Système BioAccord et ACQUITY Premier : certaines choses fonctionnent mieux ensemble

Scott Berger

Temps de lecture : 5 minutes

Il est devenu évident que tous les éléments d'un flux de travail analytique contribuent à la qualité des données résultantes et à l'efficacité avec laquelle ces données peuvent être acquises. Au-delà de l'amélioration de la qualité des données, des flux de travail de laboratoire bien conçus et exécutés minimisent les échecs d'analyse, réduisent les coûts de validation et facilitent le transfert efficace des méthodes entre les laboratoires. Le système LC-MS BioAccord s'est révélé être une force perturbatrice pour l'amélioration de l'analyse biothérapeutique de routine. Il fournit des analyses de haute performance aux experts non-MS, ainsi qu'une informatique connectée aux eaux, permettant à l'industrie biopharmaceutique de déployer facilement ces technologies intégrées dans les organisations réglementées de développement, de fabrication et de qualité.

Il est nécessaire d'aller plus loin pour concrétiser la vision de nombreuses entreprises et organismes de réglementation, qui souhaitent transformer leurs essais analytiques existants en plateformes modernes capables de mesurer directement les attributs biothérapeutiques. Les régulateurs et les entreprises biopharmaceutiques suggèrent que le passage à des mesures directes multiplexées basées sur les attributs augmentera la qualité et la quantité d'informations sur le produit et le processus dont les entreprises doivent disposer pour fabriquer un produit plus sûr et plus cohérent.

 

Le système LC-MS BioAccord comporte désormais l'UPLC ACQUITY Premier comme entrée par défaut, intégrant le système le plus performant pour les bioséparations dans un système optimisé pour l'analyse de routine des attributs biothérapeutiques. Cette nouvelle génération d'analyses basées sur les attributs remplacera probablement une multitude d'analyses moins sensibles et à faible contenu informatif, ce qui permettra de réaliser des économies de temps et d'argent tout en réduisant les risques de déviation des processus et de la qualité.

Le chemin vers des séparations impartiales

Les analyses qualitatives les plus sensibles et les analyses quantitatives les plus précises nécessitent une détection efficace et exacte des analytes. On sait depuis longtemps que la récupération de biomolécules à partir de séparations chromatographiques peut créer des problèmes de sensibilité d'analyse, et qu'un comportement chromatographique non idéal pourrait remettre en cause l'exactitude et la précision ultimes des résultats.

Les particules chromatographiques elles-mêmes sont l'une des principales causes de ces résultats non idéaux. Les particules à base de silice, qui ont longtemps été la technologie de base pour la séparation des petites et grosses molécules, ont tendance à générer des groupes silanol exposés en surface avec une charge négative. Lorsque les séparations en phase inverse de digests de peptides tryptiques sont effectuées dans des conditions acides, il en résulte un ensemble de peptides chargés positivement, généralement avec deux charges ou plus. Ces peptides nécessitent des agents d'appariement d'ions plus puissants, comme le TFA, pour surmonter ces interactions entre particules basées sur la charge secondaire afin de générer des pics étroits avec une forme de pic idéale pour la détection et la quantification. Bien que les améliorations apportées à la liaison des particules et à l'endcapping aient permis d'améliorer ces séparations, c'est le développement par Waters d'une technologie de particules d'organo-silice Bridged-Ethyl-Hybrid - avec une stabilité intrinsèquement plus élevée et une activité silanol plus faible - qui a catalysé le développement de la chimie moderne de bioséparation pour les biothérapies. L'élimination de cette interaction secondaire indésirable a ouvert la voie à la construction de colonnes plus robustes et plus efficaces pour toutes les séparations de biomolécules, de la phase inversée à la SEC.

De l'autre côté du spectre des charges, les biomolécules à charges négatives multiples sont connues pour interagir avec les ions métalliques et les surfaces métalliques, et dans certains cas, elles produisent de fortes interactions qui entraînent une perte d'analyte et une largeur/forme de pic non optimale. Il existe des additifs que l'on peut mélanger à l'échantillon ou ajouter à la phase mobile, mais ils compliquent la préparation de la phase mobile et peuvent interférer avec la détection optique et la détection par SM. L'évolution vers des systèmes biocompatibles avec des matériaux exempts de fer, tels que le titane et le MP35N, peut fournir une protection contre les sels et les pH dans les modes de séparation aqueux et des surfaces avec une exposition de surface aux ions métalliques considérablement réduite.

Figure 1

Waters a utilisé ces systèmes biocompatibles comme base pour la prochaine génération de plateformes de bioséparation UPLC, ACQUITY Premier. Ces systèmes utilisent la technologie MaxPeak High Performance Surfaces (HPS). Cette technologie modifie davantage les surfaces biocompatibles des composants à surface élevée et protège donc les analytes sensibles aux métaux de l'interaction avec les surfaces métalliques - sans dégrader les processus de séparation sous-jacents. Ces systèmes, lorsqu'ils sont associés au HPS, protègent les chimies de la colonne Premier contenant des chimies hybrides à base de particules. Cela crée une plateforme optimisée pour les flux d'analyse biothérapeutique les plus sensibles, robustes et reproductibles sur le système BioAccord.

Réaliser les avantages d'ACQUITY Premier sur le système BioAccord

Avec l'introduction du système Premier d'ACQUITY, plusieurs notes d'application ont été générées démontrant la performance exceptionnelle des systèmes Premier pour les bioséparations optiques à base de solvant aqueux et organique, et comme entrée MS. D'autres applications ont été générées pour documenter les performances différenciées des colonnes Premier pour plusieurs modes de bioséparations.

Dans le cadre de la vérification du système intégré BioAccord avec ACQUITY Premier, Waters a confirmé les méthodes utilisées pour les tests d'installation axés sur les applications et la formation aux applications, et a documenté les analyses communes spécifiques pour lesquelles le système intégré et les chimies Premier démontrent des performances supérieures :

La possibilité d'obtenir une plus grande réponse du système pour ces classes de molécules, ainsi que les gains de robustesse et de productibilité résultant d'une récupération et d'une chromatographie cohérentes de tous les composants de ces bioséparations complexes, soutiennent l'adoption de cette plateforme de système LC-MS intégré.

Un engagement en faveur de l'innovation contrôlée

L'innovation est à la fois nécessaire et inévitable pour faire face à la complexité croissante des modalités biothérapeutiques traditionnelles et aux nouveaux défis posés par les thérapies cellulaires et géniques naissantes. Waters continue d'investir dans la R&D fondamentale et appliquée, de l'automatisation de la préparation des échantillons à la production de nouveaux flux d'analyse de données, afin de relever ces défis en constante évolution.

Le système BioAccord a été conçu pour compléter les capacités des groupes de développement pour la caractérisation des produits et des processus et a été spécialement conçu pour l'analyse des biothérapies basée sur les attributs dans les organisations de développement tardif, de fabrication et de qualité. Ces derniers environnements réglementés exigent des instruments qualifiés et des méthodes validées qui nécessitent des plates-formes stables sur des périodes prolongées afin d'éviter des perturbations et des dépenses inutiles. Il s'agit d'une éthique à laquelle Waters adhère depuis longtemps, depuis des décennies de soutien aux produits chimiques, jusqu'au lancement et à la mise à jour minutieux de produits informatiques de laboratoire et d'entreprise tels que Empower, NuGenesis et waters_connect. Les produits doivent être mis sur le marché dans leur état d'utilisation maximale, les mises à jour critiques doivent être effectuées en temps opportun et les améliorations doivent être conçues pour faciliter l'intégration dans les architectures en réseau existantes et le transfert des méthodes et des données existantes. C'est dans cet esprit que Waters a délibérément combiné son entrée LC la plus performante pour les bioséparations avec sa plateforme de détection MS la plus performante pour l'analyse par attributs.

Il s'agit du système BioAccord avec ACQUITY Premier. Pour en savoir plus.