Contrôle des attributs multiples des produits biopharmaceutiques par détection de masse

Le contrôle des attributs multiples est devenu un sujet de discussion brûlant au sein des organisations biopharmaceutiques, car cette méthodologie permet de détecter et de mesurer un plus grand nombre d'attributs de qualité critiques que les méthodes conventionnelles. Waters a récemment parrainé un remarquable webinaire sur ce sujet, organisé par Genetic Engineering News et présenté par notre propre directeur principal de la biopharmacie, Sean M. McCarthy, Ph.D.

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Sean a commencé ce webinaire de 45 minutes par un aperçu et les avantages de cette méthodologie et la façon dont la détection de masse peut fournir la spécificité et la sensibilité nécessaires lors de la surveillance de routine des PTM de protéines et des tests d'identité lorsqu'elle est utilisée en complément des flux de travail optiques. Il a parlé de la conception et des capacités uniques du détecteur QDa d'ACQUITY, ainsi que de sa capacité à être déployé dans des environnements conformes qui utilisent le logiciel Empower 3. Il a également expliqué comment le détecteur ACQUITY QDa révolutionne la surveillance des profils de N-Glycan libérés lorsqu'il est utilisé avec RapiFluor-MS, une nouvelle technologie de marquage rapide.

Sean a conclu le webinaire en répondant à certaines des nombreuses questions perspicaces que les membres de l'auditoire ont soumises pendant la présentation. Voici quelques-unes des principales questions et les réponses de Sean.

Question: Quelle est la différence entre un instrument de masse précis comme un TOF et l'ACQUITY QDa ?

Réponse: Les principales différences entre ces deux types d'instruments résident dans leur résolution et leur sensibilité. Un instrument basé sur le TOF est principalement utilisé à des fins de caractérisation lorsqu'il est nécessaire d'identifier des composants, parfois à des niveaux très bas. Le TOF est toujours d'une importance vitale pour la caractérisation des molécules et le restera dans un avenir prévisible. En revanche, l'ACQUITY QDa est un instrument quadripolaire, qui offre une résolution de masse unitaire et une sensibilité moindre par rapport à un TOF. Pour cette raison, un ACQUITY QDa n'est pas adapté à la caractérisation, mais il est très bien adapté au suivi des composants qui ont été précédemment identifiés dans les études de caractérisation. De plus, si de nouveaux composants apparaissent, l'ACQUITY QDa offre la possibilité d'attribuer des informations sur la masse nominale de l'espèce afin de faciliter les efforts de caractérisation. L'ACQUITY QDa est bien adapté aux applications de routine où l'ajout d'informations sur la masse augmente la confiance et améliore la spécificité en permettant aux utilisateurs de se concentrer sur les composants d'intérêt en utilisant des flux de travail familiers.

Question: Quelle est la limite de quantification (LOQ) de l'ACQUITY QDa en termes de quantité de peptide ?

Réponse: Malheureusement, il n'y a pas de réponse unique à cette question, et cela dépend de la nature du peptide analysé. Ce qui est bien connu, c'est que l'efficacité d'ionisation des peptides résultant d'une digestion typique d'un anticorps monoclonal, et d'autres protéines également, est que la gamme dynamique de réponse s'étend sur au moins deux ordres de grandeur, quel que soit le spectromètre de masse utilisé. C'est le résultat des propriétés du peptide plutôt que de l'instrument utilisé. Cela dit, la charge massique du peptide souvent utilisée dans les essais optiques en aval est plus importante que celle utilisée dans les laboratoires de caractérisation. C'est précisément là que le QDa d'ACQUITY trouve sa place. Avec cette charge massique accrue, nous avons constaté que l'ACQUITY QDa offre la sensibilité appropriée pour surveiller les modifications de peptides de faible niveau.

Question: Pourriez-vous commenter l'analyse du PS-80 ? Les images montrées sont pour le détecteur ELSD ou ACQUITY QDa ?

Réponse: Pour l'analyse du PS-80, nous avons utilisé les détecteurs ELSD et QDa. Le flux de la colonne est divisé 50/50 pour alimenter chaque détecteur et fournir un échantillon adéquat à chaque niveau de concentration testé. Les données ELSD sont utilisées pour la quantification et ont été utilisées pour créer la courbe d'étalonnage. Les chromatogrammes présentés sur la diapositive sont ceux de l'ELSD. L'ACQUITY QDa est utilisé pour collecter un profil de masse du PS-80 qui sont les spectres montrés à gauche et à droite de la courbe d'étalonnage. Ces spectres représentent les données à l'extrémité supérieure et inférieure de la courbe d'étalonnage à 500 et 25 ppm respectivement.

Nous continuerons probablement à entendre parler de la surveillance des attributs multiples à mesure que les entreprises réaliseront les avantages de cette méthodologie en termes de productivité, d'efficacité, de coût et de conformité. L'ACQUITY QDa de Waters, ainsi que RapiFluor-MS, permettront aux organisations de collecter des données de masse de manière routinière pour une plus grande confiance et une meilleure compréhension de leurs séparations.

Vous avez hâte de voir l'intégralité du webinaire et d'entendre d'autres grandes questions de l'auditoire ? Regardez-le à la demande maintenant.