二元泵与四元泵。梯度是如何产生的?


二元和四元泵

梯度是如何产生的?

任何液相色谱仪(LC)都是由一组特定的部件组成,向科学家提供他们正在分析的样品的专著。 传统上,一个液相色谱系统包括一个泵、一个进样器、一个柱子加热器、一个检测器,而现在更常见的是一个质谱仪(MS)或质量检测器。在我的上一篇博文中,我讨论了常见的光学和质量检测器之间的区别及其用途。

我想谈谈泵和一些设计上的细微差别,它们会影响你如何运行你的LC。

一堂快速的历史课

今天的液相色谱方法有两种不同的风格:等压或梯度。最初,所有的液相色谱方法都开始使用等压泵,因为第一批检测器(折射率,或RI)只能用于单一溶剂。但是随着紫外检测器的出现,分离方法转向梯度分析,以改善峰形,并减少样品的分析时间。因此,当科学家正在开发一种现代梯度液相色谱方法时,将利用两种风格的泵进行分析:二元或四元。

在我们深入解释每种类型的泵之前,这里有一些有趣的事实。Isocratic这个词起源于以下希腊语。

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二进制和四进制的拉丁语细分如下。

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二元泵的原理

二元泵中,我们一次只能将两种溶剂汇集在一起以形成梯度。 这是通过两个独立的泵来实现的,每个泵为一种特定的溶剂提供流量。 然后,这些溶剂在位于泵之后的混合室中结合。 这就创造了一个高压配比环境,因为溶剂在到达混合点之前就已经处于压力之下,在那里发生混合。

举个例子,假设我们有一个方法,以70:30的比例运行溶剂A和溶剂B。如果我们的流速是1.0毫升/分钟,泵将为溶剂A提供0.70毫升/分钟,为溶剂B提供0.30毫升/分钟(图1)。

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第四级泵的原理

一个四级泵有一个泵,用来向系统输送流动相。梯度是通过一个叫做比例阀的装置产生的。配比阀通过打开一个 "阀门 "来提供梯度(我打赌这让你大跌眼镜),并将一 "包 "溶剂送到泵头。 一旦这些溶剂包被送到泵里,柱塞就会将溶剂吸入泵头,并创造一个流动相混合的湍流环境。

因为在配比阀引入溶剂包时,流动相并不处于压力之下,所以四级泵通常被认为是低压配比的。一些系统会在泵后增加一个混合室,以便在向色谱柱输送梯度混合物之前进一步加强流动相的均匀化。

举个例子,假设一位科学家希望运行一种方法,以25:25:25:25的比例运行溶剂A、B、C和D。 配比阀将打开每种溶剂的阀门,向泵头输送同等大小的溶剂包。(图2)

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总结

梯度可以通过不同的方式创建和输送。 最初的明显观察是,四元泵系统提供了灵活性,允许科学家在同一时间利用和混合多达四(4)种不同的溶剂。 另一方面,二元系统在同一时间只能使用两(2)种不同的溶剂。 然而,这不仅仅是这种简单的评估。

Waters技术。