Monitoring), PTM (Monitoramento de modificações pós-traducionais, Post-Translational Modifications), bioprocessamento e proteômica. A Tripsina RapiZyme mantém alta atividade com quantidades modestas de guanidina HCI
- Diluir a guanidina HCl em 0,5–0,7 M e fazer a digestão em 2 horas a uma relação enzima:proteína de 1:5 (pH 7,5)
- Controlar artefatos para qualquer aplicação quando digestões noturnas são desejadas sem comprometer a eficiência da digestão
- Fazer digestões durante a noite com uma relação enzima:proteína de 1:100 em temperatura ambiente e pH 6,5
- Acelerar as digestões tradicionais de relação enzima:proteína de 1:20 para 1 a 3 horas para proporcionar flexibilidade extra
- Aquecer e eliminar a necessidade de enzimas imobilizadas para obter proteínas mais simples ou mais fáceis de digerir com a RapiZyme termicamente estável
- Fazer digestões com uma relação enzima:proteína de 1:10 por 1 hora a 70 °C
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