¿Qué detector de CL debo comprar?


Puede que no te guste la respuesta...

WG_UC_Viet_blog_prism_330pxEl otro día, estaba con un cliente cuando me preguntó: "Viet, ¡hay tantos detectores por ahí! ¿Cómo puedo saber cuál necesito?". A lo que respondí con el único comentario que a todos les encantará odiar: "¡Depende!".

Los detectores para los instrumentos de cromatografía tienen todo tipo de formas y tamaños. No hay un tipo que se adapte a todas las aplicaciones, y a veces puede ser necesario más de un detector para realizar un análisis completo de la muestra. Los detectores ópticos se dividen en dos tipos:

  1. Detectores de propiedades selectivas que miden la concentración utilizando un atributo único de la muestra (por ejemplo, detectores UV/Vis)
  2. Detectores de propiedades a granel que miden los cambios
    en el disolvente y el soluto como un todo (por ejemplo, los detectores de índice de refracción)

Mi deseo es eliminar la confusión provocada por la amplia gama de detectores disponibles para ayudarle a tomar una decisión más informada sobre qué detector es el adecuado para su proyecto.

Entonces, ¿qué detector de LC debo elegir?

UV/Visible (UV/Vis): los detectores UV/Vis se presentan en diversas formas: longitud de onda fija y longitud de onda variable. Estos detectores se limitan tradicionalmente a una o dos longitudes de onda y, como su nombre indica, deben tener la capacidad de absorber en el rango UV/Visible, normalmente en torno a los 190-800 nm. Suelen utilizarse en análisis rutinarios en los que la longitud de onda detectada no cambia y el uso más común se limita a una longitud de onda a la vez. Como la longitud de onda no cambia durante un análisis, el ruido de la línea de base tiende a ser muy bajo. La combinación de buena sensibilidad, amplio rango de aplicación, excelente rango dinámico lineal y facilidad de uso hacen del detector de absorbancia UV/visible un excelente detector de uso general. Los detectores UV/Vis son los más comunes en la industria y tienen una funcionalidad específica que normalmente los convierte en los detectores más baratos del mercado.

Matriz de fotodiodos (PDA) - Un detector PDA es similar al detector UV/Vis porque requiere una muestra con un cromóforo que absorba en el rango UV/Visible. La clara ventaja de estos detectores sobre los detectores UV/Vis es que se recogen espectros completos, lo que permite monitorizar la absorbancia en múltiples longitudes de onda simultáneamente. La recogida de espectros también permite al usuario evaluar la homogeneidad (también conocida como pureza) de un pico comparando los espectros dentro de un pico. La capacidad de evaluar la homogeneidad de los picos y de monitorizar múltiples longitudes de onda simultáneamente hace que el detector PDA sea especialmente atractivo para el desarrollo de métodos y el análisis de muestras complejas. Los detectores PDA aportan una gran profundidad de información y detalle adicional en los datos. Como resultado, estos detectores tienden a tener el precio más alto de todos los detectores hasta que se entra en la detección de masas.

Fluorescencia (FLR) - El detector FLR se selecciona normalmente cuando se necesita selectividad o más sensibilidad de la que se puede proporcionar con los otros detectores. El aspecto más importante a la hora de seleccionar este detector es que la muestra que se desea analizar debe ser fluorescente o se debe derivar la muestra con un agente fluorescente. Los atributos deseables del detector FLR incluyen la especificidad hacia ciertas clases de compuestos y la alta sensibilidad. Los detectores de FLR tienden a tener un precio más elevado que un detector UV/Vis porque el detector necesita dos de todo, pero no debe esperar pagar el doble de lo que cuesta un detector UV/Vis. Usos comunes: aminoácidos, aflatoxinas, vitaminas, poliaromáticos

Índice de refracción (RI) - El detector RI se considera un detector universal. El detector RI fue el primer tipo de detector creado para la cromatografía de permeación en gel (GPC). Depende del hecho de que todas las muestras cambiarán el índice de refracción del disolvente, por lo que puede detectar cualquier compuesto. El detector de índice de refracción monitoriza y mide las propiedades de refracción de la fase móvil que pasa a través de él, comparándola con una referencia de fase móvil no adulterada. A medida que la fase móvil arrastra otros compuestos, se registra el cambio en el índice de refracción, en comparación con la referencia. El inconveniente de utilizar un detector de índice de refracción es que sólo se pueden ejecutar métodos isocráticos. Al tratarse de un detector universal de propiedades en masa, su sensibilidad es limitada. Debido a las limitadas capacidades y funcionalidades de estos detectores, suelen tener un precio similar al de un detector UV/Vis. Usos comunes: azúcares, polímeros, ácidos grasos

Dispersión de luz por evaporación (ELS) - Los científicos que utilizan el detector ELS suelen emplear el detector para muestras que tienen una respuesta UV/Vis baja o nula y que no se ionizan bien para la espectrometría de masas. La detección ELS tiene algunas limitaciones, ya que es una técnica destructiva y no funciona bien cuando la volatilidad de la muestra es similar a la de la fase móvil y el ELSD no tiene un gran rango lineal. Sin embargo, el detector ELS tiene una amplia aplicabilidad en virtud de que el detector también es un detector de propiedades a granel o "universal". Debido a las capacidades únicas que un detector ELS proporciona a un cromatógrafo, el precio de estos detectores puede a veces rivalizar con el de un PDA. Usos comunes: triglicéridos, lípidos, productos naturales, azúcares y aceites.

Detección de masas - La detección de masas proporciona confirmación, mediante la asignación de masas, por lo que los espectros de masas contienen más información cualitativa que es única para la estructura de la molécula objetivo que los espectros UV/visible y de fluorescencia. La EM proporciona tanto la confirmación de la identidad de los picos como una detección sensible. El mayor reto del detector de masas es la detección de muestras neutras. Cuando las muestras no pueden captar una carga (positiva o negativa), el detector de masas no puede desplazar adecuadamente la muestra a través del detector para analizarla.

Aun así, la detección por EM es cada vez más popular gracias a los avances tecnológicos que han permitido reducir el tamaño del detector de sobremesa y facilitar su puesta en marcha y mantenimiento, lo que la hace más accesible para los cromatógrafos, que suelen ser los nuevos usuarios de la detección por EM. A medida que más científicos exploran las capacidades de la detección por EM, se descubren y explotan nuevas formas y medios de ionizar los compuestos. La EM, que antes era un esquema de detección que se buscaba principalmente para obtener información cualitativa, se está adoptando ahora para fines cuantitativos, especialmente para ensayos que requieren una sensibilidad extrema. Cuando se trata de los precios para obtener un análisis de masas para un laboratorio, los precios pueden variar enormemente dependiendo del tipo de instrumento que se seleccione.

Incluso con los detectores que hemos cubierto hoy, todavía hay una variedad de detectores de nicho a considerar, que incluyen, pero no se limitan a: electroquímicos, de conductividad, de dispersión de luz multiángulo (MALS), de descarga de aerosol de corona (CAD) y detectores de rotación óptica - sólo para nombrar unos pocos.

Recursos adicionales:

Sígame en este blog, ya que a continuación analizaré las diferencias entre los instrumentos de LC binarios y cuaternarios, y cómo elegir el adecuado para las necesidades de su laboratorio.