Détection de masse et CQ des AcM : Comment une méthode de cartographie peptidique rentable et robuste confirme les peptides CDR - et peut être validée

Les problèmes de qualité des produits thérapeutiques biopharmaceutiques sont nettement différents de ceux des médicaments chimiques en raison de la complexité accrue des processus de fabrication et de la complexité des molécules biologiques elles-mêmes. Il existe un besoin croissant de caractérisation détaillée du produit et de contrôle du processus de fabrication.

Sheng Hou et.al. ont développé et validé une méthode de cartographie peptidique de l'adalimumab pratique, rentable et robuste pour l'analyse CQ de routine. La méthode a été entièrement validée pour répondre aux exigences de la norme ICH-Q2 et a été appliquée avec succès à l'analyse CQ de routine du développement de biosimilaires d'adalimumab. L'étude a été publiée récemment en ligne dans Chromatographia .

La cartographie peptidique basée sur la LC est largement utilisée pour établir l'identité des protéines, évaluer la pureté et détecter les modifications post-traductionnelles (PTM) des protéines recombinantes dans l'industrie biopharmaceutique. La caractérisation des peptides de la région déterminante complémentaire (CDR) est nécessaire car ils sont des marqueurs caractéristiques permettant de distinguer différents anticorps monoclonaux (mAbs) et doivent être identifiés.

Cependant, la manière d'identifier avec précision les peptides des régions CDR lors des analyses de contrôle de qualité (CQ) de routine reste un défi.

Une nouvelle méthode LC utilisant la détection de masse, avec le détecteur ACQUITY QDa, pourrait être utile pour le développement de biosimilaires d'adalimumab, et peut être utilisée comme modèle de méthode pour l'analyse CQ de routine d'autres mAbs recombinants.

L'ACQUITY QDa est le premier détecteur de masse à apporter des données spectrales de masse de haute qualité aux séparations chromatographiques, introduit en 2013 par Waters Corporation. L'ACQUITY QDa offre la possibilité d'employer une analyse par spectrométrie de masse facile à utiliser comme technique de détection orthogonale dans un seul flux de travail pour les analyses de peptides et de glycanes.

Dans cette étude, les résultats démontrent que la LC avec détection de masse, couplée au TUV, fournit une méthode simple, rentable et robuste pour la confirmation qualitative des peptides CDR. Un total de huit peptides spécifiques des CDR peut être identifié lorsque les régions CDR de l'adalimumab ont été digérées par voie enzymatique.

En outre, l'équipe a également évalué la méthode d'autres paramètres pour s'assurer que la méthode est pratique et efficace. Huit peptides au sein de la CDR de l'adalimumab ont été validés avec précision, ainsi que le trastuzumab et le cetuximab, et l'évaluation de dix autres anticorps a confirmé la haute spécificité de cette méthode.

Cette nouvelle méthode de détection LC-UV-masse est une méthode de cartographie peptidique simple, rentable et robuste pour d'autres anticorps monoclonaux recombinants lors d'analyses de contrôle de qualité de routine.

Pour plus d'informations :

• Sheng Houal. Développement et validation d'une méthode de cartographie peptidique pour la caractérisation de l'Adalimumab avec un détecteur QDa. Chromatographia. DOI 10.1007/s10337-016-3046-8
• Utilisation de la détection de masse pour le suivi des peptides et des glycanes