¿Con qué rapidez se puede pasar de una proteína glicosilada a la confirmación de un fragmento de glicano?

Ahora, analizar los N-glicanos liberados lleva más o menos el mismo tiempo que le lleva a Tom Brady y a los New England Patriots borrar una desventaja de 10 puntos y ganar un partido de fútbol americano.

¿Una exageración? Tal vez, pero con la ayuda del nuevo kit GlycoWorks RapiFluor-MS N-Glycan de Waters en combinación con el sistema ACQUITY UPLC H-Class de Waters, los detectores ACQUITY UPLC FLR y ACQUITY QDa , es posible alcanzar nuevos niveles de velocidad, sensibilidad y simplicidad para el análisis de N-glicanos liberados.

Este nuevo conjunto de tecnologías:

• Permite una rápida deglicosilación y etiquetado, y un flujo de trabajo de 3 pasos que reduce el tiempo de preparación de la muestra de un día a menos de 1 hora;
• Permite la detección de masas para la caracterización y el desarrollo con una sensibilidad que es de 100 a 1.000 veces mejor que los enfoques actuales;
• Y permite el uso rutinario en el laboratorio con el apoyo de un protocolo simple y robusto sin involucrar a los expertos en EM.

"Nuestro nuevo e innovador enfoque de los análisis de glicanos significa que los científicos pueden supervisar y caracterizar los N-glicanos liberados como nunca antes", dijo Mike Yelle, Vicepresidente de la Unidad de Negocio de Consumibles de la División Waters. "Los nuevos flujos de trabajo toman lo que había sido una actividad especializada y complicada y la transforman en una con la que los científicos y los laboratorios pueden tener éxito".

Apoyo al desarrollo del proceso de glicoproteínas, supervisión y liberación de lotes

Para los científicos que se dedican al desarrollo de procesos bioterapéuticos, a la monitorización de procesos o a la liberación de lotes, el emparejamiento de la nueva tecnología de etiquetado RapiFluor-MS con el sistema ACQUITY UPLC H-Class de Waters y el detector QDa marca el comienzo de una nueva era para la monitorización del perfil de N-glicanos liberados. Las ventajas de velocidad y sensibilidad del reactivo y el protocolo permiten un análisis de MS sencillo y rutinario. La confirmación de la asignación de los glicanos a través de los datos de masa producidos por el ACQUITY QDa Detector proporciona información que antes no estaba disponible. Los científicos tienen ahora la posibilidad de responder a las preguntas que surgen con frecuencia durante el desarrollo, la transferencia y la ejecución de métodos de perfiles de glicanos sin tener que depender de expertos en espectrometría de masas ni de instrumentos LC-MS de mayor resolución.

Apoyo a la caracterización de los glicanos

La caracterización de los glicanos implica la identificación de todos los glicanos unidos a una glicoproteína, por pequeña que sea su concentración, y la verificación de su estructura molecular. Para hacerlo de forma eficiente se requiere una instrumentación UPLC-MS-MS a la altura del reto.

La solución de aplicación de glicanos de Waters con UNIFI, que forma parte de la solución más amplia de la plataforma biofarmacéutica de Waters con UNIFI, presentada en 2013, consiste en un sistema de UPLC/QTof-MS de alta resolución que caracteriza y supervisa los glicanos en los laboratorios de descubrimiento y desarrollo biofarmacéutico, así como en las organizaciones de desarrollo y control de calidad de las últimas fases, que están muy reguladas.

Ahora, con la mayor sensibilidad que permite la etiqueta RapiFluor-MS, los investigadores verán una mayor respuesta óptica y de espectrometría de masas. Esto facilita la confirmación precisa de la masa para los picos de bajo nivel y mejora la fragmentación de glicanos MS/MS para la asignación definitiva de los glicanos.

Más información

Webinar con Genetic Engineering News: Simplificación del análisis de N-glicanos con un flujo de trabajo rápido y racionalizado y una sensibilidad exquisita
Fecha de emisión: Miércoles, 25 de marzo de 2015
Hora: 11:00 am ET, 8:00 am PT

Este artículo se publicó originalmente en Pittcon Today el lunes 9 de marzo de 2015. Fue escrito en colaboración con Jennifer Fournier, gerente de productos de Waters, y Brian J. Murphy, especialista en relaciones públicas de Waters.