RapiZyme Trypsin, Massenspektrometrie(MS)-Qualität
Für einen schnellen, sauberen und vollständigen Proteinverdau
Proteinverdaus für biopharmazeutische Peptidkartierungen oder Bottom-up-Proteomik gehen mit langen Wartezeiten und komplexen Leistungsabwägungen einher. Auch müssen Geschwindigkeit und Vollständigkeit bei gleichzeitig hoher Reproduzierbarkeit, wenig Artefakten und vollständiger Sequenzabdeckung gewährleistet sein. Darüber hinaus wird die Produktivität der Datenanalyse häufig durch unübersichtliche Karten mit vielen nicht-tryptischen Peaks (fehlende Spaltungen, Autolysepeaks, unspezifische Spaltungen und nicht übereinstimmende Peaks) beeinträchtigt. Diese zahlreichen kleinen unerwarteten Peaks müssen aufwendig identifiziert werden – Zeit, die für wichtigere Dinge fehlt.
RapiZyme Trypsin in Massenspektrometrie-Qualität ermöglicht kompromisslose Geschwindigkeit und Reinheit des Verdaus durch seine ungewöhnlich hohe Autolysebeständigkeit, die hohe Reinheit und verbesserte Aktivität. Die Autolyse, die auch bei den fortschrittlichsten Trypsinen auf dem Markt auftritt, wird praktisch eliminiert. So kann RapiZyme Trypsin auch in hohen Konzentrationen verwendet werden und ermöglicht schnellere und vollständigere Verdaus bei niedrigeren Temperaturen. Das verbessert die Probendurchlaufzeit und den gesamten Laborbetrieb und erlaubt schnellere und fundiertere Entscheidungen.
RapiZyme Trypsin, Massenspektrometrie(MS)-Qualität
Technische Daten
Überblick
- Effizienter Verdau in 30 Minuten, ohne Temperaturerhöhung – durch höhere Enzym-/Protein-Verhältnisse und Autolysebeständigkeit
- Höhere Analyseproduktivität durch ruhigere Basislinien
- Hohe Sequenzabdeckung für zuverlässige Charakterisierung und Identifizierung
- Verbesserte Reproduzierbarkeit und Vorhersagbarkeit mit einem chemisch optimierten, rekombinantem porcinem Trypsin
- Lyophilisierung mit LC-MS-kompatiblem Hilfsstoff verbessert Stabilität, Vial-Entleerung und Rekonstitution für gleichbleibend hohe Leistung
- Robust und flexibel einsetzbar in einer Vielzahl von Protokollen für bessere Arbeitsabläufe
Empfohlene Verwendung: Für einen verbesserten Proteinverdau für biopharmazeutische Peptidkartierungen oder Bottom-up-Proteomik.
Wie RapiZyme funktioniert
RapiZyme Trypsin ist ein chemisch optimiertes rekombinantes Trypsin. Es ist nicht-tierischen Ursprungs und daher frei von kontaminierendem Chymotrypsin. Eine Behandlung mit L-(Tosylamido-2-phenyl)ethylchlormethylketon (TPCK)-Inhibitoren und somit unspezifische Verdauprobleme entfallen.
Schneller Verdau
Umfangreiche und homogene Methylierung verleiht RapiZyme Trypsin eine ungewöhnlich hohe Autolysebeständigkeit. Dies ermöglicht die Verwendung von RapiZyme Trypsin bei hohen E:P-Verhältnissen (z. B. 1:5) für vollständige Aufschlüsse in nur 30 Minuten, ohne die Temperatur erhöhen zu müssen. Bei der Analyse von Remicade® Trypsin liefert RapiZyme Trypsin < 0,1 % Autolysepaks und < 1 % fehlende Spaltungen (% des gesamten TIC-Signals). Das Trypsin eines branchenführenden Mitbewerbers liefert unter gleichen Bedingungen 6–7 % Autolysepeaks und 4–5 % fehlende Spaltungen.
Raschfreie Basislinie
Wichtige Entscheidungen werden oft auf Grundlage kleinster Veränderungen in einer Karte getroffen. Laut geltenden Vorschriften muss jeder einzelne Peak identifiziert werden. Nicht übereinstimmende Peaks, Artefakte, Autolyse und fehlende Spaltungen führen zu höherem Rauschen und mehr Arbeitsaufwand. Durch Nicht-Trypsin-Peaks oder Autolyse-Peaks aus einem In-silico-Modell werden weitere Überprüfungen und Analysen nötig, welche die Verarbeitungszeiten der Software erheblich verlängern.
Mit RapiZyme Trypsin gelangen Sie schnell und sicher zu rauschfreien Basislinien ohne Artefaktpeaks. Ein Verdau benötigt nur noch 30 Minuten.
Reproduzierbarkeit und Reinheit – was steckt in Ihrem Trypsin?
RapiZyme Trypsin, ein homogen methyliertes rekombinantes (nicht-tierisches) Trypsin ist frei von kontaminierendem Chymotrypsin. Es wird außerdem mit einem LC-MS-kompatiblen Hilfsstoff lyophilisiert. Das sorgt für eine einfache und vorhersehbare Rekonstitution und verbessert die Entleerung des Vials.
Das Ergebnis ist eine außergewöhnliche Reproduzierbarkeit sowohl von Batch zu Batch als auch von Verdau zu Verdau.
Flexibel verwendbar
RapiZyme Trypsin kann alles, was Sie von einem Trypsin (ob in Lösung oder immobilisiert) erwarten – und noch viel mehr. Mit RapiZyme Trypsin:
- Verzichten Sie auf das Entsalzen und stärken die Konsistenz Ihrer Applikationen in MAM- und PTM-Monitoring, Bioprocessing und Proteomik RapiZyme Trypsin behält mit geringen Mengen Guanidin-HCl eine hohe Aktivität
- Verdünnen Sie Guanidin-HCl auf 0,5–0,7 M und verdauen Sie es in 2 Stunden bei einem Enzym-Protein-Verhältnis von 1:5 (pH 7,5).
- Begrenzen Sie Artefaktbildung auch bei Übernacht-Verdaus ungeachtet der Applikation ohne Effizienzeinbußen
- Führen Sie Verdaus über Nacht mit einem Enzym-Protein-Verhältnis von 1:100 bei Raumtemperatur und einem pH-Wert von 6,5 durch
- Beschleunigen Sie für mehr Flexibilität traditionelle Verdaus mit einem Enzym-Protein-Verhältnis von 1:20 auf ein bis drei Stunden
- Erhöhen Sie die Temperatur und verzichten Sie auf immobilisierte Enzyme bei einfacher zu verdauenden Proteinen – dank RapiZymes thermischer Stabilität
- Führen Sie Verdaus mit einem Enzym-Protein-Verhältnis von 1:10 für eine Stunde bei 70 °C durch
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