Quand la résolution de différences mineures dans la thérapeutique des protéines peut avoir un impact majeur

La collaboration avec des scientifiques de Pfizer en vue d'améliorer la séparation des AcM et des ADC débouche sur une nouvelle chimie de colonne.

Les anticorps monoclonaux (AcM) et les conjugués anticorps-médicaments (ADC) constituent la classe d'agents thérapeutiques dont la croissance est la plus rapide. Près de 50 produits liés aux AcM ont été approuvés par la Food and Drug Administration (FDA) des États-Unis et l'Agence européenne des médicaments (EMA) pour le traitement de maladies aussi diverses que le cancer, les maladies cardiovasculaires, neurologiques, auto-immunes et inflammatoires.

Contrairement aux médicaments à petites molécules, les anticorps monoclonaux (AcM) thérapeutiques sont de grandes biomolécules complexes, généralement produites dans des cellules de mammifères par la technologie de l'ADN recombinant.

Comme toutes les biomolécules et tous les produits biologiques produits dans des cellules vivantes, les AcM sont associés à un certain degré de variabilité d'un lot à l'autre en raison des différences entre les lignées cellulaires, des modifications post-traductionnelles pendant l'expression, etc. Un certain degré de microhétérogénéité est inhérent au processus de production des AcM et peut être toléré par les patients. Cependant, comme les sources de variabilité ont le potentiel d'affecter l'efficacité, la sécurité, l'immunogénicité, les profils pharmacocinétiques et pharmacodynamiques, la détection efficace et fiable des microhétérogénéités est d'une importance critique.

Pour des entreprises comme Pfizer, leader dans le domaine du développement des AcM et des ADC, une qualité élevée est essentielle pour la performance et l'intégrité des produits et, surtout, pour le maintien des normes les plus élevées en matière de sécurité des patients.

La chromatographie liquide en phase inversée (RPLC ) est une technique de séparation couramment utilisée pour caractériser les protéines thérapeutiques au cours de leur développement, en raison de son pouvoir de résolution élevé et de sa facilité de détection par spectrométrie de masse (MS). Toutefois, les colonnes RPLC actuelles présentent des limites de performance, notamment une dépendance à l'égard des températures de séparation élevées, qui peuvent dégrader les AcM, et la production de résultats potentiellement peu fiables en raison du manque de reproductibilité d'une colonne à l'autre.

S'appuyant sur un héritage de 60 ans d'innovation scientifique centrée sur le client, Waters a collaboré avec Pfizer pour relever le défi de concevoir une nouvelle colonne RPLC pour les séparations à haut débit avec une résolution, une sélectivité et une récupération améliorées des AcM et des ADC cibles.

Le partenariat avec Pfizer s'est avéré extrêmement bénéfique, car les scientifiques du groupe de spectrométrie de masse et de caractérisation biophysique de la R&D analytique de Pfizer ont veillé à ce que le résultat final apporte une valeur maximale aux scientifiques biopharmaceutiques travaillant avec des AcM et des ADC.

En collaboration avec des scientifiques de Pfizer, les scientifiques de Waters ont analysé une gamme de mAbs et ADCs en utilisant différentes conditions de phase mobile. Les résultats de ces études ont systématiquement démontré les propriétés cinétiques supérieures de la particule de base par rapport aux phases stationnaires RPLC conventionnelles, et ont montré que la nouvelle phase liée au polyphényle offre une résolution et une sélectivité améliorées pour réaliser des séparations reproductibles à haut débit, avec une résolution et une sélectivité améliorées pour les séparations RPLC et RPLC compatibles avec la spectrométrie de masse. De plus, cette nouvelle phase stationnaire permet des températures plus basses et un appariement d'ions moins acides pour limiter la dégradation des AcM et des ADC cibles.

En fin de compte, après une évaluation approfondie, Waters a développé cette nouvelle technologie de particules dans la colonne polyphényle BioResolve RP mAb pour des séparations plus fiables et de pointe des mAb et ADC, afin de soutenir la découverte et la conception de médicaments, le développement de processus et de produits, et la commercialisation de médicaments qui sauvent des vies.

Le groupe de caractérisation biophysique et de spectrométrie de masse de la R&D analytique de Pfizer a intégré les colonnes polyphényles pour mAb de BioResolve RP dans ses procédures opérationnelles standard pour la caractérisation de nombreux mAbs et bioconjugués dans le pipeline de la société. Les scientifiques et les équipes de Pfizer peuvent être certains que les formes respectives de la protéine et du conjugué sont étroitement surveillées en termes d'intégrité moléculaire et/ou d'étendue de la conjugaison pour évaluer la qualité, la sécurité et l'efficacité du produit.

Plus d'informations :

• Voir les formats disponibles de la colonne polyphényl mAb BioResolve RP.
• Bill Warren, chef de produit, fournit des détails supplémentaires ainsi qu'une infographie dans "I Resolve to Get Better mAb Separations".
• Tutoriel dans les Nouvelles du génie génétique
• Webinaire le 9 novembre (disponible à la demande) : Relever les défis analytiques de la caractérisation en phase inversée des protéines thérapeutiques, avec Jacquelyn Smith de Pfizer et Jennifer Nguyen de Waters.
• En chimie analytique : Méthode rapide de LC-MS pour la détermination précise du poids moléculaire des protéines membranaires et hydrophobes