La orientación al cliente de una de las principales organizaciones de investigación clínica permite mejorar la calidad y la productividad

Triskelion, una empresa de First Dutch Innovations

Desde 1932, Triskelion, una empresa de TNO y organización de investigación por contrato (CRO) líder en los Países Bajos, ha ayudado a clientes de todo el mundo a desarrollar productos que mejoran el bienestar y la salud de consumidores, animales y pacientes. Con resultados tan importantes en juego, Triskelion apoya a sus clientes mejorando constantemente su experiencia en análisis químico, cinética y metabolismo, inmunología, toxicología y evaluación de riesgos.

Aunque los tres sectores clave de la empresa -química, alimentos y piensos, y farmacéutico- representan una parte similar del negocio, Triskelion ha desarrollado pruebas analíticas especializadas en los sectores farmacéutico y alimentario. Su experiencia incluye ofertas analíticas que comprenden una cartera completa de servicios in vitro e in vivo para ADME, pruebas DMPK y bioanálisis de pequeñas moléculas y productos biofarmacéuticos.

Para prestar tantos servicios complejos, cruciales y sensibles al tiempo, Triskelion opera desde una infraestructura deliberadamente diseñada que combina los conjuntos de habilidades de los empleados y las tecnologías adecuadas, todo ello alineado para aumentar la eficiencia, la productividad y la calidad. En el centro de todo esto están sus clientes.

Ofrecer niveles de servicio únicos

En cuanto al sector farmacéutico, la Dra. Anne Kleinnijenhuis, gestora de proyectos y directora de estudios, afirma: "Lo que nos diferencia es nuestra capacidad para diseñar y desarrollar métodos bioanalíticos complejos¹ que apoyan a nuestros clientes desde el descubrimiento hasta el análisis de muestras preclínicas y clínicas. Nuestra competencia puede especializarse en una parte del proceso, pero Triskelion tiene las instalaciones internas para abordar todo el proceso de desarrollo de fármacos."

Para lograrlo, Triskelion trabaja con una amplia variedad de tecnologías específicamente elegidas, desde las moleculares, basadas en el ADN, hasta la instrumentación analítica (GC, LC-MS, IC-MS, ICP-MS), y combinaciones "híbridas" de estas tecnologías, según convenga.

"Nuestros clientes han llegado a depender de este enfoque de ventanilla única", dice Kleinnijenhuis. "Mientras que nuestra competencia tiende a centrarse en los análisis de rutina, nosotros tenemos una experiencia única en el desarrollo de estrategias analíticas complejas, especialmente para péptidos, proteínas y productos biofarmacéuticos como los conjugados de anticuerpos y fármacos (ADC)."

La experiencia analítica de Triskelion es tan sólida que ofrece con confianza un servicio único de respuesta de emergencia 24/7 a los fabricantes de productos farmacéuticos y alimentarios. Estos clientes confían en Triskelion para establecer rápidamente el origen, la causa y las posibles consecuencias de un incidente, como la adulteración de un producto farmacéutico o la contaminación de un lote a partir del líquido refrigerante en el proceso de fabricación. La amplia experiencia de la empresa en toxicología, evaluación de riesgos y microbiología ayuda a sus clientes a evitar resultados desastrosos, como el bloqueo de la entrada de un envío en China debido a la contaminación de un API. Triskelion presta estos servicios críticos utilizando una amplia gama de técnicas analíticas, como la microscopía electrónica y la LC-MS.

" Lo que nos diferencia es nuestra capacidad para diseñar y desarrollar métodos bioanalíticos complejos que apoyan a nuestros clientes desde el descubrimiento hasta el análisis de muestras preclínicas y clínicas."
Dra. Anne Kleinnijenhuis, gestora de proyectos y directora de estudios en Triskelion

Contratación y retención de la mejor mano de obra

Hoy en día, todas las empresas que dependen de la química analítica para el buen funcionamiento de sus negocios se enfrentan a un enorme desafío: la tecnología mejora constantemente y se vuelve más sofisticada, pero la mano de obra cualificada necesaria para manejar estos instrumentos se reduce.

Aun así, Triskelion se las arregla para contrarrestar esta tendencia contratando y reteniendo a grandes talentos. "Contamos con químicos, cromatógrafos y espectrómetros de masas de gran experiencia y talento en todas las áreas de nuestro laboratorio para cada uno de los mercados a los que servimos", afirma Richard Bas, BSc, Director Operativo de Análisis Instrumental. "Nuestros técnicos están formados y capacitados en espectrometría de masas biomolecular con títulos de licenciatura, maestría y/o doctorado".

Triskelion también entiende que, para retener a los mejores, debe invertir continuamente en la formación técnica e instrumental de sus científicos.

"Una de las razones importantes por las que utilizamos los instrumentos LC-MS de Waters es que, además de la calidad de los productos, Waters ofrece un alto grado de formación técnica. Esto nos proporciona el conocimiento y la confianza de que podemos resolver nuestras complejas preguntas de investigación."

Compromiso real con la eficiencia

Mantener la alta calidad y aumentar la eficiencia son más que objetivos corporativos en Triskelion: son compromisos de todos los miembros del equipo. "Cuando emprendemos un nuevo proyecto o estudio, examinamos cada paso del proceso para que sea lo más eficiente y económico posible", afirma Kleinnijenhuis. "La eficiencia no es sólo una palabra de moda aquí".

Nuestros módulos de métodos optimizados se aplican a futuros proyectos, cuando es necesario, lo que nos permite ofrecer proyectos de alta calidad y rentables a nuestros clientes".

Con la capacidad de analizar una amplia gama de moléculas, Triskelion requiere y utiliza una variedad de tecnología y técnicas analíticas. Hace varios años pasaron de HPLC a UPLC. Esto permitió a sus científicos acortar el tiempo de desarrollo de los métodos, reducir significativamente el coste de los disolventes y optimizar la utilización de los activos.

Los clientes biofarmacéuticos de Triskelion necesitan comprender el comportamiento de sus moléculas in vivo, lo que requiere estrategias analíticas complejas. "Después de diseñar y desarrollar un método básico, optimizamos el proceso para reducir los tiempos de incubación, aumentar el rango dinámico² (menos muestras fuera de rango significa menores tasas de reanálisis) y utilizar eficazmente las horas nocturnas para las corridas de muestras", dijo Bas. "Intentamos aumentar el número de muestras por tirada. Un cliente nos pidió que desarrolláramos y validáramos (BPL) varios ensayos híbridos cuantitativos para un ADC, que contenía una carga útil extremadamente tóxica."

Para triplicar el número de muestras por serie para este cliente, Triskelion adquirió una cabina de flujo laminar personalizada y utilizó ACQUITY UPLC acoplado a un espectrómetro de masas Xevo TQ-S. "Optimizamos el tiempo de ejecución para que las series más largas pudieran completarse durante la noche", dice Bas. "Esto nos permitió ofrecer análisis complejos a precios competitivos y reducir la duración del proyecto a la mitad".

Además, mantienen una diversidad de espectrómetros de masas, que procesan miles de muestras al mes. Recientemente, han adquirido el espectrómetro de masas Vion IMS QTof de Waters con capacidades de movilidad iónica. "Vion nos permite ver y aplicar una nueva dimensión de separación, lo que también mejora nuestro análisis de grandes moléculas intactas con una técnica diferente.

"Apreciamos el HDMSE porque esta función de MS-MS independiente de los datos nos ayuda en los experimentos de identificación de metabolitos (Met ID) al proporcionar una selectividad precisa y una medición rutinaria de cada ion detectado mediante una separación espectral limpia y una asignación estructural segura del fragmento al ion padre", dijo Kleinnijenhuis.

Responder a la demanda de niveles de detección cada vez más bajos

Con la continua expansión del mercado biofarmacéutico, los clientes buscan continuamente beneficiarse de la larga experiencia de Triskelion en el análisis de moléculas más grandes. Las tecnologías que les permiten alcanzar niveles más bajos de detección (LOD) y cuantificación (LOQ) son imprescindibles en este espacio.

Para ayudar a sus clientes, Triskelion utiliza la tradicional MS cuadrupolar en tándem acoplada a un flujo de LC de microflujo que oscila entre 1 y 100 μL/min y columnas con un diámetro interno (D.I.) entre 0,1 y 1,0 mm. Las ventajas son el aumento de la eficacia del muestreo, la resolución cromatográfica y la eficacia de la ionización, lo que es especialmente importante para las moléculas más grandes, como los péptidos y las proteínas terapéuticas.

Una ventaja adicional con una columna de pequeño diámetro interior es que los sistemas de LC requieren un menor flujo de fluido para realizar una separación cromatográfica, lo que se traduce en un menor consumo de disolvente y menores requisitos de volumen de inyección (Figura 1). Los requisitos de volúmenes de muestra pequeños son fundamentales para los estudios con muestras limitadas. Normalmente cargamos 10 μL de muestra biológica en un ensayo híbrido. En consecuencia, la LC-MS se convierte en una técnica instrumental más media, más ligera y más ecológica. Y lo que es más importante, este enfoque a escala proporciona ganancias de sensibilidad sobre sus homólogos de alto flujo.

Triskelion también utiliza el sistema ionKey/MS de Waters, que simplifica la hibridación de la UPLC de microflujo con la espectrometría de masas y proporciona un nivel de reproducibilidad y estandarización no visto con la LC-MS de microflujo tradicional. Modificando la preparación de la muestra y utilizando LC-MS de microflujo, consiguieron un LOQ significativamente más bajo para el infliximab en comparación con un método UPLC-MS desarrollado previamente.³ Antes de ionKey/MS, probaron la LC de nanoflujo tradicional, pero descubrieron que carecía de la solidez necesaria para sus aplicaciones bioanalíticas cuantitativas. Los problemas de arrastre y los tiempos de retención y ejecución relativamente largos limitaban su utilidad.

La adopción de la espectrometría de masas de movilidad iónica fue un paso importante para Triskelion porque "estamos haciendo bastantes estudios de Met ID", dijo Bas. "Las moléculas más grandes tienden a tener una estructura muy cercana con mucho fondo, por lo que tener otra dimensión de medición como la sección transversal de colisión (CCS ) de la movilidad iónica era de gran interés. Con algunos de nuestros anteriores instrumentos de nanoflujo y de especulación de masas de alta resolución, el análisis tardaba demasiado tiempo y no arrojaba suficientes puntos de datos a lo largo del pico".

Las capacidades de movilidad iónica de Vion, junto con el sistema de información científica UNIFI, también les ayudaron a limpiar los espectros y a mejorar la separación de péptidos análogos que sólo difieren en uno o unos pocos residuos, algo que suelen encontrar en su amplia cartera de análisis LC-MS de colágeno.

Observar e integrar las tendencias futuras

Hay una serie de tendencias y cambios en el sector que Triskelion sigue de cerca.

• El bioanálisis sigue siendo un reto a medida que los productos bioterapéuticos se vuelven más potentes y complejos, y con ello, la demanda de niveles crecientes de sensibilidad y tecnologías ortogonales.
• El aumento de la automatización para mejorar la eficiencia en los costes y la productividad está siempre presente, ya que la industria presiona continuamente la velocidad de salida al mercado.
• Por último, tanto Bas como Kleinnijenhuis prevén una mayor demanda de los clientes para ofrecer niveles de servicio y asistencia aún más elevados.

"Al centrarnos en contratar y retener a los mejores, integrar la tecnología adecuada y hacer lo mejor para nuestros clientes, estamos bien posicionados para satisfacer estas demandas y seguir siendo exitosos y competitivos durante muchos años."

Acerca de Triskelion: Excelencia analítica que beneficia a todos

Triskelion ha llevado sus servicios analíticos a la vanguardia de los métodos nuevos y mejorados. Este centro de excelencia especializado desempeña un papel fundamental a la hora de ayudar a los clientes farmacéuticos a desarrollar fármacos seguros y eficaces, proporcionando apoyo a la biodisponibilidad y al ADME-PK desde el descubrimiento de fármacos hasta el desarrollo preclínico y clínico. Son especialmente fuertes en el desarrollo de métodos y la validación de ensayos PK que permiten la identificación y cuantificación de metabolitos.

El centro también ofrece perfiles de ingredientes, control de calidad y pruebas de seguridad de alimentos y piensos. Además, sus modelos in vitro e in vivo les permiten generar pruebas con base científica sobre la eficacia de los alimentos e ingredientes alimentarios en los seres humanos. Mientras Triskelion sigue esforzándose por ofrecer los mejores servicios a sus clientes, el resultado final puede beneficiarnos a todos.

Referencias

1. Kleinnijenhuis AJ. Estrategias para el bioanálisis de proteínas mediante LC-MS.
2. Kleinnijenhuis AJ. Explorando el rango dinámico de péptidos de LC-MS.
3. Kleinnijenhuis AJ, Ingola M, Toersche JH, van Holthoon FL, van Dongen WD. Quantitative bottom up analysis of Infliximab in serum using protein A purification and integrated μLC-electrospray chip IonKey MS-MS technology (open access pdf). Bioanalysis 2016; 8, 891-904.
4. Descargue el pdf de este estudio de caso.