En combien de temps peut-on passer d'une protéine glycosylée à la confirmation d'un fragment de glycan ?

Or, l'analyse des N-glycanes libérés prend à peu près autant de temps qu'il en faut à Tom Brady et aux New England Patriots pour effacer un déficit de 10 points et gagner un match de football.

Une exagération ? Peut-être, mais avec l'aide du nouveau kit N-Glycan RapiFluor-MS de Waters GlycoWorks, en combinaison avec le système H-Class ACQUITY UPLC de Waters, les détecteurs FLR et QDa ACQUITY UPLC, il est possible d'atteindre de nouveaux niveaux de vitesse, de sensibilité et de simplicité pour l'analyse des N-glycanes libérés.

Ce nouvel ensemble de technologies :

• Permet une déglycosylation et un marquage rapides, ainsi qu'un flux de travail en 3 étapes qui réduit le temps de préparation des échantillons d'une journée à moins d'une heure ;
• Permet la détection de masse pour la caractérisation et le développement avec une sensibilité de 100 à 1 000 fois supérieure aux approches actuelles ;
• Et permet une utilisation de routine en laboratoire soutenue par un protocole simple et robuste sans impliquer d'experts en SM.

"Notre nouvelle approche révolutionnaire des analyses de glycanes signifie que les scientifiques peuvent surveiller et caractériser les N-glycanes libérés comme jamais auparavant", a déclaré Mike Yelle, vice-président de l'unité commerciale Consommables de la division Waters. "Les nouveaux flux de travail prennent ce qui avait été une activité spécialisée et compliquée et la transforment en une activité avec laquelle les scientifiques et les laboratoires peuvent réussir."

Soutien au développement, à la surveillance et à la libération des lots de glycoprotéines

Pour les scientifiques chargés du développement de procédés biothérapeutiques, de la surveillance des procédés ou de la mise en circulation de lots, l'association de la nouvelle technologie de marquage RapiFluor-MS avec le système de classe H ACQUITY UPLC de Waters et le détecteur QDa ouvre une nouvelle ère pour la surveillance des profils de N-glycan libérés. Les avantages de vitesse et de sensibilité du réactif et du protocole permettent une analyse MS simple et de routine. La confirmation de l'affectation des glycanes par les données de masse produites par le détecteur QDa d'ACQUITY fournit des informations qui n'étaient pas disponibles auparavant. Les scientifiques sont désormais en mesure de répondre aux questions qui se posent fréquemment lors du développement, du transfert et de l'exécution des méthodes de profilage des glycanes sans avoir à faire appel à des experts en spectrométrie de masse et à des instruments LC-MS de plus haute résolution.

Soutien à la caractérisation des glycanes

La caractérisation des glycanes implique l'identification de tous les glycanes attachés à une glycoprotéine, quelle que soit leur concentration, et la vérification de leur structure moléculaire. Pour y parvenir efficacement, il faut une instrumentation UPLC-MS-MS à la hauteur du défi.

La solution d'application de glycanes de Waters avec UNIFI, qui fait partie de la solution plus large de plateforme biopharmaceutique de Waters avec UNIFI, introduite en 2013, consiste en un système UPLC/QTof-MS à haute résolution qui caractérise et surveille les glycanes dans les laboratoires de découverte et de développement biopharmaceutiques, ainsi que dans les organisations hautement réglementées de développement tardif et de CQ.

Désormais, grâce à la sensibilité accrue rendue possible par l'étiquette RapiFluor-MS, les chercheurs constateront une plus grande réponse optique et spectrométrique de masse. Cela facilite la confirmation précise de la masse pour les pics de faible niveau et améliore la fragmentation des glycanes par MS/MS pour une affectation définitive des glycanes.

En savoir plus

Webinaire avec Genetic Engineering News : Simplifier l'analyse des N-Glycanes grâce à un flux de travail rapide et rationalisé et à une sensibilité exquise
Date de diffusion : Mercredi 25 mars 2015
Heure : 11 h 00 ET, 8 h 00 PT

Cet article a été initialement publié dans Pittcon Today le lundi 9 mars 2015. Il a été rédigé en collaboration avec Jennifer Fournier, chef de produit chez Waters, et Brian J. Murphy, spécialiste des relations publiques chez Waters.