Escalado de métodos en HPLC preparativa: Método analítico y
Método preparativo

Personal de Waters

Tiempo de lectura: 2 minutos

Andrew Aubin (Andy): Director, Laboratorio de Purificación / Marketing de Sistemas SFx y Blogger
VOC: La voz del químico

VOC:"Intenté escalar mi método analítico de HPLC a la preparación y no funcionó".

Andy: Esta es una de las cosas más comunes que escuchamos de los químicos que quieren hacer cromatografía preparativa. También escuchamos la siguiente pregunta con bastante frecuencia:

VOC: " Tengoun buen método analítico de HPLC, ¿cómo lo escalo a la preparación?"

Andy: En este breve blog, proporcionaré algunas de las cosas básicas que hay que hacer cuando se trata de escalar un método analítico a la preparación.

 

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Método analítico

Método analítico

En primer lugar, hay que desarrollar el mejor método analítico posible. Mejores métodos analíticos significan mejores métodos preparatorios. Las fases móviles deben ser las mismas tanto a escala analítica como preparatoria, idéntica A, idéntica B, y tener la misma concentración de aditivos. Las muestras deben hacerse a la misma concentración utilizando el mismo diluyente. Asegúrese de que existe una versión preparativa de su columna analítica, ya que la química de su columna debe ser la misma.

También ayuda que ambas columnas tengan el mismo tamaño de partícula y longitud. Los estudios de carga pueden ser útiles en esta fase para que los usuarios confirmen que se mantendrá una resolución adecuada a escala preparativa.

Por último, tenga en cuenta que los sistemas de preparación generalmente no tienen capacidad de calentamiento de la columna, por lo que podría ser mejor desarrollar su método analítico a temperatura ambiente.

 

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Método de preparación

Método de preparación

El escalado de su método analítico significa ajustar el caudal, la pendiente/tiempo del gradiente (incluyendo la compensación del volumen del sistema) y el volumen de inyección. La forma más fácil de determinar estas nuevas condiciones de escala es utilizar la calculadora de columnas Prep OBD.

Simplemente introduzca las condiciones analíticas y las dimensiones de la columna de preparación y la calculadora generará las condiciones de preparación adecuadas.

 

Para saber más sobre cómo escalar su método, consulte estas dos notas de aplicación: