¿Hemos salvado la brecha entre la calidad y la cantidad utilizando el SGRH?

Increasing Tamaño, Complejidad y Potencia: El reto bioanalítico de la próxima décadafue el tema de los tres días de la APA India, celebrada en Mumbai (India) del 23 al 25 de febrero de 2015. Cerca de 300 asistentes se reunieron para debatir las tendencias actuales y ofrecer estrategias para superar estos retos de cara al futuro.

La segunda sesión de la mañana fue Bioanálisis: Moléculas grandes y pequeñas. En su charla, titulada "Aplicaciones de los nuevos modos de adquisición y geometrías de los instrumentos en los espectrómetros de masas de tiempo de vuelo para la cuantificación dirigida", Stephen McDonald, director de marketing estratégico de productos farmacéuticos del grupo de marketing mundial de Waters, presentó la situación actual de la espectrometría de masas de alta resolución (HRMS), sentando las bases para un debate sobre la utilidad de la HRMS para la cuantificación.

A pesar de todas sus ventajas -especificidad, precisión frente a la masa nominal, sensibilidad de barrido completo-, la HRMS se emplea tradicionalmente en estudios cualitativos y menos en la cuantificación. Esto se debe principalmente a la incapacidad histórica de la tecnología para alcanzar los límites de detección deseados en comparación con la espectrometría de masas de cuadrupolo en tándem. El nuevo instrumento de tiempo de vuelo (TOF) de Waters, el Xevo G2-XS, se presentó en la ASMS en 2014. Con una célula de colisión cuadrupolar rediseñada y segmentada, la eficiencia de la transmisión de iones se incrementa significativamente, de modo que casi todos los iones entran en el TOF, lo que tiene un impacto dramático en la sensibilidad. Los datos presentados destacaron la comparación del nuevo G2-XS con su predecesor, el G2-S, con mejoras de 4 veces en el LLOQ, llegando a niveles bajos de dos dígitos de pg/mL para moléculas pequeñas. Con el uso de Tof MRM y Target Enhancement -un método de MS que toma prestadas las lecciones aprendidas con los instrumentos cuadrupolares en tándem e imita su geometría- se alcanzaron LLOQ de un solo dígito pg/mL. Los mismos experimentos realizados en el G2-XS acoplado con ionKey/MS -un dispositivo de microflujo integrado- produjeron niveles de detección de subpicograma, una mejora de casi 8 veces frente al G2-XS solo, y una mejora de casi 20 veces en relación con el método G2-S original.

La implicaciónns? Con la HRMS ya utilizada en el ámbito cualitativo, como en la caracterización de Conjugados de anticuerpos y fármacos (ADCs), existe el potencial de que la HRMS pueda salvar la brecha entre los actuales métodos cualitativos LC/MS y los ensayos cuantitativos de unión a ligando. Reunir estos métodos dispares en un único análisis podría mejorar drásticamente la eficiencia en el estudio de las ADC.

Durante el debate que siguió a esta sesión, una de las preguntas del público fue la resistencia existente a esta tecnología en un entorno regulado. El grupo coincidió en que se trata de los mismos problemas que se plantearon cuando el bioanálisis pasó de los ensayos basados en UV a la espectrometría de masas cuadrupolar en tándem. Para solucionar este problema, corresponde a la comunidad en general establecer las normas que rodean a la HRMS y, al mismo tiempo, es responsabilidad de los fabricantes de instrumentos hacerlos cada vez más accesibles y fáciles de usar.

Con el cambio de la industria del bioanálisis de moléculas pequeñas a grandes, especialmente en el caso de los ADCs, donde hay múltiples parámetros que deben ser abordados para una sola entidad, la HRMS puede muy bien ser una de las herramientas a las que la comunidad bioanalítica recurra para abordar estos desafíos.